建立大鼠慢性非细菌性前列炎模型两种方法的比较研究

唐益文，王 雄，周艳艳，陈豪特，张泽家，王 忠，高庆和，刘剑刚，高 瞻

（1.北京中医药大学研究生院，北京 100029；2.中国中医科学院西苑医院泌尿外科，北京 100091；3.中国中医科学院西苑医院男科，北京 100091；4.中国中医科学院心血管病研究所，北京 100091）

慢性非细菌性前列腺炎（chronic nonbacterial prostatitis，CNP）为泌尿外科常见疾病，占所有前列腺炎的90%以上［1，2］，因前列腺特殊的解剖及生理特点，致使临床表现多样、症状反复难愈，是前列腺炎中最常见、最复杂的一类临床综合征［3］。目前研究发现病原体感染、尿液反流、神经内分泌因素、氧化应激等都与前列腺炎发病相关，其中免疫因素在CNP 发生发展中起到重要作用［4，5］。免疫因素CNP动物模型的建立，是进行CNP 病因病机及药物研究的重要基础，目前，前列腺免疫因素动物模型包括去势结合雌激素诱导型、自身免疫反应诱导型、自发型CNP 模型［6］，其中常用方法为前两种，但尚缺乏系统的从手法、病理组织、免疫炎症指标和激素水平比较两种模型的报道，本研究拟采用此两种方法建立CNP 模型，比较两种模型特征、病理及各项指标，探讨制备CNP 动物模型的最优选择，为今后药物防治CNP 的实验研究提供较好的动物模型。

1 材料和方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 健康SPF 级，雄性，Wistar 大鼠34 只，体质量（200±20）g，由斯贝福（北京）生物技术有限公司［SYXK（京）2019-0030］提供，饲养于中国中医科学院西苑医院屏障级实验动物室［SYXK（京）2018-0018］。饲养环境：屏障系统内饲养，温度22℃～26℃，湿度控制在40%～70%，由12 h 光照/黑暗循环，自由饮食。饲料由北京科澳协力饲料有限公司［京饲证（2014）06054］提供。饮水：灭菌水，装入饮水瓶供实验动物自由饮用。

1.1.2 试剂 0.9%生理盐水（山东辰欣药业股份有限公司，批号：1211040591）；10%水合氯醛（国际集团化学有限公司，批号：20050805）；苯甲酸雌二醇（Solarbio 公司，批号：WXBD0151V）；弗氏完全佐剂（CFA）（Sigma 公司，批号：C104202）；BCA 测蛋白浓度试剂盒（上海碧云天生物技术公司，批号：P0010）；IgA、IgG、IgM 试剂盒（北京华英生物技术研究所，批号：20220416BH）；白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、高敏-C 反应蛋白（hs-CRP）试剂盒（北京欣博盛生物科技有限公司，批号：20220428X）；T 试剂盒（上海罗氏诊断产品有限公司，批号：48879601）。

1.1.3 仪器 3-18K 型低温离心机（美国SiGma 公司）；T18 型分散机（德国IKA 公司）；DNP9082 型电热恒温平培养箱（上海精宏实验设备有限公司）；MultiSkan3 型酶标仪（美国Thermo 公司）；EG1150型病理包埋机（德国Leica 公司）；7160 型全自动生化仪（日本HITACHI 公司）；DR-200BS 型全自动酶标分析仪（无锡华卫德朗仪器有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 模型构建和分组 适应性饲养大鼠7 d 后，按随机对照表分为5 组，假手术组6 只、去势结合雌激素诱导CNP 模型组（去势激素组）8 只、自身免疫性前列腺炎（experimental autoimmune prostatitis，EAP）组3 组，分别为EAP 蛋白高剂量组（高EAP组）8 只、EAP 蛋白中剂量组（中EAP 组）6 只、EAP蛋白低剂量组（低EAP 组）6 只。

去势结合雌激素诱导CNP 造模，大鼠采用10%水合氯醛腹腔麻醉（0.2 mL/kg 体质量），仰卧位固定四肢及头颈，充分暴露会阴区视野，会阴区备皮并消毒铺巾，眼科剪剪开阴囊正中皮肤，逐层分离两侧睾丸至鞘膜，钝性分离睾丸和附睾，丝线结扎睾丸根部，剪断精索，移走睾丸，仔细观察结扎断端，确认无活动性出血。伤口消毒，逐层缝合，再次消毒伤口，放回鼠笼。术后连续3 d 背部4 点肌内注射青霉素（剂量25 万 U/kg，每只注射0.1 mL），以防感染。术后第2 天开始，每天对大鼠进行背部皮下注射苯甲酸雌二醇，剂量为0.25 mg/kg·d-1，连续注射30 d。第31 天可制备大鼠慢性前列腺炎模型，该模型可维持不少于30 d［7］。假手术组手术步骤同前，区别仅在于钝性分离睾丸和附睾步骤即止，伤口予以缝合放回鼠笼，每日注射药物为芝麻油。

EAP 造模，取下预备大鼠前列腺组织放入生理盐水中，修掉脂肪、膀胱及多余组织，清洗2～3 次，剪碎搅匀前列腺组织，加入含0.5%Triton-100 的生理盐水溶液，冰浴匀浆，12 000 r/min，4℃离心30 min。离心后吸去上层的脂肪组织，上清液吸入冷冻管进行液氮冷冻，并保存于-20 ℃条件下备用。临用前用BCA 测定蛋白浓度，根据测得的蛋白浓度，用0.01 mmol/L 的PBS 将蛋白提纯液分别稀释成40、20、10 mg/mL 高中低3 种浓度，吸取前列腺蛋白提纯液高、中、低3 种浓度0.5 mL 分别与完全弗氏佐剂0.5 mL 等比混悬，共1 mL。在造模的第0天、15 天、30 天将1 mL 高、中、低三种浓度混悬液分别对应不同组别进行背部4 点皮下注射，腹腔同时注射百白破疫苗0.5 mL，造模时间为45 d。第46 天可制备大鼠EAP 模型，本模型的维持时间不少于30 d［7］。

1.2.2 标本采集 各组大鼠按相应组别造模时间结束之后，称重，再次麻醉，腹主动脉取血，静置1 h后，3 000 r/min，离心10 min，分离血清备用，-80 ℃保存。取出大鼠前列腺组织，剥离被膜及脂肪组织，生理盐水清洗2～3 次，滤纸吸干，电子天平称重，计算各组大鼠前列腺指数，即前列腺湿重/体质量，取材结束后采用二氧化碳安死术处理。实验过程中严格遵循2011 年修订版《实验动物管理条例》及相关规定，动物实验经过中国中医科学院西苑医院医学伦理委员会批准（伦理批件号：2022XLC043-2）。

1.3 模型评价

1.3.1 一般情况 记录大鼠一般体征状况变化，造模期间每周对各组大鼠予以称重记录，并每日观察进食量、饮水量，观察大鼠毛发情况及一般活动情况。

1.3.2 前列腺组织病理学评价 将各组大鼠前列腺组织选取一部分保存于10%福尔马林溶液固定72 h，室温下水洗、脱水、透明、浸蜡、包埋、烤片处理后，HE 染色后封片，光镜下观察前列腺局部病理变化。其余部分备用留取做匀浆用于前列腺组织指标测定。

1.3.3 前列腺组织炎症病理评分 对前列腺组织从炎性细胞、成纤维细胞、腺腔大小、分泌物四个指标进行评价。炎性细胞：0 分：无炎性细胞浸润，2分：炎性细胞轻度浸润，4 分：炎性细胞中度浸润，6分：炎性细胞重度浸润。成纤维细胞：0 分：无成纤维细胞增生，1 分：成纤维细胞轻度增生，2 分：成纤维细胞中度增生，3 分：成纤维细胞重度增生。腺腔：0 分：腺腔大，1 分：腺腔中等，2 分：腺腔小，3 分：腺腔闭锁或消失。分泌物：0 分：分泌物多，1 分：分泌物中等，2 分：分泌物少，3 分：无分泌物［8］。

1.3.4 大鼠血清免疫球蛋白测定 按照试剂盒要求采用免疫比浊法测定IgA、IgM、IgG 水平。

1.3.5 大鼠血清炎症因子测定 按照试剂盒要求采用酶联免疫（ELISA）双抗体夹心法测定IL-1β、IL-10、TNF-α、hs-CRP 水平。

1.3.6 大鼠前列腺组织激素水平测定 按照试剂盒要求采用电化学发光法测定睾酮（T）水平。

1.4 统计学处理

采用SPSS27.0 和Graphpad Prism9.4.1 软件进行数据处理和统计分析处理，计量资料采用均数±标准差（±s）的形式，组间比较若方差齐采用单因素方差分析（ANOVA 检验），若不满足正态分布或方差不齐，则采用校正检验，组间多重比较采用Bonferroni 检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组的一般情况

各组Wistar 大鼠按相应造模方式进行饲养，去势激素组大鼠于第2 天死亡2 只，高EAP 组大鼠2只36 d 死亡。所有未死亡大鼠一般情况良好，无异常现象，进食量、饮水量正常，其中去势激素组大鼠和高、中、低EAP 组大鼠毛色明显变黄，光泽度下降，反应稍缓。每7 d 对所有大鼠称重，较假手术组，去势激素组从第1 周开始具有显著差异（P＜0.05）；高EAP 组、中EAP 组、低EAP 组大鼠分别从第2 周、第4 周、第5 周差异具有统计学差异（P＜0.05）。见表1。

表1 造模期间各组大鼠体质量变化（g，±s）Tab 1 Changes in body mass of rats in each group during the modeling period（g，±s）

表1 造模期间各组大鼠体质量变化（g，±s）Tab 1 Changes in body mass of rats in each group during the modeling period（g，±s）

注：与假手术组相比，# P＜0.05；## P＜0.01。

组别假手术组去势激素组高EAP 组中EAP 组低EAP 组取材前430.00±13.04 411.17±13.50#418.83±10.68#413.17±6.91#414.17±8.23#5.580＜0.001 n66666 FP第0 周181.75±7.13 179.33±3.93 186.16±4.46 182.67±4.72 184.83±4.62 1.239 0.320第1 周220.50±2.08 209.67±3.39#220.33±9.22 226.00±5.97 220.17±3.92 5.715 0.001第2 周268.50±2.38 255.67±4.30#256.00±7.32#268.50±3.73 261.50±5.35 6.002＜0.001第3 周310.00±4.40 293.33±5.43#298.83±7.22#312.00±9.86 308.50±7.26 6.845＜0.001第4 周352.50±15.41 331.83±8.40#330.67±7.47#333.33±7.87#339.33±7.20 5.307 0.020第5 周386.75±13.22 363.67±10.42#362.67±9.2#366.67±4.97#366.00±8.94#7.705＜0.001第6 周420.75±10.69 402.16±13.60#408.33±11.88#404.16±6.97#410.10±13.94#5.481 0.010

取材时称量前列腺湿重，计算前列腺指数。去势激素组大鼠前列腺腺体极度萎缩，腺体软，体积减小，与周围组织有黏连，与假手术组和EAP 组相比，大鼠前列腺指数具有极显著差异（P＜0.01，P＜0.01）。肉眼观察高、中、低EAP 3 组和假手术组无明显变化（P＞0.05），较假手术组体积稍小，前列腺腺体稍硬；高、中、低EAP 组大鼠3 组组间无明显差别（P＞0.05）。见图1。

图1 各组大鼠前列腺指数Fig 1 Prostate index of rats of each group

2.2 各组大鼠前列腺组织病理学的比较

假手术组大鼠前列腺组织结构完整，界限清晰，腺腔规则，腺体上皮细胞形态正常，无炎症反应，见图2A。去势激素组大鼠前列腺组织存在明显腺体结构破坏，上皮细胞形态发生病变，间质明显水肿，腺腔显著扩大，可见大量炎性细胞弥漫性浸润，血管扩张充血，见图2B。高EAP 组大鼠存在腺体结构破坏，腺腔扩大，可见少量炎性细胞浸润，见图2C。；中EAP 组大鼠存在腺体结构破坏，腺腔稍扩大，腺上皮减少，间质内可见部分炎性细胞浸润，见图2D。；低EAP 组大鼠腺体结构有破坏，腺腔疏松，间质内可见少量炎性细胞浸润［8］，见图2E。

图2 各组大鼠前列腺组织观察（HE，×100）Fig 2 Observation of prostate tissue in rats of each group （HE，×100）

2.3 各组大鼠前列腺组织炎症病理评分的比较

造模后，与假手术组相比，去势激素组大鼠前列腺组织炎性细胞、成纤维细胞、腺腔大小、腺腔内分泌物显著上升，具有显著差异（P＜0.05）；与假手术组相比，高、中、低EAP 组大鼠前列腺组织炎症病理评分变化无显著差异（P＜0.05）；与自身免疫组相比，去势激素组与高、中、低EAP 组炎症病理评分各指标具有显著差异（P＜0.05）；高、中、低EAP 组组间对比未见明显差异，无显著差异（P＞0.05）。见表2。

表2 各组大鼠前列腺组织炎症评分比较（±s）Tab 2 Comparison of inflammation scores of prostate tissue in each group of rats（±s）

表2 各组大鼠前列腺组织炎症评分比较（±s）Tab 2 Comparison of inflammation scores of prostate tissue in each group of rats（±s）

注：与假手术组相比，# P＜0.05，## P＜0.01。

腺腔内分泌物0.67±0.82 2.00±0.63#0.33±0.57 0.50±0.84 0.67±0.82 4.94 0.004组别假手术组去势激素组高EAP 组中EAP 组低EAP 组n66666 FP炎性细胞1.33±1.03 3.67±2.88#1.33±3.34 1.33±1.03 1.33±1.03 5.00 0.004成纤维细胞0.50±0.55 2.00±0.00##1.00±0.00 0.83±0.41 1.00±0.00 20.18＜0.001腺腔大小0.00±0.00 1.50±0.55##0.17±0.41 0.33±0.52 0.50±0.55 10.08＜0.001

2.4 各组大鼠血清免疫球蛋白的比较

与假手术组相比，去势激素组大鼠IgA、IgG、IgM 显著上升，差异具有显著差异（P＜0.05）；与假手术组相比，高、中、低EAP 组大鼠仅IgM 具有显著差异（P＜0.05）；与自身免疫组相比，去势激素组与高、中、低EAP 组炎症病理评分各指标具有显著差异（P＜0.05）；高、中、低EAP 组组间对比未见明显差异，无显著差异（P＞0.05）。见表3。

表3 各组大鼠血清IgA、IgG、IgM 水平比较（±s）Tab 3 Comparison of serum IgA，IgG and IgM levels of rats in each group（±s）

表3 各组大鼠血清IgA、IgG、IgM 水平比较（±s）Tab 3 Comparison of serum IgA，IgG and IgM levels of rats in each group（±s）

注：与假手术组相比，# P＜0.05；## P＜0.01。

组别假手术组去势激素组高EAP 组中EAP 组低EAP 组IgM(g/L)0.44±0.08 0.78±0.08##0.73±0.04##0.71±0.02##0.67±0.01##31.80＜0.001 n66666 FP IgA(g/L)0.49±0.40 0.93±0.15#0.78±0.20 0.74±0.08 0.72±0.03 6.27 0.001 IgG(g/L)4.92±0.22 7.65±0.72##6.56±0.35##6.38±0.14##6.16±0.16#12.70＜0.001

2.5 各组大鼠血清炎症因子的比较

与假手术组相比，去势激素组IL-1β、TNF-α、CRP、IL-10 未见明显差异（P＞0.05）；与假手术组相比，低EAP 组大鼠IL-1β、TNF-α、CRP、IL-10 均显著变化，差异具有极显著差异（P＜0.01），中EAP 组大鼠IL-1β、TNF-α 具有统计学意义（P＜0.05）；高EAP 组大鼠各指标未见显著差异（P＞0.05）；高、中、低EAP 组组间对比，以低EAP 组大鼠指标变化最为敏感，极显著差异（P＜0.01）。见表4。

表4 各组大鼠血清IL-1β、IL-10、TNF-α、CRP 水平比较（±s）Tab 4 Comparison of serum IL-1β，IL-10，TNF-α and CRP levels of rats in each group（±s）

表4 各组大鼠血清IL-1β、IL-10、TNF-α、CRP 水平比较（±s）Tab 4 Comparison of serum IL-1β，IL-10，TNF-α and CRP levels of rats in each group（±s）

注：与假手术组相比，# P＜0.05；## P＜0.01。

CRP(mg/L)6.39±0.42 6.07±0.84 6.96±0.39 7.86±0.83 9.38±1.64##10.84＜0.001组别假手术组去势激素组高EAP 组中EAP 组低EAP 组n66666 FP IL-1β(pg/mL)21.25±1.48 21.77±2.88 25.89±3.34 28.96±4.96#35.30±3.83##14.13＜0.001 IL-10(pg/mL)14.04±0.53 15.11±0.81 13.24±0.72 11.77±0.61##10.38±0.69##37.82＜0.001 TNF-α(pg/mL)49.84±13.02 51.12±10.01 58.59±9.38 65.05±3.83 72.61±4.83##7.36＜0.001

2.6 各组大鼠前列腺组织激素水平的比较

与假手术组分别相比，去势激素组、高EAP 组大鼠T 水平均未见显著差异（P＞0.05），中EAP 组大鼠T 水平明显降低，差异具有显著差异（P＜0.05），低EAP 组大鼠T 水平均具有极显著差异（P＜0.05）；高、中、低EAP 组组间以低EAP 组大鼠T水平变化最为明显（P＜0.05）。见表5。

表5 各组大鼠前列腺组织T 水平比较(ng/mL,±s)Tab 5 Comparison of T levels in prostate tissue of rats in each group(ng/mL,±s)

表5 各组大鼠前列腺组织T 水平比较(ng/mL,±s)Tab 5 Comparison of T levels in prostate tissue of rats in each group(ng/mL,±s)

注：与假手术组相比，# P＜0.05，## P＜0.01。

组别假手术组去势激素组高EAP 组中EAP 组低EAP 组n66666 T 1.01±0.05 0.93±0.65 0.87±0.42 0.88±0.31#0.67±0.03##0.84 0.54 FP

3 讨论

CNP 是泌尿外科常见病，临床病因和发病机制仍未阐明，常规西药治疗也存在局限性，因此建立理想合适的、模拟人类CNP 发病机制及病理状态的动物模型大鼠具有很重要的意义。

去势结合雌激素诱导慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型特点，免疫因素CNP 大鼠模型主要包括去势结合雌激素诱导CNP 模型、自身免疫反应诱导CNP 模型、自发性CNP 模型等。自发性CNP 模型选用老年雄性大鼠自发产生CNP，虽然病理表现与临床相似，病理特异性良好，稳定性良好，但因对大鼠种类和周龄要求严格，造模时间长，成本高，个体偏差大，模型难以复制等缺点限制其在实验研究中的应用，目前相关文献中选用该模型进行实验研究十分罕见。去势结合雌激素方法可致大鼠体内睾酮激素水平失衡，一氧化氮合酶增高，引起前列腺组织局部免疫机能亢进，介导免疫炎症反应，造成前列腺组织细胞损伤，形成CNP，较自发性CNP 模型造模方法简单、造模成本低，且病理变化不劣于CNP 模型，此外在模型持续时间、稳定性方面也具有优良特性。该方法的主要缺点在于是该模型产生原理尚有商榷之处，是单纯雄激素剥夺和雌激素治疗、亦或是自发性或基因型多因素结合促使产生炎症并不清楚；并且此模型严重影响大鼠体内激素水平，大鼠经过去势，理论上睾酮急剧下降，但是否因此体内产生负反馈作用仍未可知，因此有激素水平评估或性功能检测要求时，该类动物模型并不适合［9］。本研究去势结合雌激素诱导CNP 大鼠模型发现，去势激素组大鼠T 与假手术组相较虽然有所下降，但未见统计学意义，这可能大鼠体内肾上腺弥补部分功能有关。

自身免疫反应诱导慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型特点，通过纯化前列腺蛋白刺激诱导CNP 是制备CNP 大鼠模型的常用方法，原理为同种别雄性附性腺匀浆液可诱发大鼠产生自身免疫反应，从而选择性地诱导细胞免疫及前列腺间隙单个核细胞浸润，形成CNP。此类造模方法操作简便，模型维持时间与去势结合雌激素方法相当，但较为繁琐的是前期需搜取大鼠前列腺制备蛋白匀浆。目前大多文献对蛋白匀浆液浓度以及注射时间的选择，尚未形成统一共识，尽管在相关规范草案中推荐选用20 mg/mL［7］，连续注射45 d 的方法制备CNP 大鼠模型，但并未指出这一推荐的具体依据。Galmarini等［10］采用大鼠雄性副腺提取物配制成15 mg/mL 的蛋白匀浆液和完全弗氏佐剂等比配成1 mL 于 0，30和 45 d 对 Wistar 大鼠进行多点注射，每7 d 对大鼠细胞免疫反应动力学进行研究，发现所有大鼠在第35、42、49 天时靶器官出现明显的组织学改变，前列腺及附腺产生炎症反应，小血管周围存在单核细胞浸润。周晓辉等［11］在此方法上进一步探索，采用第0 天和30 天多点注射的方法，发现注射蛋白匀浆液为 15 mg/mL 时大鼠可在45 d 后形成 CNP 模型，而浓度为 5 mg/mL、10 mg/mL 时均未出现明显病理改变和炎症反应。宋国宏等［12］选用20、40、60 和80 mg/mL 的蛋白匀浆液研究浓度与大鼠模型成功率的量效关系，各组分别第0 天和第30 天多点皮下注射 1 次，结果显示蛋白匀浆液浓度40、60 mg/mL两组造模 45 d 后能产生较好炎症反应且保持稳定。综上而言，目前常用大鼠前列腺蛋白匀浆液浓度有15、40、60 mg/mL 可供选择，和完全弗氏佐剂1∶1 配比成1 mL 后多点注射，注射间隔时间少到1 d 1 次、注射45 次，长至15 d 1 次、注射2～3 次；SD 大鼠或Wistar 大鼠均可形成EAP 模型。本研究采40、20、10 mg/mL 三种浓度构建大鼠CNP 模型，造模后可见三组免疫球蛋白指标未见明显变化；与假手术组相比，10 mg/mL 组炎症因子指标IL-1β、TNF-α、CRP、IL-10 明显改变，20 mg/mL 组病理变化更为明显。

两种模型在造模过程中均出现进食及饮水量较假手术组减少，体质量降低，去势激素组前列腺指数显著性下降。其中去势激素组模型死亡2 只，考虑大鼠可能对规定麻醉剂量不耐受而死亡；高EAP 组死亡2 只，可能与伤口感染、大鼠同类撕咬有关。

两种模型病理均有不同程度改变，其中去势激素组前列腺指数腺体结构破坏、腺腔弥漫性分布炎性细胞，变化最为明显；高、中、低EAP 组病理变化各有优劣，中EAP 组大鼠腺体结构破坏、炎性细胞浸润较多，3 组较假手术组有明显改变，但仍逊于去势激素组。两种模型比较，去势激素组造模更符合CNP 的病理变化，炎性细胞浸润较高、中、低EAP 3组均明显。

前列腺组织炎症病理评分以去势激素组上升变化最为明显，相较于假手术组和自身免疫组，去势激素组炎性细胞、成纤维细胞、腺腔大小、腺腔内分泌物均可见明显异常；相较假手术组，高、中、低EAP 组未见显著差异；高、中、低EAP 组组间差异亦未有统计学意义。

血清免疫球蛋白IgA［13］、IgG［14］、IgM［15］是检测大鼠是否产生免疫反应的重要指标。IgA 分布于机体黏膜局部，是抗感染免疫的第一防线；IgG 能够激活补体、吞噬病菌、中和毒素，是感染免疫的主要力量，并且能在体内维持较长时间；IgM 是机体受感染的标志物，受到抗原刺激后会第一时间激活免疫应答反应，在早期机体免疫防御中意义重大，因此血清免疫球蛋白水平高低也提示CNP 免疫反应的强弱。本研究发现去势激素组和高、中、低EAP 组大鼠IgA、IgG、IgM 水平较假手术组均有不同程度上升，其中以去势激素组大鼠变化最为明显，差异均具有显著意义（P＜0.05）。

促炎性细胞因子包括IL-1β［16］、TNF-α［17］、CRP［18］等，在炎症中起到促进作用，加速细胞间黏附因子表达、增加前列腺素，造成前列腺组织局部损伤；抗炎性细胞因子IL-10 可强烈抑制单核巨噬细胞，减少炎症介质产生，达到修复组织的功能［19］。本研究中相较假手术组，低EAP 组大鼠IL-1β、IL-10、TNF-α、CRP 均显著变化，差异均具有统计学意义（P＜0.05），去势激素组未见明显差异（P＞0.05）。

雄激素对前列腺正常发育起主导作用，具有抑制体液免疫的作用，当雄激素含量水平降低，便可诱发自身免疫反应的发生［20］。本研究中相较假手术组，中、低EAP 组大鼠T 水平均具有统计学意义（P＜0.05），去势激素组大鼠T 水平亦有所下降，但未见明显差异（P＞0.05）。

综上所述，去势结合雌激素诱导法和自身免疫反应诱导法均可成功构建CNP 模型。一般情况方面去势激素组前列腺指数明显下降；病理方面，去势激素组可导致明显的腺体破坏、间质水肿，前列腺组织炎性细胞浸润十分明显，更符合CNP 的病理变化；免疫指标中，去势激素组大鼠优于高、中、低EAP 组；在炎症因子指标中及性激素指标中，低EAP 组（10 mg/mL）大鼠明显优于其他各组变化。根据制备草案计算权重［7］，可得去势激素组CNP 模型总积分为0.81，高、中、低EAP 组分别为0.62、0.73、0.67分，根据本研究结果，一般情况下，去势结合雌激素诱导法造模是两者之间更为合适的一种方法。具体而言，去势结合雌激素诱导法更适合研究CNP 病理及免疫应答反应变化，更适用于研究CNP 长期改变；而对于研究CNP炎症因子指标及性激素指标，10 mg/mL 的前列腺蛋白匀浆液是制备大鼠CNP 更为合适的理想浓度，更适用于研究CNP 早期炎症指标变化。

作者贡献度说明：

唐益文、王雄：负责造模实验、数据整理、统计及文章书写；周艳艳、陈豪特、张泽家、王忠：协助实验进行以及核对实验数据；高庆和、刘建刚：负责理论指导、审阅文章；高瞻：工作支持，提供经费。

所有作者声明无利益冲突关系。