QuEChERS-GC-MS/MS快速测定韭菜中10种农药残留

◎刘 燕，刘晓佳，王小云，程 超，杜小强，张红妮

（1.平凉市食品检验检测中心，甘肃 平凉 744000；2.甘肃平凉国家粮食质量监测站，甘肃 平凉 744000）

韭菜是一种葱蒜类蔬菜[1]，含有丰富的维生素、碳水化合物、纤维素、硫化物及矿物质等营养物质，在中国消费市场是比较受欢迎的一种蔬菜，同时其具有独特的辛香强烈气味，可抗菌、可消食、亦可预防疾病[2-3]。由于韭菜在种植过程中易生蛆，为了防治病虫害，避免不了使用农药，因此就会造成农药的违规超量使用，使韭菜中易存在农药残留超标的问题[4-5]。在农药残留分析中，样品本身的性质往往会干扰目标农药的定性定量分析，从而影响结果的准确性[6-7]。韭菜是一种基质较为复杂的含硫蔬菜样品，在制备过程中被搅碎时，其中的活性酶会促使韭菜释放硫化物，产生韭菜特有的刺激气味。这些硫化物会在仪器上产生很强的响应，从而影响待测化合物的定性和定量[8]。

QuEChERS方法是在2003年研究人员基于最小消耗、最少样品量以及最短前处理时间的假设而开发的一种新型前处理技术，其取名QuEChERS是因其具备快速（Quick）、简便（Easy）、低廉（Cheap）、高效（Effective）、稳定（Rugged）、安全（Safe）的特点，是蔬菜水果检测前处理过程中最常用的提取净化方法之一[9-13]。气相色谱-质谱联用仪(Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS/MS)具有极强的分离能力，对未知化合物有独特的鉴定能力，是分离和检测复杂化合物的有力工具之一，也是农残分析中常用的大型仪器设备之一。本文主要建立了一种适用于韭菜基质中多种农药残留检测的QuEChERS-气相色谱-质谱法，仪器检测时间缩短至13 min，提高了检测效率。

1 仪器与材料

1.1 材料与试剂

韭菜：市售；氧乐果、敌敌畏、甲拌磷、灭线磷、克百威、甲基毒死蜱、腐霉利、毒死蜱、丙溴磷、氟虫腈标准溶液（100 μg/mL，天津阿尔塔科技有限公司）；QuEChERS提取盐包、净化管（北京中检维康技术有限公司）；乙酸乙酯、乙腈（色谱纯，德国默克公司）。

1.2 仪器设备

赛默飞三重四级杆气质联用仪（TSQ 8000 EVO，赛默飞世尔科技有限公司）；TG-1 MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）（赛默飞世尔科技有限公司）；莱伯泰科MV5多通道平行浓缩仪（北京莱伯泰科有限公司）；赛多利斯SQP电子分析天平；CTH2050R台式高速冷冻离心机（湖南湘立仪器有限公司）；涡旋仪(艾卡仪器设备有限公司)；试验室用超声波清洗仪（济宁科源超声波设备有限公司）；艾本德EPPENDORF单道移液器（艾本德（上海）国际贸易有限公司）。

2 方法与结果

2.1 仪器条件

2.1.1 色谱条件

色谱柱：ThermoFisher的TG-1 MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；程序升温条件：100 ℃（1 min）→20 ℃/min→280 ℃（3 min）；恒流模式：1.0 mL/min；不分流模式；载气：99.999%高纯氦气；进样量：1.00 μL。

2.1.2 质谱条件

离子化方式为EI，离子化能量为70 eV，传输线温度为280 ℃，离子源温度为280 ℃，采集方式为多反应监测模式。10种农药的保留时间、离子对、碰撞能量等相关参数见表1。

表1 10种农药多反应监测模式下的检测条件表

2.2 试验过程

2.2.1 混合标准储备溶液的制备

分别量取浓度为100.00 μg/mL的10种农药标准品200 μL，置于10 mL容量瓶中，用乙酸乙酯准确定容至刻度，摇匀，即得到质量浓度为2.00 μg/mL的10种农药标准品混合溶液。

2.2.2 韭菜基质样品处理

用天平准确称取10.00 g经粉碎后的韭菜样品，置于50 mL离心管中，用移液器加入10 mL乙腈，加入提取盐包（1 g氯化钠，4 g硫酸镁，1 g硫酸镁，0.5 g柠檬酸氢二钠）和均质子，剧烈振荡后涡旋，4 000 r/min离心5 min，待净化；准确吸取6 mL提取液上清液于10 mL净化管中，涡旋1 min混匀，4 000 r/min离心5 min，吸取2 mL净化后的上清液至10 mL玻璃氮吹管中，60 ℃水浴氮气吹干，待复溶；用1 mL 100.00 ng/mL环氧七氯复溶，过膜后上GC-MS/MS测定。

2.2.3 韭菜基质中标准工作曲线的制备

分别移取2.2.1节中混合标准储备溶液5.00 μL，10.00 μL，25.00 μL，50.00 μL，125.00 μL，分别加入内标物环氧七氯100.00 μL（浓度为1.00 μg/mL），然后用2.2.2节中所得到的韭菜基质样品定容至1 mL，即得到质量浓度分别为10.00 μg/L，20.00 μg/L，50.00 μg/L，100.00 μg/L，250.00 μg/L的系列基质校准工作溶液。

2.3 线性关系考察

取2.2.3节中基质校准工作溶液进行分析，内标法定量，横坐标为待测成分浓度，纵坐标为待测组分与环氧七氯的峰面积比率，得到回归方程和线性范围。表2为10种农药在韭菜基质中的回归方程及相关系数，由表2可知：10种农药在10~250 μg/L范围内呈良好线性关系，R2均大于0.995 0。

表2 10种农药在韭菜基质中的回归方程及相关系数表

2.4 加标回收试验

韭菜中成分比较复杂，会存在基质效应。本试验使用韭菜试样空白提取液来配制10种混标的标准工作曲线，从而最大程度地降低了样品基质效应对检测结果的影响。

分别称取10份10.00 g韭菜样品于50 mL离心管中，编号为：0、A1、A2、A3、B1、B2、B3、C1、C2、C3，分别在A1、A2、A3中加入100 μL 1.00 μg/mL的混合标准储备溶液，B1、B2、B3加入300 μL 1.00 μg/mL的混合标准储备溶液，C1、C2、C3加入1 000 μL 1.00 μg/mL的混合标准储备溶液，按2.2.2节中步骤进行样品处理，氮吹至近干，用100 ng/mL环氧七氯复溶，即得质量浓度为20.00 μg/L，60.00 μg/L，200.00 μg/L的加标回收液，试验结果见表3。

表3 10种农药在韭菜基质中的回收率表

试验结果表明：10种农药在韭菜基质中回收率均在75%~120%，RSD均小于10%，满足农残分析的要求。

图1为韭菜基质中10种农残的谱图，从图1可以看出，韭菜基质中10种农药残留的响应值很高，且峰形良好。

图1 GC-MS/MS中10种农药标准溶液TIC谱图

3 结论

本文建立了气相色谱-质谱法测定韭菜中10种农药残留的分析方法，可在13 min内完成检测。该方法前处理速度快、易操作、可进行大批量样品检验且准确度高，还能提高检测的灵敏度，实现韭菜中多种农药残留的同时检测。