腺样体肥大患者的临床特征及咽喉反流与病情严重程度的相关性分析

刘伟清，季永红，张国华

广东中山小榄人民医院耳鼻喉科，广东中山 528400

腺样体肥大（adenoid hypertrophy, AH）是一种腺样体的病理性增生疾病，常见于儿童，主要是由于咽部反复炎症与感染刺激所致，若治疗不及时，AH会导致慢性鼻窦炎、阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与分泌性中耳炎[1-2]。而咽喉反流主要由胃内容物反流到食管上括约肌以上位置，损伤鼻腔、喉、气道、口等导致，可引发鼻窦炎、鼻炎、鼻息肉等病变[3-4]。近些年来，有研究认为咽喉反流是引起AH的重要原因之一，但国内外关于咽喉反流对AH的影响的相关研究较少。基于此，本文选取广东中山小榄人民医院2020年6月—2021年6月收治的150例AH患者为研究对象，旨在探讨患者的临床表现及病理学特征，观察咽喉反流与其病情严重程度的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取150例在本院接受手术治疗的AH患者，分为轻度组、中度组和重度组，每组50例。轻度组男20例，女30例；年龄4~21岁，平均（12.56±0.67）岁；病程1~5年，平均（3.16±0.47）年。中度组男22例，女28例；年龄5~20岁，平均（12.49±0.32）岁；病程2~4年，平均（3.11±0.35）年。重度组男19例，女31例；年龄4~20岁，平均（12.11±0.35）岁；病程1.5~4年，平均（2.76±0.35）年。3组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。入组患者均已知悉研究相关内容，同意且自愿参与研究，均已签署同意书，且本研究已获医学伦理委员会批准。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：经鼻咽侧位片、鼻咽CT诊断，确诊为AH；认知功能正常，依从性良好；临床资料完整。排除标准：急性感染期患者；合并心功能异常患者。

1.3 方法

取患者手术切除的腺样体组织，行胃蛋白酶（pepsin）免疫组化染色，固定样本时采用多聚甲醛，后经脱水、包埋后将样本组织制成石蜡并切割为直径4 µm的切片。经链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（streptavidin-perosidase, SP），对腺样体组织的pepsin表达进行检验，以胃黏膜为阳性对照，用磷酸盐缓冲液代替一抗，将其作为阴性对照。常规脱蜡与血清封闭，滴入pepsin一抗，4℃条件下培养15 h。经磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solu⁃tion, PBS）清洗后，在37℃条件下，滴入多克隆二抗培养30 min。经PBS清洗后，滴入辣根过氧化物酶标记链霉卵白素，培养15 min。使用加强型二氨基联苯胺四盐酸盐（diaminobenzidine tetrahydrochlo⁃ride, DAB）显色，后应用苏木精对样本进行重复染色采用中性树脂予以封存，后经显微镜下观察样本染色情况即可。

1.4 观察指标

①比较3组AH患者腺样体组织的病理特征：经显微镜观察切片染色情况，在40×10倍视野下观察任意5个细胞，对组织性质进行评估，染色评分=鳞状上皮或纤毛柱状上皮细胞显色深浅度×显色组织比例，阴性：0分，弱阳性（+）：1~4分，阳性（++）：5~8分，强阳性（+++）：9~12分。

②比较3组AH患者的临床症状：包括无症状、轻微鼻塞、睡眠打鼾，严重鼻塞、睡眠打鼾憋气不缓解、腺样体面容等。

③比较3组AH患者的咽喉反流情况：入院后接受系统治疗前，即采用喉反流症状指数量表（Re⁃flux Symptom Index, RSI）[5]、咽喉反流体征量表（Re⁃flux Finding Score, RFS）[6]对患者咽喉反流症状进行评价，RSI量表共9个项目，按照咽喉症状的从无到严重，每个项目得分为0~5分，满分45分，分值越高症状越严重；RFS量表共8个项目，满分40分，每个项目得分为0~5分，分值越高症状越严重。当RSI在35~45分、RFS在30~40分时为重度咽喉反流；当RSI在20~34分、RFS在20~29分时为中度咽喉反流；当RSI在0~19分、RFS在0~19分时为轻度咽喉反流。

④分析咽喉反流与AH患者病情相关性：腺样体肥大分级标准[7]：腺样体在鼻、咽腔交界处的占据<25%，判定为1级；占据25%~50%，伴闭塞、流涕等症状，判定为2级；占据位置50%~75%，伴咽痒等不适感，判定为3级；占据位置75%~100%，伴呼吸困难、呼吸暂停等症状，判定为4级。根据患者鼻腔中腺样体堵塞情况[7]，将其分为轻度组（50例，腺样体堵塞后鼻孔1/3的位置）、中度组（50例，腺样体堵塞后鼻孔1/2的位置）和重度组（50例，腺样体堵塞后鼻孔2/3及以上的位置）3组，经Spearman系数分析RFS、RSI与AH患者病情严重程度的相关性。

1.5 统计方法

采用SPSS 18.0统计学软件分析数据，计量资料经检验符合正态分布，以（）表示，组间比较行t检验；计数资料以[n(%)]表示，组间比较行χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。使用Spearman相关性系数进行相关性分析。

2 结果

2.1 3组患者的临床特征比较

重度组患者的免疫组化结果评分高于中度组和轻度组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。重度组患者临床症状主要表现为严重鼻塞、睡眠打鼾、憋气不缓解且呈腺样体面容，中度组患者临床症状主要表现为轻微鼻塞和睡眠打鼾情况，轻度组患者临床症状主要表现为轻微鼻部不适，未伴有鼻塞、睡眠打鼾症状。

表1 3组患者的免疫组化结果评分比较[()，分]

表1 3组患者的免疫组化结果评分比较[()，分]

组别轻度组（n=50）中度组（n=50）重度组（n=50）F值P值免疫组化评分4.62±0.37 7.82±0.46 9.33±0.45 1574.60<0.001

2.2 3组患者的咽喉反流情况比较

重度组患者的RSI、RFS评分均高于中度组、轻度组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 3组患者的咽喉反流情况比较[()，分]

表2 3组患者的咽喉反流情况比较[()，分]

组别轻度组（n=50）中度组（n=50）重度组（n=50）F值P值RSI 13.36±0.25 14.77±0.46 16.04±0.32 716.03<0.001 RFS 7.88±0.24 9.12±0.37 10.88±0.62 588.84<0.001

2.3 咽喉反流与AH患者病情相关性分析

Spearman相关性分析显示，RFS、RSI评分越高，AH患者病情越严重，咽喉反流程度与腺样体肥大分级密切相关（P<0.05），见表3。

表3 咽喉反流与AH患者病情相关性分析

3 讨论

AH患者临床多存在张口呼吸、鼻塞等基本症状表现，部分症状严重者还可能出现腺样体面容。既往临床认为，若患者存在细菌、病毒感染性症状或炎性病变均可诱发AH，而长期吸入二手烟也是导致本病的重要原因[8-9]。随着研究的逐渐深入，近年来有学者认为，在临床许多疾病的进展过程中，咽喉反流的影响不容忽视，AH、慢性鼻炎、慢性鼻窦炎、哮喘、分泌性中耳炎等病症均与咽喉反流关系密切，已成为AH的研究重点[10-12]。

目前临床多会通过检测24 h腔内多通道阻抗下的pH值以及经双探针下的试管pH值对AH患者是否存在咽喉反流进行鉴别诊断，但因需要经鼻置管持续24 h，患者依从性不高。Pepsin是一种可靠的咽喉反流诊断标志物，在喉癌、成人声带息肉与儿童喉软化症等病症中已获得充分认可[13-14]。本文首次对AH患者腺样体组织行Pepsin免疫组化染色。结果显示，150例AH患者中，重度组内患者的病理学特征均呈强阳性，中度组呈阳性，轻度组呈弱阳性，3组患者的免疫组化评分均存在一定差异，以重度组患者评分最高（P<0.05）。黄俣栋等[15]学者表示，随着AH分级增高，Pepsin表达强度逐渐增强，其研究结果显示，与腺样体肥大3级患儿相比，4级患儿的强阳性表达例数更高（P<0.05），分析其原因可能为，在pepsin介导下，患者机体发生的咽喉反流在扁桃体上皮黏膜损伤中具有重要机制，当淋巴细胞受咽喉反流刺激则可导致腺样体增生肥大，而在对扁桃体上皮细胞与扁桃体巨噬细胞的持续刺激下，患者体内会分泌大量炎症因子，进而活化免疫细胞，破坏黏膜屏障功能，当大量病菌驻留于扁桃体组织则可对隐窝上皮细胞产生持续刺激，从而引发炎症性增生及腺样体肥大。临床一般使用RFS与RSI量表进行咽喉反流诊断初筛，此量表对于咽喉反流的评估价值已得到临床肯定。本次研究中，3组患者的RSI、RFS评分均存在一定差异，重度组患者的RSI、RFS评分均显著高于中度组、轻度组（P<0.05），提示随AH患者病情加重，其咽喉反流症状也会相应加剧，通过评估咽喉反流情况可实现对其病情严重程度的有效评估。且通过Spearman相关性分析后得知，随RSI、RFS分值升高、咽喉反流程度加剧，AH患者的病情严重程度也会相应加重，提示咽喉反流程度也可对AH的病情进行有效评估，与AH病情呈显著正相关[r（轻度与1级、2级、3级、4级）=0.472、0.365、0.262、0187，r（中度与1级、2级、3级、4级）=0.583、0.332、0.243、0.143，r（重度与1级、2级、3级、4级）=0.631、0.235、0.161、0.131，P<0.05]。本文的研究与黄俣栋等[15]的研究结论一致，该文中指出：71例腺样体肥大患儿中，RSI>13分4例（5.63%），RFS>7分26例（36.62%），两项评分均为阳性1例（1.41%）。在腺样体肥大组织中检测到pepsin表达52例，总阳性率73.24%（52/71），以强阳性（15/71，21.13%）和阳性（23/71，32.39%）为主。腺样体肥大分级越高，pepsin表达强度越高（r=0.476，P<0.05）。以腺样体组织pepsin阳性作为诊断咽喉反流的金标准，RSI及RFS敏感性分别为5.77%，34.62%，特异性分别为94.74%，57.89%。pepsin染色强度与咽喉反流的咳嗽、喉室消失分别呈正相关、负相关，提示儿童腺样体肥大与咽喉反流存在相关性，且咽喉反流在腺样体的发展进程中起重要作用。但值得关注的是，RSI及RFS量表仅可用于评估咽喉反流症状严重程度，其用于诊断咽喉反流的敏感度较低，通过应用上述量表评估其病情严重程度前，应关注患儿是否存在长期咳嗽，并经电子鼻咽喉镜检查、明确病灶。

综上所述，不同严重程度AH患者的病理学特征及临床表现均存在一定差异，随AH患者病情加重，其咽喉反流症状也会明显加剧，通过应用RSI、RFS等咽喉反流相关量表可实现对AH患者的病情的有效评估，值得临床广泛推广。