外周血炎症指标联合AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ检测在肝癌诊断中的应用价值

林 静，李启欣，李炜煊

（佛山市第一人民医院检验科，广东 佛山 528000）

原发性肝癌（简称“肝癌”）是临床常见的消化系统恶性肿瘤，具有较高的发病率和致死率。近年来随着我国居民饮食结构、生活习惯的改变，肝癌等消化系统恶性肿瘤的发病率呈现逐年上升的趋势。早期诊断和治疗是提高肝癌患者治疗效果、延长生存期、提升生存质量的关键[1-2]。目前，临床诊断肝癌的“金标准”是病理学检查，但该方法的不足之处在于会对机体造成损伤，患者不易接受。影像学检查的优势在于无创性，近几年该方法在肝癌的诊断中受到了普遍关注，但其对早期肝癌的诊断率偏低，且同样存在一些禁忌证[3-4]。近年来，随着医疗技术的进步和相关肿瘤标志物的出现，使得血清肿瘤标志物在癌症诊断、治疗及预后评估中发挥了重要作用，且血清学检查操作简便、耗时短，因此获得了临床医生及患者的青睐[5]。甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）和异常凝血酶原（PIVKA- Ⅱ）是近年来广受关注的肿瘤标志物，在恶性肿瘤的诊断中具有高敏感性及高特异性的优点，特别是上述指标的浓度与肝癌的组织分化程度、病灶大小、门静脉浸润程度及临床分期等均具有密切的相关性，因此可用于肝癌的早期诊断中[6-7]。本研究将探讨中性粒细胞/ 淋巴细胞比值（NLR）、血小板/ 淋巴细胞比值（PLR）、衍生的中性粒细胞/ 淋巴细胞比值（dNLR）、系统性免疫性炎症指数（SII）、单核细胞/ 淋巴细胞比值（MLR）五种外周血炎症指标单独及联合AFP、AFP-L3、PIVKA- Ⅱ检测在肝癌诊断中的应用价值，尝试通过更经济实惠的实验室检测，获得更好的诊断效果，现将研究方法及结果总结、整理并报告如下。

1 资料与方法

1.1 基线资料

收集我院普外科收治的200 例经临床诊断确诊为肝癌患者的临床资料，将其作为肝癌组，另收集同期200 例肝脏良性病变患者的临床资料，将其作为对照组。病例纳入标准：（1）临床资料完整；（2）病情经病理学检查得到确诊。排除标准：（1）患有严重的慢性病，如心脑血管疾病、肾脏疾病、呼吸系统疾病、内分泌系统疾病等；（2）合并精神疾病；（3）肿瘤病灶超过3 个；（4）肿瘤出现肝外广泛性转移。对照组中，男性157 例，女性43 例，年龄分布区间45 ～82 岁，平均（62.44±16.13）岁。观察组中，男性149 例，女性51 例，年龄分布区间44 ～81 岁，平均（61.78±15.89）岁。两组患者在性别、年龄等一般资料方面相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

用乙二胺四乙酸（EDTA）紫色抗凝管抽取两组患者的清晨空腹外周静脉血2 mL，由专业技术人员采用mindray BC-6800 PLUS 全自动血液细胞分析仪进行血常规检查，所有检查均严格按照设备仪器以及试剂盒的使用说明书进行操作，同时需要严格遵守相关操作规程及注意事项。本研究的主要检查项目包括：中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、血小板等。具体计算方法如下：NLR= 中性粒细胞/ 淋巴细胞；dNLR=中性粒细胞/（白细胞-中性粒细胞）；PLR=血小板/ 淋巴细胞；MLR= 单核细胞/ 淋巴细胞；SII=（血小板- 中性粒细胞）/ 淋巴细胞。AFP、AFP-L3、PIVKA- Ⅱ的检测方法：用黄色凝胶促凝管采集两组患者的清晨空腹静脉血4 mL，将血液标本在常温条件下静置15 ～30 min，然后置于离心机中进行离心处理（转速为3000 r/min，离心时间为15 min），分离出血清，并保存待检。由专业技术人员采用全自动化学发光免疫分析仪（生产厂家：北京热景生物技术有限公司；规格型号：MQ60PLUS）对上述指标进行检测。采用配套的异常凝血酶原、甲胎蛋白异质体比率测定试剂盒以及标准品和质控品在4 h 内完成血清AFP、AFP-L3、国际标准化比值（INR）和PIVKA- Ⅱ浓度的检测，所有检测均严格按照仪器和试剂的说明书进行。参照我国《原发性肝癌诊疗规范（2017 年版）》建议，当血清AFP 值≥400 μg 时即可判断为阳性；参照FDA2005 年建议，AFP-L3 诊断肝癌的阳性界值定为10%。

1.3 观察指标

比较两组患者外周血炎症指标NLR、PLR、dNLR、SII、MLR 的 差 异。比 较 两 组 患 者AFP、AFP-L3、PIVKA- Ⅱ水 平 的 差 异。统 计AFP、AFP-L3、PIVKA- Ⅱ单独及联合（包括串联和并联）检测诊断肝癌的特异度及灵敏度，其中串联是指所有检测指标结果均为阳性，并联是指所有检测指标中有一项或一项以上指标检测结果为阳性。

1.4 统计学方法

使用SPSS 17.0 统计软件对数据进行统计分析，计数资料采用卡方检验，计量资料根据数值资料的分布情况，符合正态分布的资料行两独立样本t检验，不符合正态分布的资料行非参数检验（Mann-Whitney U 检验），P＜0.05 定义为存在统计学差异。

2 结果

2.1 比较两组患者外周血炎症指标NLR、PLR、dNLR、SII、MLR 的差异

与对照组患者相比，肝癌组患者的NLR、PLR、dNLR、SII、MLR 均更高，差异有统计学意义（P ＜0.05）。详见表1。

表1 比较两组患者外周血炎症指标NLR、PLR、dNLR、SII、MLR 的差异（± s）

表1 比较两组患者外周血炎症指标NLR、PLR、dNLR、SII、MLR 的差异（± s）

组别 NLR PLR dNLR SII MLR对照组（n=200）1.40±0.32 101.56±30.38 1.23±0.68 284.47±101.76 0.17±0.02肝癌组（n=200）2.05±1.01 123.02±60.73 1.33±0.15 421.86±254.29 0.26±0.01 t 值 8.676 4.469 2.031 7.094 56.920 P 值 ＜0.001 ＜0.001 0.043 ＜0.001 ＜0.001

2.2 比较两组患者AFP、AFP-L3 及PIVKA-Ⅱ水平的差异

与对照组患者相比，肝癌组患者的AFP、AFP-L3 及PIVKA- Ⅱ水平均更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表2。

表2 比较两组患者AFP、AFP-L3 及PIVKA- Ⅱ水平的差异（± s）

表2 比较两组患者AFP、AFP-L3 及PIVKA- Ⅱ水平的差异（± s）

组别 AFP（ng/mL）AFP-L3（ng/mL）PIVKA-Ⅱ （mAU/mL）对照组（n=200）4.21±2.03 0.63±0.38 21.76±5.82肝癌组（n=200）345.58±605.21 502.14±544.36 3524.26±3411.71 t 值 7.977 13.029 14.518 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.3 AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ单独及联合检测诊断肝癌的价值

AFP、AFP-L3 及PIVKA- Ⅱ单独检测诊断肝癌的灵敏度分别为68.50%、65.50%、87.50%，特异度分别为84.50%、91.50%、74.00%，其中串联联合检测中特异度最高，达到96.50%，而并联联合检测中灵敏度最高，达到91.00%。详见表3。

表3 AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ单独及联合检测诊断肝癌的价值[%（例/例）]

3 讨论

肝癌是一种致死率极高的恶性肿瘤，此病早期并无典型症状，多数患者因此错过了最佳的治疗时机。近年来随着临床血清学诊断技术的应用，使得肝癌早期诊断的效能得到了进一步的提高[8]。本研究结果显示，与对照组患者相比，肝癌组患者的NLR、PLR、dNLR、SII、MLR 均更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。这与国内外相关文献的研究结果基本一致。一方面肯定了肝癌患者血清学指标存在异常的客观事实，另一方面也肯定了本研究的开展符合临床实际，具有可操作性。中性粒细胞绝对值/ 淋巴细胞绝对值的比值即NLR，该指标的升高提示机体的炎症反应较强，且多种肿瘤的恶性生物学行为均与该指标密切相关。此外，该指标的升高还能提示肝癌患者的总体预后不良。NLR 的特点之一即在于它的高特异性，在肝癌的浸润以及黏附过程中均起到了一定作用[9]。PLR 也是反映炎症程度、疾病活动性的重要指标之一，参与多种恶性肿瘤（如结直肠癌、肝癌、膀胱癌、肺癌、食管癌等）的进展，因此可将该指标用于恶性肿瘤的诊断及患者的预后评估中[10]。本研究发现，多数PLR 较高的肝癌患者其淋巴细胞水平均较低。淋巴细胞是人体的免疫细胞，对肿瘤具有一定的杀伤作用，而淋巴细胞数量减少则提示机体的抗肿瘤免疫反应能力下降，免疫系统对肿瘤抗原的突变无法有效识别或应答，导致肿瘤抗原诱导免疫耐受、肿瘤细胞逃逸，进而为肿瘤细胞的增殖和转移创造了有利条件，使得肿瘤持续进展。dNLR 和SII 均是反映炎症反应的重要因子，近几年这两项指标对肿瘤生长的促进作用受到了诸多学者的关注。本研究结果显示，肝癌组患者的dNLR、SII 均高于对照组。由此可以推测，作为分子标志物，dNLR 和SII 参与了肿瘤的进展，其中已知中性粒细胞可使肿瘤细胞的侵袭、增殖以及转移能力提升，同时中性粒细胞还可以帮助肿瘤细胞逃避免疫监视[11]。人体血液循环中炎性细胞水平的高低可反映机体的炎症状况，而MLR 的相关研究主要聚焦在慢性炎症与肿瘤之间的关联方面。本研究对肝癌患者与肝脏良性病变患者进行对比，发现肝癌患者的MLR 为（0.26±0.01），肝脏良性病变患者的MLR 为（0.17±0.02），这符合肝癌患者容易出现淋巴转移的客观事实[12]。

本研究结果显示，AFP、AFP-L3 及PIVKA- Ⅱ单独检测诊断肝癌的灵敏度分别为68.50%、65.50%、87.50%，特异度分别为84.50%、91.50%、74.00%，其中串联联合检测中特异度最高，达到96.50%，而并联联合检测中灵敏度最高，达到91.00%。这说明，AFP、AFP-L3、PIVKA- Ⅱ检测对肝癌具有较高的诊断价值，且通过联合检测还能进一步提高诊断效能。其中PIVKA- Ⅱ在肝癌患者中阳性率高，能较好地反映肿瘤的生长情况，被认为是一种有着较高诊断效能的肝癌血清学标志物[13]。多数肝癌患者的血清AFP水平均会呈现高表达的状态，但部分肝炎和肝硬化患者该指标也会呈现上升态势，因此该指标用于诊断肝癌的灵敏度和特异度均不够理想，尤其是当AFP 上升幅度低于20 ng/mL 时，单凭该指标来判断肝脏肿瘤的良恶性质具有一定的难度[14]。肝癌患者的AFP-L3呈阳性时，意味着肿瘤细胞具有快速增殖及早期转移的风险。因此，当患者的AFP 浓度较低时，通过对AFP-L3 进行检测则具有十分重要的指导意义，尤其用于小肝癌的早期诊断时意义重大[15]。本研究也存在一定的局限性，如观察对象较少，缺乏大样本数据的分析等，但根据结果可以推测利用外周血炎症指标联合AFP、AFP-L3、PIVKA- Ⅱ检测在肝癌的诊断与筛查中，能提升早期检出率，帮助临床医生更早、更简单地诊断肝癌，具有一定的经济学效益。

综上所述，外周血炎症指标联合AFP、AFP-L3、PIVKA- Ⅱ检测在肝癌诊断中的应用价值较高，值得临床上广泛应用和推广。