慢性萎缩性胃炎患者血清LTB4和CX3CL1表达水平及其诊断价值研究

史秋霞，李 瑞，邸亚星（忻州市中医医院消化内科，山西忻州 034000）

慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis，CAG）是常见的消化系统疾病，该疾病的主要临床症状为腹痛、恶心、嗳气、便秘、腹泻等，严重者会出现贫血，若不及时进行医治，可能会增加转变成胃癌的风险[1-2]。因此，寻求有效的临床诊断方式对CAG患者的健康至关重要。白三烯B4（leukotriene B4，LTB4）是一种炎症因子，能够向肿瘤微环境提供生物活性分子来促进肿瘤炎症反应的发生发展[3]。CX3C 趋化因子配体1（CX3C chemokine ligand 1，CX3CL1）作为机体炎症反应中的重要指标，可参与炎症疾病的病理生理过程[4]。但LTB4 和CX3CL1在CAG患者中的作用尚鲜有研究。基于此，本研究主要探讨CAG 患者血清LTB4 和CX3CL1的表达水平，进而深入探讨其对CAG 的诊断价值，为CAG 的早期筛查及预后判断提供理论支持。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集2018年3月～2021年3月在忻州市中医医院住院并诊断为CAG 的98 例患者作为研究组，其中男性40 例，女性58 例；年龄32～82（56.01±9.89）岁。另选取同期到本院健康体检者80 例为对照组，其中男性40 例，女性40 例；年龄33～71（53.89±8.13）岁。两组的性别（χ2=1.501，P=0.220）和年龄（t=1.539，P=0.126）比较差异均无统计学意义，具有可比性。收集整理患者年龄、性别、幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）感染、慢性炎症、胃黏膜萎缩、肠化生、不典型增生等临床资料。

纳入标准：①所有患者均经过胃镜和病理学检查确诊[5]；②本研究经本院伦理委员会同意并批准；③患者及近亲属了解本研究并签署知情同意书；④首次确诊并接受治疗；⑤心、肝、肾等功能正常。排除标准：①研究对象精神状态异常，无法正常沟通交流者；②并发消化性溃疡等其他胃部疾病者；③入院前接受其他药物治疗者；④研究对象临床信息不完整；⑤妊娠或哺乳期妇女。

1.2 仪器与试剂 人LTB4 和CX3CL1 酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒（Abcam 公司，货号：ab133040，ab100522）；多功能酶标仪（赛默飞世尔科技有限公司，型号：VLBL0TD2）；离心机（Thermo 公司，型号：75002410）。

1.3 血液采集及指标检测 分别抽取CAG 患者入院后次日及健康体检者体检当日清晨空腹静脉血4 ml，室温静置10～20 min，使用离心机3 000 r/min 离心20 min，收集上层血清置于无菌EP 管中，在-80℃冰箱保存待检。使用ELISA 法检测血清LTB4 和CX3CL1 水平，检测过程严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计学分析 采用SPSS 25.0 软件处理分析数据，计数资料以n（%）表示，行卡方检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，行t检验；Pearson 法分析血清LTB4 与CX3CL1 水平的相关性；Logistic 回归分析影响CAG 发生的影响因素；采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析血清LTB4 和CX3CL1 水平对CAG患者的诊断效能。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组与对照组血清LTB4，CX3CL1 表达水平 与对照组相比，研究组血清中LTB4（8.15±2.13 pg/ml vs 5.89±1.26 pg/ml），CX3CL1（132.06±30.59 pg/ml vs 100.26±12.61 pg/ml）表达水平均明显增加，差异有统计学意义（t=8.368，8.710，均P＜0.05）。

2.2 LTB4，CX3CL1 表达水平与CAG 患者临床病理特征的关系 见表1。分别以CAG 患者血清LTB4和CX3CL1 表达水平的中位值8.40 pg/ml，128.65 pg/ml 为临界值，将CAG 患者分为LTB4 高、低表达组，CX3CL1 高、低表达组，各49 例。分析LTB4，CX3CL1 表达水平与CAG 患者临床病理特征的关系，结果发现，LTB4 和CX3CL1 表达水平与患者年龄、性别、Hp 感染无关，差异无统计学意义（χ2=1.521～3.397，均P＞0.05）；与慢性炎症、胃黏膜萎缩、肠化生、不典型增生有关，差异有统计学意义（χ2=4.083～11.975，均P＜0.05）。

表1 LTB4，CX3CL1 表达水平与CAG 患者临床病理特征的关系 [n（%）]

2.3 CAG 患者血清LTB4，CX3CL1 的相关性分析Pearson 法分析结果显示，CAG 患者血清中LTB4与CX3CL1 表达呈正相关（r=0.235，P=0.020）。

2.4 多因素Logistic 回归分析影响CAG 发生的危险因素 见表2。将CAG 是否发生作为因变量（赋值1=发生，0=未发生），以血清LTB4，CX3CL1水平为自变量进行多因素Logistic 分析，结果显示，LTB4，CX3CL1 是影响CAG 发生的独立危险因素（均P＜0.05）。

表2 多因素Logistic 回归分析影响CAG 发生的危险因素

2.5 血清LTB4，CX3CL1 水平对CAG 的诊断效能 见表3，图1。ROC 曲线结果显示，LTB4 和CX3CL1 单独诊断CAG 患者的AUC 分别为0.805，0.822，约登指数分别为0.581，0.587；LTB4 与CX3CL1 二者联合诊断CAG 患者的AUC 为0.877，约登指数为0.667。二者联合诊断效能优于血清LTB4 和CX3CL1 各自单独诊断（Z二者联合-LTB4=3.031，P=0.024；Z二者联合-CX3CL1=2.340，P=0.019）。

图1 血清LTB4，CX3CL1 单独检测和联合检测的ROC 曲线

表3 血清LTB4，CX3CL1 单独检测和联合检测ROC 曲线参数比较

3 讨论

CAG 是由胃黏膜上的固有腺体发生萎缩导致的胃肠道上皮细胞变异引起的，包括胃萎缩、胃黏膜肠化生和不典型增生，CAG 属于胃癌的癌前病变[6-7]。CAG发病机制较为复杂，涉及多种细胞因子、炎性介质和免疫细胞[8]。研究发现，我国CAG 的发病率逐渐升高，给个人和社会带来了巨大的经济负担[9]。目前，对于CAG 的治疗已取得很大的进展，但是仍有部分患者存在复发、病情加重的现象，已严重威胁到患者的生活质量与生命安全。故寻找安全高效的CAG 血清学诊断标志物尤为重要。研究发现，在急性心肌梗死患者中血清LTB4 的表达明显升高，且与心肌梗死指标存在密切关系[10]。也有学者指出，慢性阻塞性肺疾病患者血清中CX3CL1呈高表达，可在一定程度上预测患者的严重程度[11]。炎症因子LTB4，趋化因子CX3CL1 是学者们研究的新热点基因，然而，关于LTB4 和CX3CL1 在CAG 患者血清中的表达水平及扮演的角色目前仍未可知。基于此，本研究通过检测CAG患者及健康体检者血清中LTB4 及CX3CL1 的表达水平，分析其与CAG 患者的关系，并绘制ROC 曲线评价LTB4 和CX3CL1 在CAG 患者中的临床诊断价值。

炎症因子是影响CAG 发生的重要因素，LTB4作为一种炎症介质，属于LTs家族成员，由巨噬细胞、嗜酸性粒细胞及活化的中性粒细胞释放，可促进促炎性细胞介质和因子的产生，能够调节炎症反应，在炎症信号通路中具有免疫调节的作用。研究显示，血清LTB4 水平与毛细支气管炎严重程度密切相关，早期检测可作为预测毛细支气管炎严重程度的重要标志物[12]。LTB4 在手足口病患儿血清中高表达，对评估患者预后具有一定的预测价值[13]。葛敏娜等[14]研究发现，脑脊液LTB4 水平可随结核性脑膜炎患儿病情加重而增加，且可用于预测患儿治疗效果。本研究结果显示，CAG 患者血清中LTB4 表达水平明显高于健康体检者，这提示LTB4 可能参与CAG 的发生发展过程，可能具有促炎作用，临床诊断或治疗中需要给予重点监测。王华胜等[15]研究发现，LTB4 表达水平在过敏性紫癜患儿中显著上升，患者病情越严重，LTB4 表达水平越高，可见，LTB4 具有较强的促炎作用，进一步证明了本研究结论的可靠性。在研究LTB4 表达水平与CAG 患者临床病理特征的关系中可以发现，LTB4 表达水平与患者慢性炎症、胃黏膜萎缩、肠化生、不典型增生有关。以上证据均提示LTB4 可能是判断CAG病情活动期的观察指标。

CX3CL1 是趋化因子CX3C 族的成员，人类CX3CL1 编码基因聚集在染色体16q13。有研究发现，CX3CLl 在冠心病患者血清中高表达，且表达水平与患者病情程度呈正相关，CX3CLl 参与了患者的病情进展过程[16]。尚俊依等[17]研究表明，非小细胞肺癌患者CX3CL1 表达与其肿瘤迁移、侵袭能力有关。孟媛等[18]研究发现，CX3CL1 在乳腺非特殊类型浸润性癌中呈阳性，且CX3CL1 表达水平与患者较差的5年生存率相关。另外，有研究发现，慢性牙周炎患者CX3CL1 水平显著高于健康体检者，其表达水平与该疾病严重程度呈正相关[19]，此研究证明血清CX3CL1 可作为评估疾病进展的新生物标志物和慢性牙周炎患者潜在的新治疗靶点。那么，血清CX3CL1 又能否成为评估CAG 疾病进展的生物标志物呢？本研究结果显示，与健康体检者相比，CAG 患者血清中CX3CL1 表达水平明显增加，并且CX3CL1 表达水平与CAG 患者慢性炎症、胃黏膜萎缩、肠化生、不典型增生有关。这提示CX3CL1 可影响CAG 疾病的进程。也有研究表明，类风湿关节炎患者血清中的CX3CL1 水平升高，其表达高低与疾病活动度相关，并且在类风湿关节炎的动物模型中，敲低CX3CL1 可以改善关节炎[20]。这进一步表明CX3CL1 是炎症疾病中潜在的生物标志物，从基因水平干扰CX3CL1 的表达，可能是治疗CAG 疾病的一个新思路。

本研究发现，CAG 患者血清LTB4 与CX3CL1表达呈正相关，这提示LTB4 与CX3CL1 之间的表达联系十分紧密。并且，通过进一步分析发现，LTB4 和CX3CL1 均是影响CAG 发生的独立危险因素。上述研究结果再次证明LTB4 与CX3CL1在CAG 的发生发展中占据重要地位，这也提示当LTB4 与CX3CL1 水平升高时应加强对CAG 患者的指标监控及干预治疗。ROC 曲线结果显示，LTB4，CX3CL1 及二者联合检测CAG 患者的AUC 分别为0.805，0.822 和0.877，灵敏度分别为69.39%，61.22%和70.14%，约登指数分别为0.581，0.587 和0.667，二者联合的AUC，灵敏度和约登指数优于血清LTB4，CX3CL1 各自单独检测的AUC，灵敏度和约登指数。可见，临床上对血清LTB4，CX3CL1 的表达水平进行检测时，血清LTB4 与CX3CL1 二者联合检测对CAG 的诊断价值更高，能够弥补单项血清CX3CL1 或单项血清LTB4 检测的不足，可能是判断CAG 病情活动期的观察指标。

综上所述，CAG 患者血清中LTB4，CX3CL1均呈高表达，LTB4，CX3CL1 表达水平与CAG 患者慢性炎症、胃黏膜萎缩、肠化生、不典型增生有关；CAG 患者血清中LTB4 与CX3CL1 表达呈正相关，LTB4，CX3CL1 是影响CAG 发生的危险因素，二者联合检测对CAG 的诊断价值优于LTB4，CX3CL1 单独检测，二者有望成为判断CAG 病情活动期的观察指标。但本研究仍有不足之处，研究对象的样本例数较少，后期需扩大样本量来进一步证实LTB4 与CX3CL1 在CAG 中的作用，以期为CAG 的具体机制研究提供理论依据。