肉牛冻精人工授精技术应用

金得云，何之玉，高 远，刁明策，曾乐益

（1.富源县畜禽改良工作站，云南 富源 655500；2.富源县饲草饲料工作站，云南 富源 655500）

富源县肉牛饲养存栏量11.9万头，其中能繁母牛5.17万头。10头及以上规模户947户，50头以上规模户37户，500头以上大规模户2户，正在建设100头以上规模户4户。有规模化、标准化肉牛户32户，规模化养殖率达46%。全县有牛冻精改良站（点）9个，主要以推广西门塔尔牛、短角牛、云岭牛的细管冻精改良为主，年均完成肉牛冻精改良2万头以上。

针对肉牛冻精人工授精存在“发情鉴定不准确、细管冻精解冻和授精技术不规范”等因素造成部分肉牛多次授精不成功，直接影响养殖户积极性和经济效益的问题，总结肉牛品种改良经验及创新改良技术，加快富源县肉牛冻精改良推广步伐，有效发挥肉牛冻精品种改良作用，全面推进农业现代化高质量发展。

1 母牛发情鉴定

1.1 试 情

准确判定能繁母牛发情时间，能有效提高授精率。依据母牛接受试情公牛或其他母牛爬跨，或互相爬跨的表现来确定授精时机。初情期（引起部分牛伴的跟随或爬跨，但接受爬跨的意愿不强烈），明显期（主动爬跨其他牛伴、但不安静，引起更多牛伴跟随、追赶、爬跨），配种期（此时的牛表现为比较安静，接受爬跨的意愿较强烈）。

1.2 外部观察

可根据母牛发情期的外部变化掌握发情规律，前期有食欲减退、站立不安、呜叫、张望等现象，中期有弓腰举尾、频尿、外阴部湿润、肿胀、有透明黏液流出但不挂丝等现象，后期有阴道黏膜潮红、有透明挂丝的黏液流出等现象。

1.3 鉴定母牛排卵时间及黏液检查

通过直肠检查卵泡发育程度鉴定母牛排卵时间。将子宫颈黏液取出，按镜检操作要求在显微镜下观察，若黏液呈现树枝状花纹结晶或羊齿状，判定为发情盛期，若呈星芒状花纹判定为发情末期。

1.4 查看记录及建立发情鉴定责任制

按21 d左右1个发情周期来查看记录，届时注意母牛发情表现。授精员与养牛户（饲养员）之间要建立母牛发情鉴定联系制度，做到沟通协作，当母牛表现出发情症状时，要在早晨、中午、晚上深入实地，采取问、看、试相结合的方法，根据母牛发情表现和排卵规律，确定授精时间。

1.5 催情及治疗

对长期不发情的母牛可用孕马血清等各种有效生殖激素催情。对患有生殖道疾病的母牛根据不同病情进行治疗后再决定是否输精。

2 细管冻精解冻

细管冻精的解冻，应根据实际需求操作，现场授精可用手搓法或35±l ℃水浴法解冻（10 s左右）；异地授精可用2～8 ℃冷水解冻，并在此温度下运往授精现场，精液解冻后应立即输精，此时受胎率可达75%～80%，存放0.5 d以上，受胎率会降至50%以下。使用解冻12 h以后精液，胎儿早期病死率上升，大多数病死发生在受孕后90 d之内，故提倡使用新鲜的精液，最好是现用现解冻。

3 解冻精液保存和运输

解冻后的精液应放在2～8 ℃的冷水保温瓶中，并以湿毛巾或纱布塞紧，防止震荡，然后运输待用。运输保存过程中必须随时换水，确保温度不超过10 ℃，同时不得把盛精液的容器放在易受震荡的地方，最好手提或背在身上以防震荡。

4 授 精

4.1 授精前准备

受精前应将母牛牵入保定架内保定好，清洗消毒外阴部肛门周围，输精人员剪短指甲并磨光，手臂洗净，带上专用手套，涂上滑润剂，术者一手伸入母牛直肠，排出宿粪，一手握住牛尾中部，防止牛尾扫刷到术者，然后将解冻后的细管带有棉塞的一端套在输精枪的推杆上，细管与输精枪保持在一条线上，两手配合，缓慢将细管送入输精枪枪膛，然后将装好细管的输精枪垂直举起齐眼，用消过毒的剪刀紧贴着封装机口的一端气泡剪1个90°的切口，细管最后突出输精枪至少1 cm，最后将输精外管沿输精枪顶部缓慢压入输精枪底部卡槽，放入磁盆盖好备用。

现场演示

4.2 输精技术

采用直肠把握深部授精法。授精员将一手的五指指尖部位聚攥在一起，成半握拳状，缓慢伸入直肠，当感觉到子宫颈后，将手位于子宫颈上部，由平压直肠转为侧压，缓慢握住子宫颈，压开阴裂，另一手将准备好的授精器由向上45°缓慢平行插入子宫颈，当输精器顶部到达子宫颈口后，两手配合将输精器沿子宫颈口缓慢通过子宫体到达子宫角处，注入精液，随后抽出输精器和直肠内的手。

5 授精标准

冷冻精液一般要在授精前解冻，解冻后最好立即输精。解冻后在2～8 ℃条件下保存的精液，若在3 h内授精，不必再升温，但必须检查精子活力，若精子活力低于0.35时不可使用。细管冻精为1支，其中前进运动精子数要在1 000万以上。

6 输精适期

6.1 授精2次

1个情期授精2次的，应在母牛爬跨后8～12 h第1次输精，间隔8～12 h再次输精。应掌握上午发情，下午输精，晚上再输1次；下午发情，晚上输精，第2 d清晨再输1次；晚上发情，次日清晨输精，下午再输1次。

6.2 输精1次

一个情期输精1次的，建议在停止发情后8 h内输精。对于2～6岁长势良好的能繁母牛可在发情表现安静后及时输精。

6.3 触摸卵泡输精

采用触摸卵泡确定输精时，可在卵泡壁薄、胀而软、有弹性、波动明显，接近成熟排卵前输精1次。如经8～12 h卵泡仍未破裂，可再输精1次。

7 妊娠检查

输精后经过2个月无重复发情者可认为妊娠，此时可通过直肠检查卵泡和子宫角的形状、性质变化来断定是否妊娠。输精后3～4周，若排卵侧卵巢有明显的妊娠黄体者可初步判定为妊娠；5周以后若出现两子宫角不对称，一角收缩明显，一角质地柔软有棉感和流体感者，增大明显，可断定为妊娠。

8 小 结

应用肉牛冻精人工授精技术过程中，影响授精率因素有很多，但在能繁母牛健康的基础上，能准确判定能繁母牛发情表现，把握配种时间，按照冻精解冻操作规程和人工授精技术要点操作，强化学习，充分实践，善于思考，勤于总结，能有效提高肉牛冻精人工授精率，为推进畜牧高质量发展提供强有力的保障。