铁螯合剂去铁斯若衍生物的合成

徐海龙，赵明波

（1. 威海市蓝色经济研究院有限公司，山东 威海 264300；2. 威海市海洋生态经济研究院，山东 威海 264300）

铁超负荷是一种渐进性的、可危及生命的疾病，是频繁输血的并发症。铁超负荷的征象可能在10～20次输血后即可呈现。如果不加以治疗，体内过量的铁会损害肝脏、心脏和内分泌腺[1]。地拉罗司，别名去铁斯若（商品名：Exjade），化学名4-[3, 5-双（2-羟基苯基）-[1, 2, 4]三唑-1-基]苯甲酸，由瑞士诺华制药公司研究开发，于2005年11月获得美国 FDA 批准，用于2岁及以上因输血导致的慢性铁过载患者。2012年12月去铁斯若获欧盟委员会批准，用于因甲磺酸去铁胺疗法禁忌或不足而需螯合疗法的10岁及以上非输血依赖性地中海贫血（NTDT）综合征患者慢性铁过载的治疗。2013年1月23日FDA批准其新适应症，用于10岁及以上NTDT患者的慢性铁过载治疗，以降低与铁有关的发病率和死亡率。4-[3, 5-双（2-羟基苯基）-[1,2, 4]三唑-1-基]苯甲酸还可用于治疗血色素沉着病，被认为是铁螯合治疗领域的重大突破[2-7]。

去铁斯若的合成工艺是以水杨酸、水杨酰胺为起始原料，经酰胺化-缩合、加成-消除反应得到产品[8-11]。质量控制研究中发现一类与去铁斯若结构相似的衍生物[12]，但这类杂质的合成方法未见文献报道，故对这类杂质进行合成研究，以便作为杂质对照品，为去铁斯若原料药的质量控制提供指导和帮助。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

Agilent 1260高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；Agilent 6460液质联用仪（美国Agilent公司）；Varian INOVA-300 核磁共振波谱仪（美国瓦里安公司）。

1.2 试剂

水杨酸（镇江高鹏药业，纯度：＞99.0 %）；水杨酰胺（镇江高鹏药业，纯度：＞98.5 %)；对肼基苯甲酸（常州市阳光药业，纯度：＞98.5 %）；氯化亚砜，吡啶，三乙胺，二甲苯，碳酸氢钠，氢氧化钠，甲醇，乙醇，异丙醇（分析纯，国药集团）。

2 方法与结果

2.1 合成路线

去铁斯若衍生物结构及合成路线及见图1、图2。

图1 去铁斯若衍生物结构式

图2 去铁斯若衍生物的合成路线

2.2 1, 3-噁嗪酮（6）的制备

取水杨酸（360 mmol）和水杨酰胺（325 mmol），溶于100 ml二甲苯中，室温下加入5 ml吡啶，120 ℃下加热至固体完全溶解，然后缓慢滴加SOCl2（500 mmol），滴加速度0.1～0.2 ml/min，滴加完成后体系140 ℃下回流3 h，TLC（展开剂：苯:石油醚:冰醋酸:甲醇=120:60:10:2）检测反应完成，待反应液冷却后过滤，无水乙醇（300 ml×2）洗涤，60 ℃烘干，得到50 g浅黄色固体化合物6。采用HPLC [色谱柱：Hypersil Hypersil BDS C18，流动相乙腈-1 %醋酸缓冲液（35:65），流速：1 ml/min，检测波长：245 nm，柱温：15 ℃] 测定化合物6纯度。

2.3 4-[3-(2-羟基苯酰氧基苯基)-5-(2-羟基苯基)-[1,2, 4]三唑-1-基]苯甲酸（2）的制备

将水杨酸（200 mmol）溶于200 ml二甲苯中，再加入几滴DMF，28～35 ℃下缓慢滴加SOCl2（250 mmol），滴加完成后继续反应1 h，再将化合物6（200 mmol）缓慢加入上述反应液中，升温至65～70 ℃反应8 h，反应完成后减压蒸馏得固体产物，然后加入600 ml无水乙醇搅拌、过滤，三乙胺调节pH 4.5～5.5，减压浓缩，然后将化合物3（对肼基苯甲酸，150 mmol）加入上述浓缩液中，添加400 ml甲醇，反应温度80～100 ℃，反应3 h ，待反应液冷却后直接过滤，甲醇洗涤（200 ml×2），得到淡黄色固体，将其溶于异丙醇中，加入5 g活性炭，加热回流1 h，趁热过滤脱色，滤液静置沉淀，减压抽滤，即得30 g高纯度去铁斯若衍生物（2）。纯度99.93 %[HPLC面积归一化法：色谱柱：Symmetry Shield C18，流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钠-乙腈（55:45），流速：1 ml/min，检测波长：245 nm，柱温30 ℃]；MS（ESI）m/z：494.2[(M+H)+]；1H NMR（300 MHz，DMSO-d6）：δ6.99（d，1H），7.02（m，1H），7.30（m，2H），7.42（m，2H），7.54（d，1H），7.60（d，1H），7.70（m，2H），7.80（d，2H），8.01（d，1H），8.10（d，2H），8.31（br，1H），12.35（br，1H）。

2.4 4-[3-(2-羟基苯酰氧基苯基)-5-(2-羟基苯基)-[1,2, 4]三唑-1-基]苯甲酸甲酯的制备

将制备得到的化合物2（20 mmol）溶解于100 ml无水甲醇中，25 ℃下缓慢滴加1 ml浓硫酸，滴加完毕后，油浴100 ℃加热回流7 h，反应结束后将混合液体冷却至室温，倒入去离子水中，静置沉淀，减压抽滤，得到白色固体，甲醇重结晶，过滤，烘干，即得8 g白色粉末状最终产物。纯度99.80 %[HPLC面积归一化法：色谱柱：Symmetry Shield C18，流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钠-乙腈（55:45），流速：1 ml/min，检测波长：245 nm，柱温30 ℃]；MS（ESI）m/z：508.1[(M+H)+]；1H NMR（300 MHz，DMSO-d6）：δ3.97（s，3H），6.98（d，1H），7.20（m，1H），7.29（m，2H），7.62（m，2H），7.40（m，2H），7.76（d，2H），7.80（d，2H），7.92（br，1H），7.99（d，2H）。

2.5 4-[3-(2-羟基苯酰氧基苯基)-5-(2-羟基苯基)-[1,2, 4]三唑-1-基]苯甲酸乙酯的制备

将制备的化合物2（20 mmol）溶解于100 ml无水乙醇中，25 ℃下缓慢滴加1 ml浓硫酸，待滴加完毕后，油浴100 ℃加热回流7 h，反应结束后将混合液体冷却至室温，倒入去离子水中，静置沉淀，减压抽滤，得到白色固体，乙醇重结晶，过滤烘干，即得9 g白色粉末状产物。纯度99.70 %[HPLC面积归一化法：色谱柱：Symmetry Shield C18，流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钠-乙腈（55:45），流速：1 ml/min，检测波长：245 nm，柱温30 ℃]；MS（ESI）m/z：522.1[(M+H)+]；1H NMR（300 MHz，DMSO-d6）：δ1.37（t，3H），4.33（q，2H），6.95（d，2H），7.24（m，2H），7.42（m，1H），7.63（d，1H），7.75（d，2H），7.95（d，2H），7.87（br，1H），8.11（d，1H）。

3 结论

本文以水杨酸、水杨酰胺、对肼基苯甲酸等为原料，经酰胺化-缩合、加成-消除、提纯等步骤合成了一系列去铁斯若衍生物，并通过MS、1H MNR方法进行了结构确证。该工艺简单合理，可操作性强，制得的产品纯度达99.5 %以上，可作为药物去铁斯若的杂质对照品。