兰馨雨,邵显会,陈仁垚,欧绥
(凯里学院,贵州黔东南 556000)
魔芋为天南星科(Araceae)魔芋属(Amorphophallus)多年生宿根草本植物,又称“蒟蒻”“麻芋”,主要分布于中国、日本、泰国、缅甸、印度等地[1]。其是提取葡甘聚糖(Konjac Glucomannan,KGM)最多的一种经济型作物,具有调节血糖、胆固醇及免疫系统的功能[2]。据记载,魔芋原产于印度,全世界魔芋品种约有200 种,我国约有30种,其中,有14 种只在我国种植[3]。魔芋在我国种植历史悠久,西汉时期药学著作《神农本草经》中,将魔芋列为药物,而西晋时期文学家左思所写《蜀都赋》里也有记载魔芋:“云蒟蒻其根白,以汁煮即成冻,以苦酒淹食,蜀人珍之”。
白魔芋是由我国魔芋专家刘佩瑛、陈劲枫[4]于1984年发现并命名的新品种,目前只在我国种植。食用器官是地下块茎,能用于提取葡甘聚糖,因其凝胶性、成膜性等物理特性和保健作用,被广泛用于工业、医药、食品等领域[5]。白魔芋因葡甘聚糖含量高、加工品优良、功能多样,在我国需求量大,然而魔芋易患软腐病,其被称为魔芋的“癌症”[6],使得白魔芋产量逐年下降。因此,培育良好的品种、科学栽培白魔芋,成为魔芋科学研究中的重中之重。
近年来,随着外源钙在多种经济作物上的深入研究,钙素对植物生理生化作用及品质产量影响的探索,已成为众多学者研究的首要目标。钙参与植物整个生长发育过程,植物细胞内的钙主要以结合态和离子态2 种形式存在[7],同时,有研究表明,植物花粉管的生长和伸长也对钙离子浓度有较高要求。钙作为第二信使,既参与细胞的信号转导,又参与植物生长发育过程中的生理生化反应[8],可提升植物抗逆境胁迫能力,对植物起到保护和促进生长的作用[9]。
目前,关于施加外源钙肥对果树、蔬菜、玉米等生长发育的研究成果较多,如刘鑫铭等[10]以巨峰葡萄为材料,研究得出,钙处理能提升巨峰葡萄果实品质,以叶面、果穗喷施结合根际灌施1500 倍液糖醇钙肥处理效果最佳。姚琪等[11]以番茄为材料,研究得出,外源喷施Ca和EBR 可不同程度地促进番茄果实生长和果实对钙素的吸收利用,从而有效改善果实品质。张浩等[12]研究外源钙对盐胁迫下玉米的作用,表明外源钙能缓解玉米的盐胁迫。但对魔芋施加外源钙素的研究较少,有较大发展空间,而提高白魔芋栽培技术水平至关重要,能为今后魔芋产量、品质的提高奠定一定理论基础。
以白魔芋实生苗为试验材料,于2022 年在黔东南凯里学院试验基地种植白魔芋,前茬作物为杂交魔芋,土壤条件为黄砂壤土。魔芋种子为网购或上一年的留种,种植前经3%多菌灵杀菌3~4h 后,放置于阴凉处晾晒2~3d,种植前施腐熟农家肥2t/667m2,并深翻土壤、晾晒杀菌。
参考张昕[13]以马铃薯为研究对象和季祥等[14]以山药为研究对象的研究。在大田试验条件下,以硝酸钙(外源钙用分析纯的硝酸钙)作外源钙,对生长期的白魔芋作灌施处理。采用随机区组设计,于2022 年4 月下旬种植白魔芋材料,株行距规格为30cm×30cm,垄宽90 cm、垄距110cm,每小区5 行,行长8m。
将试验材料平均分为4 组,其中1 组为对照组(CK),不做任何处理;其余3 组在块茎膨大初期,即6月30 日于魔芋根部灌施可溶性硝酸钙溶液,每隔5~10d 灌施1 次,共灌施3 次,设3 个钙水平,浓度分别为19kg/hm2、38kg/hm2、76kg/hm2。对照组及3 个钙素浓度依次标记为A-0、A-1、A-2、A-3,每组材料各选3 株作为生物学重复。取样时将挖出的块茎放入自封袋中,并迅速放入-4℃的取样箱中,保持新鲜,带回实验室后清水洗净、擦干,并测量生理指标,测量方式为最后一次灌施后,隔15d 测量第1 次相关指标,共测量5~6 次,每次间隔15d。
1.3.1 园艺性状的测定。施用外源钙素15d,在每小区内选取生长均匀、整齐的3 株魔芋苗作为观察株,用米尺测量株高和叶面积,用游标卡尺测量横径。株高的测量方法为魔芋基部至生长点;茎粗的测量方法为植株最近基部最粗处,用游标卡尺测量横径。由于魔芋叶片为大型复叶,小裂叶片较多,即用米尺测量时,以白魔芋植株叶展测量叶面积。
1.3.2 叶绿素的测定。选择天气晴朗、没有露水的上午时间段(9:00~10:00),于每个小区任选3 株生长一致、大小均一的白魔芋植株,利用手持式叶绿素测定仪(型号:SPAD-502PLUS)测定白魔芋叶片,每株选择不同部位,重复测3 次,取平均值。
1.3.3 MDA 的测定。采用硫代巴比妥酸法,测定新鲜魔芋叶片中MDA 含量[15],参考李合生试验方法并稍加改动。仪器:分光光度计、离心机、水浴锅、研钵、万分之一天平等。试剂:①磷酸缓冲溶液调至pH 值7.8;②10%三氯乙酸(TCA)溶液配制:称10g 三氯乙酸,用蒸馏水溶解并定容至100mL;③0.6%硫代巴比妥酸(TBA)溶液的配制:称取0.6g 硫代巴比妥酸,由于硫代巴比妥酸难溶,可用少量氢氧化钠(浓度为1mol/L)溶解,后用10%TCA 定容至100mL;④石英砂。
丙二醛的提取:称取0.5g 新鲜魔芋叶片材料,先加10% TCA 2mL 和少量石英砂研磨至匀浆后,再加入2~3mLTCA 进一步研磨,将研磨所得的匀浆在4000r/min 下离心10~15min,上清液即为样品提取液。
丙二醛的显色反应和含量测定:取上述步骤中所得的上清液2.0mL 于带塞试管中(每组重复3 次),加入0.6%硫代巴比妥酸(TBA)溶液,对照管以2mL 蒸馏水代替提取液,摇匀后在沸水浴上反应15min,迅速冷却后再离心1 次,取上清液分别于532nm、600nm 及450nm 波长下测定吸光值。
1.3.4 数据分析。采用Microsoft Excel 2016 软件,对试验数据进行整理分析,并用origin 2018 软件制图。
株高作为白魔芋营养生长指标之一,能直接反映魔芋的生长势。由表1 可知,灌施不同浓度的外源钙素对白魔芋株高生长有影响。随着白魔芋生长时间的延长,株高均呈升高趋势,且各个浓度之间存在显著差异,在不同时期差异也较显著。虽然不同浓度的外源钙株高变化增长势不同,但施加浓度A-3 的白魔芋株高显著高于其他各个浓度,显然最有利于魔芋株高增长。
表1 外源钙对白魔芋株高的影响
由表2 可知,不同外源钙浓度水平对白魔芋茎粗有影响。在前期差异并不显著,后期A-2、A-3 浓度高于A-0、A-1,且差异显著,A-3 显著高于其他浓度。可见,施加不同浓度外源钙浓度对魔芋茎粗增长有影响,A-2、A-3 对白魔芋茎粗作用明显。
表2 外源钙对白魔芋茎粗的影响
扩大光合作用面积,能提高植物积累有机物效率,而叶面积决定了光合有效辐射的大小,也关系到白魔芋光合产物积累速率。由图1 可知,不同外源钙浓度处理的白魔芋,叶面积大小均随处理后生长天数呈先增大、后减小的趋势,且各个处理间存在明显差异。对照组叶面积相较于其他处理组变化趋势较小,A-3 处理叶面积上升趋势高于其他浓度,在45d 时达到顶峰,后叶面积逐渐下降且下降趋势快;A-2 处理叶面积前期稳定上升,45d 后减小趋势低于其他处理;A-1 处理变化无规律,变化幅度较大。表明A-2 浓度处理能有效延缓魔芋叶面积下降。
图1 外源钙对白魔芋叶面积影响趋势图
植物进行光合作用产生有机物的过程,主要与叶绿体的叶绿素含量有关,所以,白魔芋中叶绿素含量的高低会直接影响其光合作用,进而影响魔芋整个生长发育过程。由图2 可知,白魔芋中叶绿素含量随施加外源钙素天数的增加,呈现先升高、后下降的趋势,处理45d 以前,叶绿素含量均呈显著上升趋势,在处理后45d 达到最高值,之后由于白魔芋叶绿素含量的减少而快速下降。不同外源钙素浓度处理下,各组叶绿素含量有差异,其中,处理A-2 显著高于对照组及其他各组。表明外源钙38kg/hm2叶绿素含量显著高于对照及其他浓度。
图2 外源钙对魔芋叶绿素含量影响趋势图
植物器官衰老或受逆境胁迫下会发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是膜脂过氧化作用的最终产物,正常植物体内丙二醛含量一般较低,有利于植物生长发育。由图3 可知,使用不同浓度的外源钙浓度处理中,丙二醛含量在处后理30d 内变化水平并不显著,后随白魔芋生长,各器官逐渐成熟、衰老,魔芋体内MDA 含量开始显著上升。对照组MDA 含量在30d 后上升趋势明显高于A-1、A-2、A-3;对照组A-0、A-1 处理丙二醛含量明显高于A-2、A-3;外源钙浓度处理的4 组材料中,A-2、A-3 处理的丙二醛(MDA)在60d 时不再上升,表明38kg/hm2浓度处理能有效抑制白魔芋中MDA 含量。由此可知,适宜外源钙浓度处理能显著降低白魔芋中丙二醛含量,有利于魔芋正常生长。
图3 外源钙对白魔芋MDA 含量影响趋势图
本研究基于植物对钙元素的需求,通过向白魔芋根部以水溶液的形式灌施外源钙,处理浓度为19kg/hm2、38kg/hm2、76kg/hm2,并以不做任何处理的一组作为对照,得出外源钙对白魔芋株高、茎粗、叶幅、叶绿素、MDA 含量有一定影响。与对照组相比,施加外源钙的组别的株高较高、茎粗相对较粗,而植株的株高和茎粗是判断白魔芋生长状况好坏的指标之一,一定程度上反映其生长趋势高低、植株的强壮,有利于加快白魔芋自身物质的转运,促进物质合成,提高白魔芋块茎内含物质积累膨大。施入38kg/hm2浓度的外源钙,对白魔芋形态及叶绿素含量影响较大;施入76kg/hm2浓度的外源钙,对白魔芋也有一定影响,但不如38kg/hm2浓度处理。
叶绿素作为一种光合色素,参与光合作用过程,含量的多少与有机物的积累呈正相关。白魔芋作为一种富含多种营养物质的作物,叶片中叶绿素含量不仅影响其球茎的发育,而且还影响白魔芋的品质。在白魔芋的生长发育过程中,叶绿素含量在白魔芋进行光合作用、积累有机物的过程中至关重要。早在1964 年,Nobel 等著名生理学家研究叶绿体和钙之间的关系时,认为叶绿体参与植物对钙的吸收,同时,钙也能影响植物中的叶绿素[16]。叶片是白魔芋进行光合作用的器官,叶片大小不仅反映了魔芋生长发育状况,而且决定其进行光合作用的能力,叶面积增大可加强白魔芋的光合作用,加快有机物的合成,增加魔芋鲜重。
丙二醛(MDA)含量高不利于植物生长,与白魔芋生长呈负相关。适宜的钙素浓度能有效地抑制丙二醛(MDA)含量,从而降低魔芋组织中活性氧自由基含量,降低脂质过氧化作用对生物膜的破坏作用[17],在试验中,外源钙处理的试验组,丙二醛含量明显低于对照组,且在梯度A-2 时效果达到最佳。由此可知,在魔芋的生长过程中,A-2 处理对白魔芋园艺性状和生理指标的影响最为理想。
综上所述,施入38kg/hm2浓度外源钙利于白魔芋生长,抑制白魔芋体内不利于其生长发育的内源物质的变化,这一结果与辛建华等[18]钙素对马铃薯的影响研究结果相似。这一结果不仅有利于提高白魔芋栽培质量和产量,而且对其资源研究及解决白魔芋栽培中的难题、满足市场对魔芋巨大需求也能提供帮助。但外源钙对白魔芋生长发育其他方面的影响,如病虫害、引种资源、基因工程等领域还未涉及,尚待进一步研究。