外周血结核感染T细胞斑点试验对活动性结核的诊断价值

徐 杨 宁 丽 尹航贤

（大连市友谊医院，辽宁 大连 116001）

结核病是由结核杆菌引起的慢性传染病，是我国重点控制的疾病类型，在我国的发病率较高，位于全球第2位。早发现、早治疗是结核病控制的关键。当前临床诊断结核病的相关技术都在不断升级，为提高临床诊断价值，为早期治疗提供有效依据，还需要重视新技术的应用[1]。外周血结核感染T细胞斑点试验是以高灵敏度的酶联免疫斑点技术为检验措施，检验结核分歧杆菌感染情况的新技术。该技术为活动性结核的早期诊断提供了新的技术支持与检验方向，为研究外周血结核感染T细胞斑点试验在活动性结核临床检验方法的诊断价值[2-3]。本研究以我院检验科2018年5月至2019年5月收治的疑似结核病患者50例为研究对象进行试验，详细报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院检验科2018年5月至2019年5月收治的疑似结核病患者50例对研究对象，对患者进行试验研究。将患者以随机分组法分为试验组与对照组。试验组患者男性13例，女性12例，平均年龄为（43.80±5.30）岁，患者平均病程为7 d～3个月。对照组患者男性12例，女性13例，平均年龄为（44.50±6.10）岁，患者平均病程为7 d～3个月。试验组患者中发热待查的患者18例，肺部感染性病变患者6例，腹腔积液患者7例。对照组患者中发热待查的患者15例，肺部感染性病变患者9例，腹腔积液患者6例。两组患者的性别、年龄、病程等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：患者自愿参与本次试验研究，了解试验研究目的与内容，签署同意书；患者经过临床诊断确认为结核病；患者未感染其他传染性疾病，不对试验研究形成影响。排除标准：抗结核治疗无效；非结核性疾病；具有认知障碍或精神疾病、家族遗传病史。

1.3 方法 试验组患者接受外周血结合感染T细胞斑点试验，通过对患者外周静脉采血的方式，采集患者血液5 mL，从患者血液中分离外周单个核细胞，并添加阳性细胞培养液、植物血凝素、分泌靶细胞抗原于微量板孔中，送入培养箱孵育2 h，于2 h后洗脱PBS，并进行显色处理，通过放大计斑点树木的方式，进行检出率分析与判断。其中，计数孔点数大于阴性对照2倍的为阳性，或计数孔点数多出阴性对照5个点的为阳性。对照组患者接受结核干扰素酶免检验，取新鲜采集肝素钠抗凝血8 mL，放置6 h后加入刺激物，后于4 ℃冰箱内放置过夜，隔天取出，在取出的培养物中置入发光底物液，对培养物进行光分析，在发光底物液置入后5 min时读取培养物的发光强度，记录数据。

1.4 观察指标 通过对试验组患者与对照组患者的试验研究，收集试验指标指数，对比两组患者的敏感度、特异度、准确度、动脉血压变异率（PPV）、NPV、LR+、LR-指标。

1.5 统计学方法 采用SPSS 20.0统计学软件对数据进行分析。计量资料采用（）表示，组间比较行t检验；计数资料采用[n（%）]表示，组间比较行χ2检验；P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

试验组即以外周血结核感染T细胞斑点试验患者在检验敏感度上为87.9%，特异度为84.1%，PPV、NPV指标分别为73.8%、94.9%，准确度达84.2%，LR+为（6.10±0.31），LR-为（0.13±0.30）；对照组即以结核干扰素酶免试验的患者在检验敏感度上为57.9%，特异度为57.3%，PPV、NPV指标分别为42.5%、74.9%，准确度达59.2%，LR+为（1.59±0.29），LR-为（0.68±2.31）。经对比发现，试验组检验指标明显优于对照组检验指标，且两组指标间数据差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

结核病作为慢性传染病，具有传染性，若患者未及时接受治疗，将造成结核杆菌的耐药性，难以治愈，并危及生命[4]。在结核病发病早期，采用不同的诊断方法得到的诊断效果也是不同的。为了提高临床诊断的价值，需要在结核病的诊断措施中不断优化与完善[5]。以外周血结核感染T细胞斑点试验进行活动性结核的临床诊断是一种新的技术，其通过在外周血标本中的检测对机体感染结核杆菌后分泌干扰素的T淋巴细胞水平来判断机体是否感染结核杆菌[6]。其技术原理如下：结核分歧杆菌在侵入并感染人体后，首先会被机体非特异度抗体的第2道防线中吞噬细胞吞噬，但吞噬细胞不能完全清除结核分歧杆菌，在吞噬细胞凋亡后将释放出大量的特异度抗原，激发机体的特异度免疫，结核分歧杆菌特异度抗原刺激特异度免疫中的T细胞，造成T细胞致敏，同时激活并释放大量的γ干扰素[7]。在临床医学诊断中，将结核抗原刺激下特异度分泌γ干扰素的T细胞为检验标志物，能够形成对结核分歧杆菌感染的认识，具体是通过检测外周血中受结核分歧杆菌特异度抗原刺激后分泌γ干扰素的T淋巴细胞水平判断机体是否感染结核分歧杆菌[8]。

为分析外周血结核感染T细胞斑点试验对活动性结核的临床诊断价值，本文通过试验研究的方式，对比外周血结核感染T细胞斑点试验与结核干扰素酶免试验，通过试验的对比与分析发现，以外周血结核感染T细胞斑点试验进行试验研究的患者在采集的数据上明显由于干扰素酶免试验的患者数据[9]。外周血结核感染T细胞斑点试验在活动性结核的临床诊断中具有较高的敏感度，特别是患者自身机体的免疫状态对外周血结核感染T细胞斑点试验形成影响较少，即使患者接种过卡介苗也不形成明显的影响[10-11]。通过外周血结核感染T细胞斑点试验能够检验患者的活动性肺结核、腹腔结核、免疫抑制结核等症状，在临床检验上速度较快，效率较高，一般在检验后24 h即可得出结果，所以将外周血结核感染T细胞斑点试验应用于活动性结核的早期诊断中是具有较高的临床诊断价值的，其能够更早的发现患者的结核病情况[12]。

为进一步分析外周血结核感染T细胞斑点试验在活动性结核的临床诊断价值，从其优劣势中进行深入探讨：①从外周血结核感染T细胞斑点试验的优点上来分析，其诊断的速度快，能够在诊断后的24 h出诊断报告，便于临床诊断研究与分析；其能够检测的结核病类型多，应用较为广泛，可以应用于活动性肺结核、肺外结核、结核性浆膜炎、免疫抑制结核患者中，都能够形成有效的诊断与分析报告；其临床诊断的灵敏度较高，能够对结核病患者的结核分歧杆菌状态形成具体认识，具有较高的特异度，不受患者是否接种卡介苗的影响或环境分歧杆菌的影响，在诊断准确率上较高，且不受患者机体免疫状态的影响；通过检验能够形成疗效的评估，在患者接受结核病治疗后，再次进行外周血结核感染T细胞斑点试验，若患者T细胞斑点数目减少或呈阴性，这表示为患者接受的治疗有实际效果，能够为患者治疗情况形成有效评价[13]。②外周血结核感染T细胞斑点试验也具有一定的不足，由于该技术的产生不久，在技术流程上还相对繁琐，技术应用的成本较高，并且对于实验室技术与操作水平的要求较高。如在试验用的标本上，需要室温保存与运输血液样本过程中都能够保持温度在18～25 ℃，不能进行冷冻或冷藏处理，且患者的血液样品采集后8 h内需要完成检测工作，超时则不具有检测价值；另外，当前以外周血结核感染T细胞斑点试验进行临床试验的数据还较为缺乏，难以形成有效的数据对比效果，在数据分析上缺少依据。所以在外周血结核感染T细胞斑点试验的临床应用中还需要与其他检测进行联合检测与判断，临床上以外周血结核感染T细胞斑点试验检验为阴性结果的也不能够直接排除暴露或感染结核杆菌的可能性；再者，外周血结核感染T细胞斑点试验还无法高质量的鉴别结核病的活动性与潜伏性，当前并无统一的界值能够用于潜伏结核感染与活动性肺结核中，所以存在一定的不确定性因素；最重要的是，外周血结核感染T细胞斑点试验不能够确定患者的病变部位，所以在检验的针对性上还不强，需要加以技术完善与改进[14-15]。

但不可忽视的是，结核病的预防对于结核病患者生活质量的改善与身体功能的早期调节具有积极的意义。外周血结核感染T细胞斑点试验在活动性结核的临床诊断上具有一定价值，能够在结核病患者早期发病周期内准确的提供患者感染结核双歧杆菌的依据，帮助患者积极的控制病情，以利于降低患者受结核病影响的概率，有效控制结核病患者病死率。外周血结核感染T细胞斑点试验作为一种新的检验技术，在结核双歧杆菌的检测上具有良好检验优势，其应用酶联免疫学的技术基础形成检验，在敏感度与特异度上较早期的PPD试验都有所提高，在试验检测的效率上也更高，针对于早期结核病患者的诊断价值更高[16]。相关报道发现，在临床症状较为不典型的结核病患者中，以PPD检测诊断难以形成较好诊断效果时，通过外周血结核感染T细胞斑点试验能够帮助确诊结核病感染情况。这说明，外周血结核感染T细胞斑点试验作为一种新的检验技术，其在结核病的检验上具有一定技术优势，应用于活动性结核的早期诊断上能够提高早期诊断的科学性，形成较高的临床诊断价值[17]。

总的来说，以外周血结核感染T细胞斑点试验对活动性结核进行临床诊断，其具有技术优势，在试验数据的准确性上较高，且试验数据报告的出具较快。该试验技术具有较强的灵敏度与特异度，形成了以传统检验技术的明显对比，能够为结核病患者的早期诊断提供有力依据。尽管外周血结核感染T细胞斑点试验具有流程繁琐、成本较高等不足，但在活动性结核的临床诊断中依旧是具有较高的诊断价值，其能够提高对结核病患者早期诊断的效率，从而为患者及时治疗，减轻患者病痛，提高治疗质量。