枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化的影响

任跃昌， 赵恬玉， 李林葵， 朱政奇， 张凯瑛，马璐璐， 张鹏飞， 孙作为， 杨维仁*

（1.山东农业大学动物科技学院，山东泰安 271018；2.山东农业大学食品科学与工程学院，山东泰安 271018；3.山东玖瑞农业集团有限公司，山东青岛 266000；4.山东省莱阳市柏林庄畜牧兽医站，山东烟台 265200）

枯草芽孢杆菌属于革兰氏阳性菌，是农业农村部批准添加的饲用益生菌之一，能够诱导产生在高温、酸性环境下具有极强的环境适应能力的抗逆性较强的内源孢子（Fortec等，2016；贾久满等，2015）。枯草芽孢杆菌能够泌蛋白酶和纤维素酶等多种生物活性因子，并且可以有效地改善肠道菌群组成，促进动物机体对饲粮营养的消化利用（张安荣等，2020；裴跃明等，2016）；同时枯草芽孢杆菌还可以产生细菌素、多不饱和脂肪酸，能够调节肠道pH，对多种致病菌产生抑制作用（Duc等，2004）。产蛋后期蛋鸡由于氧化应激的长期积累，抗应激能力变差，出现产蛋性能降低、破蛋率增加、哈氏单位下降以及蛋清稀释等现象，而哈氏单位则直接与货架期相关（Vlěcková等，2019）。大量的研究结果表明，饲粮添加枯草芽孢杆菌能够调节肠道菌群，提高养分的表观代谢率；在蛋鸡饲粮中添加枯草芽孢杆菌能够提高产蛋率、平均蛋重、哈氏单位，降低料蛋比（Liu等，2018；黄晨轩等，2018；赵姝娴等，2018；范彧等，2012）。但目前枯草芽孢杆菌对600日龄后的蛋鸡生产性能、蛋品质等指标研究较少，因此本试验旨在探究在87 w蛋鸡饲粮中添加枯草芽孢杆菌对产蛋性能、血清生化及蛋品质的影响，为应用枯草芽孢杆菌延长产蛋周期提供数据。

1 材料与方法

1.1 试验设计 采用单因子试验设计，选取健康状况、产蛋性能相近的87 w海兰褐商品蛋鸡2400只，随机分为4个处理，每个处理6个重复，每个重复100只鸡。处理Ⅰ组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮，处理Ⅱ组在基础饲粮中添加0.05%博落回提取物作为阳性对照，处理Ⅲ、Ⅳ组分别添加0.2%和0.4%的枯草芽孢杆菌。预试期1 w，正试期6 w。

1.2 试验材料 试验所用枯草芽孢杆菌由烟台深海生物科技有限公司提供，枯草芽孢杆菌含量≥5.5×108CFU/g。博落回提取物由北京科为博生物科技有限公司提供，有效成分为白屈菜红碱（≥900 mg/kg）和血根碱（≥1500 mg/kg）。

1.3 试验饲粮与饲养管理 《基础饲粮参照鸡饲养标准》（NY/T 33—2004）配制，基础饲粮组成及营养水平见表1；采用半开放式鸡舍3层立体笼养，每天光照时间保证16～17 h。自由采食和饮水。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）

1.3 测定指标与方法

1.3.1 生产性能 以重复为单位，记录产蛋总数、产蛋总重、破蛋数。计算产蛋率、平均蛋重、料蛋比和平均日采食量。

1.3.2 蛋品质 试验结束前连续3 d每个重复随机选5枚鸡蛋，使用Robotmation EMT-5 200多功能蛋品质分析仪测定哈氏单位、蛋白高度、蛋黄颜色等蛋品质指标。

1.3.3 输卵管指数 试验结束时，每个处理选取5只鸡屠宰后取输卵管，生理盐水洗净、擦干、称重，计算输卵管指数。

1.3.4 血清生化 试验结束，每个重复随机选取2只鸡进行翅下静脉采血，采血前禁食12 h，2500 r/min离心10 min，取上清液-20℃保存。使用山东农业大学全自动生化分析仪测定血清碱性磷酸酶（ALP）活性以及甘油三脂（TG）、胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量。

1.4 统计分析 数据使用SAS 9.2软件进行单因子分析，结果以“平均值±标准差”表示，以P＜0.05作为差异显著性判断标准。

2 结果

2.1 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡生产性能的影响 由表2可见，与对照组相比，饲粮添加0.05%博落回提取物组以及0.2%、0.4%枯草芽孢杆菌组的产蛋率分别提高了1.65%、3.07%、0.97%，次蛋率分别降低17.65%、55.89%、55.88%；料蛋比显著降低，以0.2%枯草芽孢杆菌组的料蛋比最低，达到了2.23；与阳性对照组博落回提取物组相比，枯草芽孢杆菌组的次蛋率显著降低。

表2 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡生产性能的影响

2.2 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡蛋品质的影响 由表3可见，不同处理组的蛋品质指标均无显著差异（P＞0.05）。

表3 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡蛋品质的影响

2.3 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡蛋壳颜色的影响 由表4可知，与对照组相比，博落回提取物组和枯草芽孢杆菌组的红度值（a*）和黄度值（b*）显著升高，蛋壳显示红色的程度更深。

表4 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡蛋壳颜色的影响

2.4 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡血清生化的影响 由表5可知，与对照组相比，饲粮添加枯草芽孢杆菌能显著降低血清TC和HDL的含量，并且0.4%枯草芽孢杆菌组更为显著。

表5 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡血清生化的影响

2.5 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡输卵管指数的影响 由图1可知，与对照组和博落回提取物组相比，饲粮添加0.2%枯草芽孢杆菌能够提高87～93 w蛋鸡输卵管指数。

图1 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡输卵管指数的影响

3 讨论

3.1 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡生产性能的影响 裴跃明等（2016）在47周龄新杨黑蛋鸡的基础饲粮中分别添加0.25%、0.5%、0.75%的枯草芽孢杆菌 （活菌数分别为16.25×105、32.5×105、48.75×105CFU/g），显著提高了蛋鸡产蛋率，增加蛋重，降低破蛋率、料蛋比。徐海燕等（2012）的研究结果表明，在80周龄海兰褐蛋鸡饲粮中添加5×105CFU/g的枯草芽孢杆菌可提高产蛋率和蛋壳质量，降低料蛋比。Ribeiro等（2014）添加8×105CFU/g的枯草芽孢杆菌，结果表明，平均蛋重和蛋品质指标提高。李俊波等（2009）在45周龄尼克珊瑚粉蛋鸡饲粮中添加250 mg/kg和500 mg/kg枯草芽孢杆菌制剂（活菌数分别为5×105、10×105CFU/g），显著降低了破蛋率，并且在一定程度上提高了平均蛋重以及蛋壳厚度。本次试验结果表明，在87～93 w海兰褐蛋鸡饲粮中添加0.2%、0.4%的枯草芽孢杆菌（活菌数分别为11×105、22×105CFU/g）提高了产蛋率和平均蛋重，降低了料蛋比和破蛋率。分析原因可能是由于枯草芽孢杆菌进入肠道后可以迅速复活并分泌活性物质，将复杂的大分子营养物质降解；同时活菌发酵物产物含有大量的多糖、寡糖、肽类、磷活性物质，能够抑制病原微生物的繁殖，维持肠道健康，提高养分消化吸收率（祝天龙等，2015）。

3.2 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡蛋品质和蛋壳颜色的影响 哈氏单位和蛋白高度是衡量蛋品质的重要指标，关于枯草芽孢杆菌对蛋品质影响，不同的试验结果不完全一致。Neijat等（2019）的研究结果表明，枯草芽孢杆菌能够提高哈氏单位和蛋白高度。王源昊等（2021）在69周龄海兰褐蛋鸡饲粮添加活菌数为10×105CFU/g的枯草芽孢杆菌发现，显著提高了哈氏单位和蛋黄颜色等级，且有提高蛋白高度的趋势。本次试验发现，博落回提取物组和枯草芽孢杆菌组鸡蛋的蛋白高度、哈氏单位、蛋黄颜色、蛋壳强度无显著的差异，造成这种差异的原因可能与试验周期、饲养环境、动物日龄有关联，同时枯草芽孢杆菌商品菌株来源不一，活性也不同，因此还需要进行大量筛选对比研究，以便于在饲料配方中的广泛应用。

蛋壳颜色是消费者判断商品鸡蛋优劣的直接参考指标。褐壳蛋的蛋壳色素主要是原卟啉，但也存在胆绿素以及胆绿素的锌螯合物等其他色素（王晶晶，2008）。本次研究发现，枯草芽孢杆菌组的红度值（a*）和黄度值（b*）显著升高，蛋壳显示红色的程度更深。Hooge（2007）研究报道，罗曼布朗母鸡饲粮添加枯草芽孢杆菌至63周，蛋壳颜色深度得到增强。Hansson等（2007）研究提出，枯草芽孢杆菌铁螯合酶中的His183和Glu264能够促进金属离子插入原卟啉中氨基酸残基的作用机制。枯草芽孢杆菌对蛋壳颜色调控的作用方式还需要进一步的深入研究。

3.3 枯草芽孢杆菌对87～93 w蛋鸡血清生化指标的影响 血液生化指标能够直接反映动物机体的物质代谢以及组织机能状态。血清TP、ALB是衡量机体免疫水平和肝脏功能是否正常的重要指标。郭军蕊等（2017）研究发现，产蛋鸡饲粮添加枯草芽孢杆菌对血清TP、ALB无显著影响，本次的试验结果与其一致。而郑超等（2020）在饲粮添加2×106CFU/g的枯草芽孢杆菌显著提高了380日龄京粉2号蛋鸡的血清TP、ALB。不同的试验结果可能是由于菌株、用量以及蛋鸡品种不同造成。TC和TG是反映脂肪代谢水平的重要指标，TC含量不正常上升往往会引起肾脏、心血管疾病，TG含量的异常升高通常反映出脂蛋白代谢异常（李卫芬等，2014）。血清TC含量受参与胆固醇合成的关键酶-羟甲基戊二酸单酰辅酶A活性的影响。Fukushima等（1995）研究结果表明，益生菌能够抑制胆固醇合成过程中的关键酶。李卫芬等（2014）在肉鸡饲粮中添加枯草芽孢杆菌发现，血清TC和TG含量显著降低；查翘楚等（2017）在19周龄大午金凤蛋鸡上的研究证明，添加枯草芽孢杆菌能够降低血清胆固醇。本次试验结果表明，在87～93 w海兰褐蛋鸡饲粮添加枯草芽孢杆菌能够降低血清胆固醇含量，表明枯草芽孢杆菌能在维持脂质代谢方面发挥作用。

4 结论

在本试验条件下，87～93 w蛋鸡基础饲粮中添加枯草芽孢杆菌能显著提产蛋率、平均蛋重，明显改善蛋壳颜色和脂类代谢。综合考虑养殖生产、饲粮成本，在饲粮中添加0.2%枯草芽孢杆菌较为合适（活菌数为11×105CFU/g）。