气相色谱-三重四极杆质谱联用法测定果蔬汁中的甲拌磷

张 政，邰 亮，王 林，戚培培

（宝应县产品质量综合检验检测中心，江苏扬州 225800）

果蔬汁能为人体有效补充丰富的矿物质以及多种维生素，增加膳食纤维，增强人体细胞活力。但是，作为原材料的蔬菜瓜果，在种植过程中不可避免地会接触到各种农药，会对消费者健康产生威胁，引发潜在的食品安全问题[1]。甲拌磷[2]，化学名称O,O-二乙基-S-（乙硫基甲基）二硫代磷酸酯，是一种剧毒的有机化合物，广泛用于农业生产中。为保障农产品质量以及人身健康安全，探索出一种准确、高效的甲拌磷检测方法十分必要。

根据《食品安全国家标准 植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》（GB 23200.113—2018），气相色谱-三重四极杆质谱联用法在进行目标分析时具备出色的稳定性、高性能和灵敏度，以气相色谱-三重四极杆质谱联用法为基础建立甲拌磷的检测、评定分析方法，可以得到满意的结果[3]。

1 材料与方法

1.1 样品、试剂耗材和仪器

样品：果蔬汁，能力考核样品（大连中食提供）。

试剂耗材：乙腈（分析纯）；乙酸乙酯（色谱纯）；丙酮（分析纯）；萃取盐包（4 g硫酸镁+1 g氯化钠+1 g柠檬酸钠+0.5 g柠檬酸氢二纳）；15 mL净化管（885 mg硫酸镁+150 mg PSA+15 mg GCB）；陶瓷均质子和50 mL萃取管，其他实验室内常用玻璃仪器及耗材。

标准物质：甲拌磷标准溶液（100 μg·mL-1，证书编号BW900752-100-A，坛墨质检）；环氧七氯B标准溶液（100 μg·mL-1，证书编号CDAA-S-411017-MA，安谱）。

仪器：气相色谱-三重四极杆质谱联用仪（设备编号US2029U301，规格型号8890/7000D，安捷伦），配有电子轰击源（EI）；涡旋振荡器（规格型号MS digtal，IKA）；快速冷冻离心机（规格型号BIOFUGE，赛默飞）；十万分之一分析天平、水浴氮气吹干仪等实验室常见仪器。

1.2 实验方法

1.2.1 样品QuEChERS前处理

称取10 g果蔬汁能力验证的样品，放入塑料萃取管里面（50 mL），移液管移取乙腈10 mL加入，再向管内加入1份萃取盐包后盖上管盖，猛烈振荡后离心，离心机设定的速度为4 200 r·min-1，萃取管放入机器中5 min后取出。离心完毕后，吸取6 mL上清液加入15 mL净化管内，涡旋振荡器上涡旋混匀 1 min。萃取管再次放入机器5 min后取出。离心完毕后，吸取2 mL上清液加入10 mL试管中，置于水浴氮气吹干仪中，设定温度40 ℃条件下氮气吹至近干。加入20 μL的内标环氧七氯溶液，加入1 mL乙酸乙酯再次溶解，混匀后过有机相滤膜，待进样。另取试剂空白，除不加试料，其他均按上述步骤平行操作[4]。

1.2.2 标准溶液配制

环氧七氯B标准溶液（5 μg·mL-1）：准确称取环氧七氯B固体10 mg，利用10 mL的容量瓶，加入乙酸乙酯稀释成内标溶液（5 μg·mL-1）。

甲拌磷标准中间液（100 μg·mL-1）：准确移取甲拌磷标准储备液（1 000 μg·mL-1）1 mL于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容；甲拌磷标准溶液（10 μg·mL-1）：准确移取甲拌磷标准中间液（100 μg·mL-1）1 mL于1个10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容。

甲拌磷系列标准工作液：吸取甲拌磷标准溶液（10 μg·mL-1）5 μL、10 μL、20 μL、50 μL、100 μL于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容，配制成含甲拌磷浓度为0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1的标准工作溶液。

空白基质溶液氮吹至近干，加入20 μL内标液，分别加入1 mL甲拌磷系列标准工作液复溶，分别用一次性注射器过滤膜，配制成含有甲拌磷的基质混合标准工作溶液[5]，等待进入GC-MS测定。根据所测结果进行分析并绘制标准曲线，得到线性回归方程。

1.2.3 气相色谱-质谱条件设定

色 谱 柱：HP-5ms（15 m×0.250 mm，0.25 μm，产品序列号US0628013A）2根串联；色谱柱程序升温：柱温40 ℃（1 min，40 ℃·min-1）→120 ℃（0 min， 5 ℃·min-1）→240 ℃（0 min，12 ℃·min-1）→300 ℃（6 min）；载气：氦气浓度≥99.999%，气体色谱柱内流速1.0 mL·min-1；进样口：280 ℃；进样方式：不分流进样；进样量：1 μL；离子加速器：280 ℃；离子传输线：280 ℃；EI：70 eV；甲拌磷定量离子对260.0、75.0，碰撞电压5 V，定性离子对230.9、128.9，碰撞电压25 V；环氧七氯B定量离子对352.8、262.9，碰撞电压15 V，定性离子对354.8、264.9，碰撞电压15 V。

2 结果与分析

2.1 标曲线性、方法检出限和定量限

本次实验甲拌磷系列标准工作液为0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、 0.100 μg·mL-1，相关系数R2的值达到了0.999 9，线性良好，满足线性要求。线性图谱见图1。

图1 甲拌磷标准溶液线性曲线图

由信噪比计算公式S/N=3和S/N=10可分别得到方法的检出限和定量限。经过计算得出，当称样量为10.00 g，定容体积为1 mL时，该方法的检出限为0.001 9 mg·kg-1，定量限为0.010 0 mg·kg-1。

2.2 精密度与回收率平行实验结果

通过向果蔬汁空白样品中添加一定量的甲拌磷标准溶液，以此来计算本方法的回收率与精密度。添加体积分别为0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL的甲拌磷标准溶液（1 μg·mL-1），添加水平分别为0.05 μg、0.10 μg、0.20 μg，按照本方法前处理重复6次平行 实验，计算公式为

式中：P为回收率，%；C为测得试样中甲拌磷的含量，μg·mL-1；5为稀释倍数；V为检验样品定容体积，mL；C0为加入标液的浓度，μg·mL-1；V0为加入标液的体积，mL。

测得甲拌磷在添加水平为0.05～0.20 mg·kg-1时，平均回收率在82.7%～94.9%，标准偏差系数，即精密度在1.04%～1.43%。回收率的数值和精确度的数 值如表1所示。

表1 果蔬汁空白样品中甲拌磷的回收率和精密度实验结果（n=6）

3 结论

本实验建立了果蔬汁中甲拌磷测定的气相色谱-三重四极杆质谱联用检测方法。多次实验表明，本方法快速、高效、准确，对于果蔬汁试样中甲拌磷提取效果较好，标曲线性良好，定量限、检出限、相对标准偏差、回收率等技术指标均达到国家标准要求，满足对甲拌磷分析检测需要。