王光辉,徐 微,王姣姣,杨雨江,姜怀志
(1吉林农业大学教研基地管理处,长春 130118;2吉林农业大学动物科学技术学院,长春 130118)
吉林省是中国传统的细毛羊产区,肉羊产业起步于20世纪90年代末期,为适应肉羊产业的发展,在大规模从国内引入小尾寒羊的同时,吉林省1998年自国外引入黑头萨福克羊,发展极为迅速,目前,西部的10个县区已成为国家“中东部农牧交错肉羊优势产区”的重要组成部分,肉羊已成为畜牧业中的朝阳产业和农牧民增收致富的支柱型产业。中国是世界养羊大国和羊肉生产大国,肉羊养殖正由传统的养殖模式迅速向规模化、产业化转变[1],尤其是2018年培育出具有肉毛兼用特性的乾华肉用美利奴羊[2],不仅为吉林省也为周边省(自治区)的肉羊产业发展提供了种源保障,但优质肉羊品种仍较为缺乏,而且随着养羊业的快速发展,羊群数量迅速上升,养殖方式向集约化饲养转变,使得羊的免疫力下降,常引发一些疾病,其中传染性疾病对畜牧业的危害最大,统计表明,每年由此带来的经济损失是畜牧业总产值12%~15%[3]。因此,培养或选育优质的畜禽品种仍是当前畜牧业工作者的重点工作内容。
血液是为机体的各个组织器官输送营养物质,清除机体产生的代谢废物,保证机体的正常运转的结缔组织。动物血液的生理生化指标是反映机体的健康状态和代谢状况的标志物,血液生化指标可作为饮食对生理健康状况影响的临床指标,增加羊生产力在温带地区改善动物健康状况[4],早在20世纪80年代初就有关于可利用血液中的某些生理生化指标作为估测动物生产力依据的报道[5],为评价动物的生产性能、饲养管理及健康水平提供参考,在动物代谢过程中,谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶都是重要的调控酶,这些酶活性对诊断肝功能是否正常发育以及反映机体对钙、磷吸收及代谢程度也具有重要作用[6-9]。近年来,绵羊生化遗传多态性在绵羊遗传育种中的应用尤为广泛,血液蛋白和同工酶的多态性在绵羊的亲子鉴定、品种起源、分化及亲缘关系、生产性能等研究中起到相当大的作用[10]。Schillhom等[11]、Barowicz等[12]分别指出,具有血红蛋白HbBB、钾浓度的K型绵羊均表现出较强的繁殖性能,羔羊死亡率也低。2016年阮洪玲[13]的研究也发现乾华肉用美利奴羊血液生化指标与大多数体重体尺性状均呈较强的相关性。因此,检测绵羊的血液生理生化指标将对指导绵羊的高效生产具有重要的参考作用。本研究以在吉林省肉羊产业发展中发挥主导作用的小尾寒羊(地方品种)、黑头萨福克羊(引进品种,1998年自澳大利亚引入)、乾华肉用美利奴羊为研究对象,测定3个绵羊品种的血液生理生化指标并分析相应指标的品种间差异性,以期为3个绵羊品种的饲养管理、选育提高、疾病监测和环境适应性提供理论参考。
自吉林省乾安志华种羊繁育有限公司的羊核心群中选择1.5岁体质结实、健康的黑头萨福克羊、小尾寒羊和乾华肉用美利奴羊母羊各30只。
早饲前用一次性采血针于颈静脉采血8 mL,分别注入含有EDTA-K2抗凝剂和不加抗凝剂的真空采血管中各4 mL,由不加抗凝剂的血液中分离血清,将血清和血液置于-20℃保存,备用。
使用BC-30S型全自动动物血液分析仪(南京贝登医疗股份有限公司)和BK-1200型全自动生化分析仪(山东博科科学仪器有限公司)分别测定血常规指标和血清生化指标。
1.3.1 血常规指标 检测的血常规指标包括白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、淋巴细胞总数(LYM)、淋巴细胞比率(LYM%)、中间细胞(MID)、中间细胞比率(MID%)、中性粒细胞(GRAN)、中性粒细胞比率(GRAN%)、红细胞压积(HCT)、红细胞平均压积(MCV)、红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)、血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、血小板总数(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板分别密度(PDW)、血小板压积(PCT)和血小板大细胞比率(P-LCR)。
1.3.2 血清生化指标 检测的血清生化指标包括白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、总蛋白(TP)、尿素氮(BUN)、总胆红素(TBIL)、磷(PHOS)、血糖(GLU)、肌酐(CREA)、胆固醇(CHOL)、钙(Ca)、胰淀粉酶(AMYL)、谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALK)。
使用SPSS 22.0软件对实验数据进行统计分析和t检验。
小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血液常规指标测定结果见表1。3个绵羊品种的血液常规指标具有品种间差异性,在3个绵羊品种中乾华肉用美利奴羊的MID%、GRAN、GRAN%、RBC、HCT、MCH、MCHC、PLT、PDW、PCT指标值最高,黑头萨福克羊次之,小尾寒羊最低,并存在品种间显著差异性(P<0.05);小尾寒羊的WBC指标值最高,乾华肉用美利奴羊次之,黑头萨福克最低,并存品种间差异显著(P<0.05);小尾寒羊的血液LYM指标值显著高于其他2个品种;在黑头萨福克羊的血液中MID、HGB、MCV指标值显著高于乾华肉用美利奴羊(P<0.05),小尾寒羊血液中的含量显著低于乾华肉用美利奴羊(P<0.05)。而RDW-SD、RDW-CV、MPV、P-LCR指标值在3个绵羊品种间的差异不显著(P>0.05)
表1 不同品种肉羊的血液生理指标
小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血清生化指标测定结果见表2。3个绵羊品种的血清生化指标均在正常值范围内,说明3个绵羊品种的机体生理机能正常。3个绵羊品种的血液ALB、TP、TBIL、PHOS、GLU、CREA、GLOB等7个指标值由高到低均呈现为乾华肉用美利奴羊>黑头萨福克羊>小尾寒羊(P>0.05);BUN的指标值为黑头萨福克羊最高,乾华肉用美利奴羊次之,小尾寒羊最低(P<0.05);CHOL的指标值为小尾寒羊最高,黑头萨福克羊次之,乾华肉用美利奴羊最低(P<0.05);AMYL的指标值为黑头萨福克羊最高,乾华肉用美利奴羊次之,小尾寒羊最低(P<0.05);ALT的指标值为乾华肉用美利奴羊显著高于小尾寒羊,后者显著高于黑头萨福克羊(P<0.05);ALK的指标值为黑头萨福克羊最高,而乾华肉用美利奴羊显著高于小尾寒羊(P<0.05)。小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血清总蛋白分别为72.21、73.33 g/L和75.22 g/L,尿素氮含量分别为186.14、206.13 mg/L和198.14 mg/L,可见专门化的肉用绵羊品种特别是培育品种的肝脏代谢能力和蛋白质转化利用能力要优于小尾寒羊,但从尿素氮含量来看,乾华肉用美利奴羊的蛋白质转化能力要弱于黑头萨福克羊,这可能与该品种的生产方向为肉毛兼用有关。
表2 不同品种肉羊的血清生化指标
检测血液中的白细胞、红细胞和血小板的数量及其形态分布能够判断动物机体是否处于正常的生理水平[14],特别是白细胞数可以反映出机体的免疫防御、保护功能状态,是机体生理状态的直接反映者;机体存在炎症、应激反应及母羊妊娠期时,白细胞数下降,标志着机体对疾病的抵抗能力下降[15]。国内在绵羊新品种培育和地方品种种选育中均将血液生理指标尤其是红细胞、白细胞和血小板的检测值作为品种的种质特性基本参数。周明亮等[16]在对白头萨福克羊、白一藏羊和藏绵羊的血液生理指标研究中发现,白一藏羊(白头萨福羊与藏绵羊的杂交F1代)的血液生理指标值在白头萨福克羊和藏绵羊之间或接近于藏绵羊。邢巍婷等[17]发现在同为西藏高原环境条件下培育的象雄半细毛羊和彭波半细毛羊的血液生理指标具有一定的差异性,据此推测红细胞和白细胞指标可以反映出高海拔低氧适应性和运动剧烈程度。宋德荣等[18]对贵州半细毛羊的血液生理指标检测后发现,绵羊的血液中的白细胞等生理指标具有年龄差异性。
王大愚等[19]比较了同为国外引入品种的特克塞尔羊和白萨福克羊在一年四季的血液生理指标,发现白头萨福克羊的公、母羊四季中的红细胞数均高于特克塞尔羊,但白细胞数则低于特克塞尔羊;白萨福克羊春冬季和秋季的公羊血红蛋白低于特克塞尔羊,夏季则高于特克塞尔羊;而白萨福克羊的母羊血红蛋白则在各个季节中均高于特克塞尔羊,表明血液生理指标具有明显的差异性。在本研究中发现白细胞、红细胞、淋巴细胞、中性粒细胞等主要血液生理指标在小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊3个绵羊品种间均具有显著差异性(P<0.05)。小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的红细胞数分别为4.85×101(2/个/L)、5.76×1012个/L和6.54×1012(/个/L)高于贵州半细毛羊,但均低于白萨福克羊的9.92×1012(/个/L)、白一藏羊的10.46×1012(/个/L)[16]、藏绵羊的10.43×1012(/个/L)[16]、象雄半细毛羊的6.76×1012(/个/L)[17]、彭波半细毛羊的11.45×101(2/个/L)[17]、河南大尾寒羊的11.10×101(2/个/L)[20]、青海半细毛羊的10.5×1012(/个/L)[21]、科尔沁细毛羊的10.8×1012(/个/L)[22]、无角陶塞特羊的11.2×1012(/个/L)[23]和蒙古羊的9.54×1012(/个/L)[23]。推测可能与本研究所涉及的3个绵羊品种所生活的环境是低海拔地区及年龄较小和性别为母羊等因素有关。而另一项重要的血液生理指标白细胞数,小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的白细胞数分别为38.85×109、36.47×109(/个/L)和37.42×109(/个/L),则明显低于象雄半细毛羊的102.36×109(/个/L)、秋季和冬季的白萨福克羊的95.04×109(/个/L)和144.53×109(/个/L)白一藏羊的86.41×109(/个/L)和119.56/×10(9个/L)、藏绵羊的70.85×109(/个/L)和80.23×109(/个/L),但均高于春季和夏季的白萨福克羊的6.47×10(9/个/L)和5.67×10(9/个/L)、白一藏羊的6.22×109(/个/L)和5.96×109(/个/L)、藏绵羊的6.03×109(/个/L)和5.66×109(/个/L),与12月龄和36月龄的贵州半细毛羊相接近38.91×109(/个/L)和35.43×109(/个/L)[16]。由此可见,吉林省的3个代表性品种中小尾寒羊虽然原产地是中国山东省,萨福克羊引自于澳大利亚,但均已在吉林省饲养超过20年的时间,而乾华肉用美利奴羊则是吉林省用13年的时间培育出的品种,因此3个绵羊品种对东北农牧交错区的自然环境条件均表现出了良好的适应性能,特别是乾华肉用美利奴羊的主要血液生理指标要优于另2个品种,推测这可能是该品种具有抗病性能较强的生理基础。
机体的血清生化指标与机体的代谢免疫密切相关,可反映出机体的新陈代谢状况、体内外环境平衡状况和机体的生长发育状况,也是机体生产性能的内在体现[24]。正常的生化指标,既能反映出绵羊的体内实质与体外性能之间的关系,也能反映出绵羊的品种、性别、年龄和外界环境、生理状态的差异性[25]。国内通过对藏区绵羊的不同品种绵羊血液生化指标的研究发现,白一藏羊的血液生化指标处于白萨福克羊和藏羊之间或接近母藏羊,表明其在高原气候环境和饲养条件下适应性比纯种白萨福克羊更强,趋向于母本藏绵羊,为培育高原肉羊新品种提供了理论依据。象雄半细毛羊的总蛋白、胆固醇含量极显著高于彭波半细毛羊,肌酐含量则显著高于彭波半细毛羊,碱性磷酸酶、丙氨酸转移酶和谷氨酰胺转移酶的活性则显著低于彭波半细毛羊,该研究结果表明,血液生化指标可以反映出环境差异所引发的机体的正常代谢水平的差异性。本研究发现,小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血清生化指标间均存在显著差异(P<0.05),与国内的相关研究报道中血清生化指标具有品种差异性的研究结果相一致。
血清中的谷丙转氨酶是肝脏机能的主要诊断指标;碱性磷酸酶与骨骼生长密切相关,是评价骨骼生长与发育程度的指标[25]。本研究中的小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血清中谷丙转氨酶含量分别为11.45、9.41 U/L和15.45 U/L均与特克塞尔羊和白萨福克羊相接近;而3个绵羊品种的血清碱性磷酸酶含量则分别为201.22、218.21 U/L和215.05 U/L,均高于特克塞尔羊和白萨福克羊和贵州半细毛羊。表明3个绵羊品种不仅具有良好的生长发育性能而且专门化品种的生长发育性能更为突出。在本研究中发现同龄的小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血清中肌酐含量分别为4.52、5.57 mg/L和8.16 mg/L,均在绵羊的正常值范围内,相互间存在着极显著的差异性,由此可以看出,专门化的肉用绵羊品种黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血清肌酐含量显著高于非专门化肉羊绵羊品种小尾寒羊,尤其是自主培育的乾华肉用美利奴羊更高,为乾华肉用美利奴羊的高产肉性能提供了依据。球蛋白是机体内的抗体,其水平高低与机体的免疫能力和抗病力密切相关,同龄的小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血清中球蛋白含量分别为33.35、38.22 g/L和40.21 g/L,均高于贵州半细毛羊、多浪羊[26]、藏区绵羊,表明东北地区的免疫品种抗病能力较强,同时也反应出自主培育的乾华肉用美利奴羊的抗病能力更优于其他品种。
(1)吉林省自主培育的乾华肉用美利奴羊的中中间细胞(MID)、中性粒细胞比率(GRAN%)、红细胞数(RBC)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、血小板总数(PLT)、血小板分别密度(PDW)、血小板压积(PCT)指标及白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、总胆红素(TBIL)、球蛋白(GLOB)、肌酐(CREA)、谷丙转氨酶(ALT)等血液生理生化均高于黑头萨福克羊和小尾寒羊;但白细胞数(WBC)、巴细胞比率(LYM%)、胆固醇(CHOL)的血液生理生化指标则是小尾寒羊高于其他2个品种;中间细胞比率(MID%)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞平均压积(MCV)、胰淀粉酶(AMYL)、碱性磷酸酶(ALK)等血液生理生化指标值则以黑头萨福克羊为最高;表明自主培育品种的适应性和抗病能力优于国外和省外引入品种。
(2)小尾寒羊、黑头萨福克羊和乾华肉用美利奴羊的血清总蛋白分别为72.21、73.33 g/L和75.22 g/L,尿素氮含量分别为186.14、206.13 mg/L和198.14 mg/L,可见专门化的肉用绵羊品种特别是培育品种的肝脏代谢能力和蛋白质转化利用能力要优于小尾寒羊,但从尿素氮含量来看,乾华肉用美利奴羊的蛋白质转化能力要弱于黑头萨福克羊,这可能与该品种的生产方向为肉毛兼用有关。