大鳞副泥鳅皮肤抗氧化酶活性的昼夜节律研究

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用大鳞副泥鳅购买于沈阳市浑南区泥鳅养殖池塘，运回沈阳农业大学水产养殖实验室进行暂养。抗氧化酶活性试剂盒购买于南京建成生物工程研究所。

1.2 试验设计

试验开始前在养殖缸(300L)内加入高锰酸钾消毒，排净后加入100L水，曝气24hrs。选取300尾(5g±0.3g)体质健康的大鳞副泥鳅，分别放入三个养殖桶中，每桶100尾，室内自然光照条件下暂养10d，水温16±0.5℃。暂养期间8:00时和17:00时各投喂1次，投喂量为总质量的1%，投喂1h后换水25%。取样前2d停止投喂。

1.3 测定指标及方法

在24hrs内每4hrs取样一次(00: 00时，04: 00时，08: 00时，12: 00时，16: 00时和20: 00时)，每次取样每个养殖桶随机取2尾，解剖后取皮肤组织，保存于-20℃冰箱待测。主要检测皮肤组织中总抗氧化能力(T-AOC)、SOD、GST、GSH-Px、MDA和CAT。实验严格按照试剂盒说明进行操作。

1.4 数据处理

所有数据均采用SPSS26.0软件进行单因素方差分析(One Way ANOVA)，所有分析的显著性水平设定为P<0.05，数据表示为平均值±标准误差。所有图像均在Microsoft Excel中以散点图的形式生成。

2 结果

结果显示，大鳞副泥鳅的抗氧化酶活性呈现明显的昼夜节律。其中T-SOD和GSH-Px在04: 00时出现峰值，显著高于谷值(P<0.05)。GST和T-AOC在00: 00出现峰值，CAT在08: 00时出现峰值，显著高于谷值(P<0.05)。同时，MDA的峰值出现在12: 00时，谷值出现在04: 00时，差异性显著(P<0.05)。

注：每个时间点代表平均值±标准差(n=5)。白色和黑色条分别表示白天和黑夜。NOTE：Each time point represents mean ±S.E.M. (n=5). White and black bars indicate day and night.图1 皮肤组织抗氧化酶活性的昼夜节律Figure 1. Circadian rhythm of antioxidant enzyme activity in skin

3 讨论与分析

水生生物通过内部昼夜节律和外部环境周期的同步变化，调节内分泌和代谢水平，从而适应环境生存。皮肤作为大鳞副泥鳅防御体系的第一道屏障，在抗氧化防御体系中发挥着重要作用。在夜间，大鳞副泥鳅的各种抗氧化酶活性均有提高，说明其在夜晚具有更高的抗氧化能力。众所周知，光照是产生昼夜节律的重要因素。有报道指出，光照与鱼类的生长和生理状态密切相关，如增重率、生长率和抗氧化状态[5-6]，这与该试验结果一致。此外，MDA在机体内的含量过高会产生中毒反应，甚至死亡。该试验中，皮肤MDA含量在光照后迅速升高，12:00时出现峰值。据此推测，这与物种的生活习性相关。大鳞副泥鳅生活在水体的底层，夜间是其活动的高峰期，而长时间暴露在明亮环境中会造成不必要的生理压力，从而导致抗氧化酶活性降低。相类似的结果也在牛蛙和小龙虾研究中有过报道[7-8]。

4 结论

该研究证实了大鳞副泥鳅皮肤组织的抗氧化酶活存在明显昼夜节律变化，相比之下，夜间抗氧化能力显著高于白天。后续研究会对大鳞副泥鳅皮肤抗氧化酶的周年节律变化进行测定，进一步阐释其节律变化情况。综上所述，该研究结果丰富了大鳞副泥鳅的基础生理学数据，也对未来的养殖生产实践提供理论依据。