黄芪桂枝汤对反复呼吸道感染患儿Th1/Th2平衡及血清miR－155、miR－146a的影响

石海莎，张娟，崔艳平

（河南省直第三人民医院，河南 郑州 450000）

反复呼吸道感染（recurrent respiratory tract infection，RRTI）为临床常见急性炎症，包括上呼吸道感染和下呼吸道感染两种类型［1］。目前临床对于该病常采用抗病毒治疗，如利巴韦林等，但经临床实践发现，其疗效欠佳，仅能暂时控制病情发展，并不能根治。另外，长时间服用此类药物还可能会引发包括腹胀、恶心、呕吐、食欲下降在内的消化道和肝肾功能损伤等不良反应，因此临床上不建议长期服用［2−3］。中医学认为，RRTI的发生与肺、脾、肾俱虚具有一定关系，故在其治疗中建议调补三脏。黄芪桂枝汤是在《金匮要略》桂枝加黄芪汤的基础上化裁而来，具有调和营卫、行阳散邪之功，可从根本上改善小儿偏颇体质，达到治愈目的。据此，笔者选取67例反复呼吸道感染患儿作为研究对象，旨在探讨黄芪桂枝汤对RRTI 患儿Th1/Th2 平衡及血清miR－155、miR－146a的影响。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2019 年5 月—2021 年12 月收治的67 例反复呼吸道感染患儿作为研究对象，按照随机数字表随机分为对照组33例与观察组34例。本研究符合《赫尔辛基宣言》的伦理审查。观察组中男18例，女16例；年龄（7.21 ± 1.45）岁；病程（3.52 ± 1.05）年；年感染次数（7.52±1.45）次；呼吸道感染部位：上呼吸道19 例，下呼吸道15例。对照组中男16例，女17例；年龄（7.28±1.36）岁；病程（3.47 ± 1.01）岁；年感染次数（7.44 ±1.38）次；感染部位：上呼吸道17 例，下呼吸道16 例。两组患儿性别、年龄、病程、年感染次数及感染部位等资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经河南省直第三人民医院医学伦理委员会审核并批准，批准号：2022－SZSYKY－012。

1.2 诊断标准

1.2.1 中医诊断标准

符合《中医病证诊断疗效标准》［4］中关于痰湿蕴肺型喘证的诊断标准。症见胸闷咳喘、咯痰量多、倦怠乏力、腹胀纳呆，舌质淡胖，脉弦滑。

1.2.2 西医诊断标准

符合《反复呼吸道感染的临床概念和处理原则》［5］中RRTI 的诊断标准。年龄<2 岁者，上呼吸道感染次数≥7 次/年或下呼吸道感染次数≥3 次/年；年龄3～6 岁者，上呼吸道感染次数≥6 次/年或下呼吸道感染次数≥2 次/年；年龄>6 岁者，上呼吸道感染次数≥5次/年或下呼吸道感染次数≥2次/年。

1.3 纳入标准

①经临床确诊为RRTI，属非急性感染期；②年龄2～12 岁；③病程≥1 年；④对本次治疗药物无禁忌证和过敏者。

1.4 排除标准

①合并肺结核等其他呼吸系统疾病；②患有先天性呼吸道畸形等疾病；③患有严重心功能不全的患儿。

1.5 治疗方法

对照组予以常规治疗，如化痰、止咳、补液、降温等，同时指导患儿口服利巴韦林和维生素D。利巴韦林（云南白药集团股份有限公司，国药准字H53021254）50 mg/次口服，每日1 次，持续治疗7 d；维生素D［国药控股星鲨制药（厦门）有限公司，国药准字H35021450］1 粒/次口服，每日2 次，服用3 个月，随访6个月。

观察组在对照组治疗的基础上予以黄芪桂枝汤。组方：黄芪15 g，桂枝9 g，白芍9 g，党参10 g，浮小麦10 g，桑白皮10 g，白术6 g，防风6 g，陈皮6 g，甘草3 g。喘息严重者加葶苈子10 g，地龙10 g；发热者加金银花15 g，柴胡10 g，连翘10 g；咳嗽严重者加防风10 g，苏叶10 g；痰稠色黄者加黄芩10 g，鱼腥草15 g。所有药物均来自河南省直第三人民医院药房，每日1剂，水煎取汁200 mL，分早、晚餐后1 h服用，治疗3个月，随访6个月。

1.6 临床疗效判定标准

参考《中药新药临床研究指导原则（试行）》［6］评估疗效。显效：中医证候积分较治疗前下降>80%，湿啰音消失，体温和血象恢复正常，且半年内未再次患有呼吸道感染；有效：中医证候积分较治疗前下降≥30%，<80%，湿啰音消失，经X 线检查肺部病灶未完全吸收，且半年内发生呼吸道感染次数≤3 次；无效：未达到上述改善标准。

1.7 观察指标

1.7.1 中医症状积分

于治疗前和治疗后评估，评估内容包括胸闷咳喘、咯痰量多、倦怠乏力、腹胀纳呆等临床症状，按照无、轻度、中度、重度分别计0、1、2、3分。

1.7.2 实验室指标

于治疗前和治疗后采集患儿晨起静脉血5 mL，2 500 r/min 离心12 min，取上清液，采用流式细胞仪测定Th1、Th2 细胞水平，计算Th1/Th2 比值；采用荧光定量PCR 测定血清miR－155、miR－146a 表达；采用ELISA 法测定白细胞介素－4（interleukin－4，IL－4）、白细胞介素－10（interleukin－10，IL－10）、白细胞介素－12（interleukin－12，IL－12）水平。

1.8 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件分析，符合正态分布的计量资料用表示，组间比较进行独立样本t检验；计数资料以［例（%）］表示，进行χ2/Z检验；P<0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患儿临床疗效比较

观察组总有效率94.12%，高于对照组总有效率72.73%，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 两组患儿临床疗效比较［例（%）］

2.2 两组患儿治疗前后中医症状积分比较

治疗前，两组患儿胸闷咳喘、咯痰量多、倦怠乏力、腹胀纳呆等中医症状积分比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组患儿胸闷咳喘、咯痰量多、倦怠乏力、腹胀纳呆等中医症状积分均较治疗前下降（P<0.05），且观察组患儿上述中医症状积分明显低于对照组（P<0.05）。见表2。

表2 两组患儿治疗前后中医症状积分比较（）

表2 两组患儿治疗前后中医症状积分比较（）

注：与对照组治疗后比较，*P<0.05。

2.3 两组患儿治疗前后Th细胞亚群水平比较

治疗前，两组患儿Th1、Th2细胞水平及Th1/Th2比值比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组患儿Th1 细胞水平高于治疗前，而Th2 细胞水平、Th1/Th2 比值低于治疗前（P<0.05），且观察组患儿的Th1细胞水平高于对照组，Th2细胞水平和Th1/Th2比值低于对照组（P<0.05）。见表3。

表3 两组患儿治疗前后Th细胞亚群比较（）

表3 两组患儿治疗前后Th细胞亚群比较（）

注：与对照组治疗后比较，*P<0.05。

2.4 两组患儿治疗前后血清miR－155、miR－146a水平比较

治疗前，两组患儿miR－155、miR－146a 水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组患儿miR－155、miR－146a 水平高于治疗前（P<0.05），且观察组患儿的miR－155、miR－146a 水平高于对照组（P<0.05）。见表4。

表4 两组患儿治疗前后血清miR－155、miR－146a水平比较（）

表4 两组患儿治疗前后血清miR－155、miR－146a水平比较（）

注：与对照组治疗后比较，*P<0.05。

2.5 两组患儿治疗前后炎性因子水平比较

治疗前，两组患儿IL－4、IL－10、IL－12 水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组患儿IL－4、IL－10、IL－12 水平均较治疗前降低（P<0.05），且观察组患儿的IL－4、IL－10、IL－12水平低于对照组（P<0.05）。见表5。

表5 两组患儿治疗前后炎性因子水平比较（）

表5 两组患儿治疗前后炎性因子水平比较（）

注：与对照组治疗后比较，*P<0.05。

3 讨论

经流行病学调查，呼吸道感染发生率约占儿科门诊的80.00%，其中约有30.00%的患儿属RRTI［7］。目前临床上对于该病发病原因尚未完全阐明，通常认为儿童RRTI 的出现可能与免疫缺陷、微量元素缺乏、喂养方式不当、环境因素等有关。该病具有病程迁延难愈等特征，极易并发肺炎、哮喘等疾病，因此早期实施有效治疗十分重要。现阶段，临床常采用化痰、止咳、补液、降温、抗病毒等常规治疗，虽然能在一定程度上减轻临床症状，但根治困难，极易复发感染。故需探寻新的治疗方法［8−9］。

RRTI属“喘证”范畴，与营卫失和或虚弱、肺脾肾不足密切相关［10］。当肺脾肾虚损、正气不足时，则会进一步减弱御邪能力，加之小儿身体机能尚未发育成熟，在外邪侵扰后常往复不已，以致卫外不固、寒温不调，累及肺脏，使病程缠绵难愈［11−12］，故而笔者认为该病治疗应从增强小儿自身免疫力入手。黄芪桂枝汤具有调和营卫、扶正祛邪之功效［13］，如方中黄芪，《本经逢原》言其能补五脏俱虚，入少阳，主升发，可补营卫之气；桂枝，《本草汇言》称其为发汗解表之药也，具有温通经脉、发汗解肌之功效；白芍具有益阴和营之效；党参益气健脾、生津止咳；浮小麦，《本草纲目》言其入心经、脾经和肾经，具有固表止汗、益气、除热之效；桑白皮泻肺平喘、消炎抗菌；白术健脾，《药鉴》言其对内补脾肺之气，对外固表止汗；防风属解表之药，具有祛风、抗菌的作用；陈皮健脾、燥湿、化痰；甘草补脾益气、润肺止咳。诸药配伍，可扶正培本，并通过调和阴阳，实现标本同治的目标。

研究认为，Th1/Th2 免疫失衡是造成病毒入侵，诱发RRTI 发生的重要原因［14］。如Th1细胞通过分泌IFN－γ、TNF－α 等因子参与细胞免疫应答；而Th2 细胞通过分泌IL－6、IL－8等细胞因子，参与体液免疫及变态反应性疾病［15］。在正常情况下，Th1/Th2处于动态平衡状态，维持机体正常的细胞和体液免疫功能，但当二者失衡，则会引起免疫功能紊乱，并提示机体遭受异己抗原攻击［16］。另外，在病毒入侵时，机体为对抗感染可启动Th1介导的免疫反应，通过释放淋巴因子、巨噬细胞及杀伤性T 细胞，协同发挥免疫功能。但免疫系统长时间全负荷运转，对抗病毒入侵的能力会有所下降，进而打破Th1/Th2 平衡［17］。本研究法发现，反复呼吸道感染患儿的Th1细胞分泌明显下降，Th2细胞分泌及Th1/Th2 比值异常升高。miR 是一种内源性非编码小RNA，miR－146a 为miR－146 亚型，主要存在于T 细胞、B 细胞、单核细胞中，具有调节激活炎性因子与转录因子等作用；而miR－155 为多功能miRNA，能通过调节机体炎症反应、免疫反应而参与多种疾病的发生和发展。在本研究结果中可见，两组患儿治疗前的血清miR－155、miR－146a 表达呈下降趋势，这与杜赢等［18］的研究结果“RRTI 患儿miR－155、miR－146a 相对表达水平低于健康儿童”基本一致。究其原因，可能是受免疫系统失衡的影响所致。现代药理学研究指出，黄芪具有增强免疫力和抗菌作用；桂枝具有抗炎、抗病毒作用；白芍具有抗炎，抑菌效果；党参具有增加免疫功能作用。结果观察组的Th1 细胞、miR－155、miR－146a 表达高于对照组，而Th2 细胞分泌、Th1/Th2 比值及IL－4、IL－10、IL－12 低于对照组，提示黄芪桂枝汤有利于改善免疫功能和减轻炎性反应。

综上所述，黄芪桂枝汤治疗反复呼吸道感染效果显著，可通过调节Th1/Th2 平衡及血清miR－155、miR－146a表达，改善患儿临床症状。