南宁市反复呼吸道感染患儿血清25-羟基维生素D3水平及其与免疫功能的相关性分析▲

蓝祥悦 李东明 杨晓祥

广西壮族自治区妇幼保健院(1 检验科，2 呼吸内科)，南宁市 530012

反复呼吸道感染指在1年内上、下呼吸道感染发生次数超过正常范围，是儿科常见的呼吸系统疾病，且有重症化和迁延性倾向，严重影响患儿的生长发育和身心健康，给患儿家庭和社会带来沉重的负担[1]。反复呼吸道感染患儿数量约占呼吸道感染患儿总数的30%，且其发病率呈逐年上升趋势[2]。反复呼吸道感染病因复杂，包括病原微生物感染和维生素D缺乏等[3-6]，其中25-羟基维生素D3缺乏可引起机体免疫力降低，易导致反复呼吸道感染的发生[5-6]。目前未见南宁市儿童25-羟基维生素D3水平与反复呼吸道感染、免疫功能相关性的大样本量研究。本研究分析反复呼吸道感染患儿的血清25-羟基维生素D3水平和免疫功能指标水平，旨在为反复呼吸道感染患儿的临床治疗和预防提供参考资料，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择2018年1月至2021年12月在广西壮族自治区妇幼保健院就诊并确诊为反复呼吸道感染的患儿348例为研究对象，并将其纳入疾病组。纳入标准：年龄3～15岁，诊断符合反复呼吸道感染标准[1]。排除标准：有肺部、心脏等器官先天畸形者，入组前6个月内有补充维生素D者。其中男童217例，女童131例；中位年龄4(1，10)岁。另选同期在我院进行体检的126名健康儿童作为对照组。其中男童95名，女童31名；中位年龄4(1，11)岁。 两组研究对象的性别、年龄差异均无统计学意义(均P<0.05)，具有可比性。本研究研究对象的家属均签署研究知情同意书，且本研究经我院医学伦理委员会审查批准。

1.2 方法 疾病组患儿在入院后当天或次日采集空腹外周静脉血3 mL并置于真空干燥管，对照组在体检时采集空腹外周静脉血3 mL并置于真空干燥管，采用湖南湘仪Cence CKT120全自动脱盖离心机3 000 r/min离心10 min，取血清。应用美国罗氏公司Cobas e601全自动化学发光分析仪采用化学发光法检测血清25-羟基维生素D3水平，应用美国罗氏公司Cobas c702全自动生化分析仪器采用免疫比浊法检测血清免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)A、IgG和IgM水平，试剂均为仪器配套。疾病组在入院后当天或次日采集空腹外周静脉血2 mL于乙二胺四乙酸(ethylenediamin etetraacetic acid, EDTA)抗凝管，对照组在体检时采集空腹外周静脉血2 mL于EDTA抗凝管，轻轻混匀后，采用美国贝克曼库尔特公司CYTOMICS FC500型流式细胞分析仪检测外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+水平，试剂均为仪器配套试剂。

1.3 血清25-羟基维生素D3分级标准 血清25-羟基维生素D3分级标准参考文献[7]：<50 nmol/L为缺乏，≥50 nmol/L且<75 nmol/L为不足，≥75 nmol/L且<375 nmol/L为正常，≥375 nmol/L为中毒。

1.4 统计学处理 应用SPSS 25.0统计软件进行数据分析。计量资料采用(x±s)表示，组间比较采用两独立样本t检验；计数资料以例数和百分数表示，组间比较采用χ2检验；采用Spearman相关性分析探究反复呼吸道感染患儿血清25-羟基维生素D3水平与免疫功能指标的相关性。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组儿童血清25-羟基维生素D3水平及其缺乏情况的比较 疾病组血清25-羟基维生素D3水平及其正常率均低于对照组，25-羟基维生素D3缺乏率高于对照组(均P<0.05)。见表1。

表1 两组儿童血清25-羟基维生素D3水平及其缺乏情况的比较

2.2 两组儿童免疫功能指标水平的比较 疾病组外周血细胞免疫功能指标(CD3+水平、CD4+水平、CD4+/CD8+比值)和血清体液免疫指标(IgA、IgG、IgM水平)均低于对照组(均P<0.05)，两组间外周血CD8+水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 两组儿童免疫功能指标水平的比较 (x±s)

2.3 疾病组血清25-羟基维生素D3正常和缺乏患儿免疫功能指标的比较和患儿血清25-羟基维生素D3水平与免疫功能指标的相关性 疾病组中25-羟基维生素D3缺乏患儿外周血CD3+、CD4+水平，以及CD4+/CD8+比值和血清IgA、IgG、IgM水平均低于25-羟基维生素D3正常患儿 (均P<0.05)；而两组间外周血CD8+水平差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 疾病组血清25-羟基维生素D3正常和缺乏患儿免疫功能指标的比较 (x±s)

疾病组患儿血清25-羟基维生素D3水平与外周血CD3+、CD4+水平和血清IgA、IgG水平均呈正相关(均P<0.05)，与外周血CD8+水平、CD4+/CD8+比值，血清IgM水平均无相关性(均P>0.05)。见表4。

表4 疾病组患儿血清25-羟基维生素D3水平与免疫功能指标的相关性

3 讨 论

25-羟基维生素D3是维生素D在机体内的主要形式，半衰期更长，其血清浓度相对稳定，可反映个体的维生素D状况[8]。有研究结果显示，机体25-羟基维生素D3浓度降低可增加呼吸道感染易感性[9-10]。本研究结果显示，南宁市反复呼吸道感染患儿血清25-羟基维生素D3缺乏率为40.52%，低于上海市的50.4%[11]，但是高于驻马店市的8%[12]和重庆市的14.7%[13]，南宁市反复呼吸道感染患儿血清25-羟基维生素D3水平仅(59.06±17.76)nmol/L，低于上述地区水平，但高于宋思尊等[14]报告宜宾市反复呼吸道感染患儿的(37.52±4.31)nmol/L。这可能与生活环境、生活方式和研究对象的年龄、疾病严重程度等有关[15]。本研究结果显示，疾病组25-羟基维生素D3缺乏率高于对照组，血清25-羟基维生素D3水平低于对照组，与国内外研究报告[10-13]一致，这表明机体血清25-羟基维生素D3水平降低可能与反复呼吸道感染有关。

25-羟基维生素D3在机体维持钙稳态中发挥重要作用，有助于维持骨骼健康，调节非特异性和获得性免疫反应[8]。本研究发现，反复呼吸道感染患儿外周血细胞免疫指标CD3+、CD4+水平与CD4+/CD8+比值和血清体液免疫指标IgA、IgG、IgM水平均低于健康儿童，与国内的一些研究结果[14,16]相似，提示反复呼吸道感染可引起机体细胞、体液免疫功能指标水平改变。对疾病组血清25-羟基维生素D3正常与缺乏患儿免疫功能指标进行分析发现，25-羟基维生素D3缺乏的患儿外周血CD3+、CD4+水平和CD4+/CD8+比值，以及血清IgA、IgG、IgM水平均低于25-羟基维生素D3正常患儿，差异均有统计学意义，而外周血CD8+水平高于25-羟基维生素D3正常患儿，但差异无统计学意义，且Spearman相关性分析结果显示，疾病组血清25-羟基维生素D3水平与外周血CD3+、CD4+水平和血清IgA、IgG水平均呈正相关，与宋思尊等[14]、刘霞等[16]报告的一致，提示反复呼吸道感染患儿的25-羟基维生素D3缺乏，且其水平与免疫功能指标改变密切相关。其原因可能是，25-羟基维生素D3可通过诱导抗菌肽合成和调节T细胞反应和细胞因子水平影响机体免疫系统[17-18]，故补充维生素D或有助于增强机体免疫功能[19-20]。

综上所述，南宁市反复呼吸道感染患儿的25-羟基维生素D3缺乏率较高，血清25-羟基维生素D3水平降低与儿童反复呼吸道感染的发生密切相关；患儿血清25-羟基维生素D3水平与细胞免疫指标外周血CD3+、CD4+水平和体液免疫指标血清IgA、IgG水平呈正相关。因此，有必要了解反复呼吸道感染患儿血清25-羟基维生素D3水平，并针对性地给予补充以提高机体免疫力并减少反复呼吸道感染的发生。同时应重视南宁市儿童饮食搭配，合理膳食，适当补充维生素D，增强机体免疫功能，以有效地减少呼吸感染等疾病的发生。