GC法测定2-噻吩乙醇有关物质

葛李薇，兰公剑，田晶

GC法测定2-噻吩乙醇有关物质

葛李薇，兰公剑，田晶

（南京正大天晴制药有限公司， 江苏 南京 210046）

目的：建立气相色谱法测定2-噻吩乙醇有关物质的分析方法。方法：采用DB-624毛细管色谱柱；氢火焰离子化检测器；柱温为程序升温；进样口温度为260 ℃；检测器温度为300 ℃；流速为每分钟2.4 mL。结果：各杂质及主峰与相邻杂质分离良好；各已知杂质在限度质量分数20%～200%范围内线性关系良好，≥0.990，各已知杂质的回收率在95.0%～117.6%范围内，RSD均小于5.0%（=9）；溶液在16 h内稳定；精密度和重复性RSD均小于5.0%。结论：方法精密度好、准确度高，可用于本品的有关物质检测。

2-噻吩乙醇；有关物质；气相色谱法（GC）

噻吩并吡啶是一种有效的血小板聚合抑制剂和抗血栓药物，常见的药物有氯吡格雷、普拉格雷、噻氯吡啶等。噻吩并吡啶类药物在临床已应用多年，疗效显著，目前关于其与其他药物联合应用于脑梗死、急性心肌梗死等的研究较多，具有广阔的应用前景[1-2]。2-噻吩乙醇是合成噻吩并吡啶药物的主要中间体[3-8]，文献报道了2-噻吩乙醇的合成工艺[9-11]。作为关键中间体，2-噻吩乙醇的质控尤为重要，其有关物质相关研究少见文献报道[12-13]，亟需建立一种检测方法对其有关物质进行控制。

国内2-噻吩乙醇的主要合成路线是以噻吩为原料，先经溴化制得2-溴噻吩，再经格氏反应后，直接通环氧乙烷，然后经酸性水解得到[10]。故2-噻吩乙醇中可能残留未反应完全的原料噻吩、中间体2-溴噻吩，以及反应副产物3-溴噻吩、2,5-二溴噻吩、3-噻吩乙醇，本文拟建立一种气相色谱法方法，可以快速检测2-噻吩乙醇的有关物质，用于2-噻吩乙醇的质量控制。

1 实验部分

1.1 仪器

岛津GC-2010气相色谱仪（日本岛津公司），色谱工作站：Labsolution；XP205DR电子分析天平（METTLER TOLEDO公司）。

1.2 试药

供试品（2-噻吩乙醇，青岛前线生物工程有限公司，批号：20160508044），对照品（噻吩，阿拉丁，批号：J1514085；2-溴噻吩，国药集团化学试剂有限公司，批号：20140122；3-溴噻吩，国药集团化学试剂有限公司，批号：20151110；2,5-二溴噻吩，Alfa Aesar，批号：5041A060；3-噻吩乙醇, 青岛前线生物工程有限公司，20151105001），甲醇为色谱级。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷为固定液（DB-624，30 m×0.32 mm,1.80μm）的毛细管柱为色谱柱。

通过秒脉冲时间轴开窗保护，可有效滤除时间窗外干扰脉冲，因为窗口关闭，判断输入脉冲是否有效、秒脉冲计数器计数等操作都被屏蔽，杜绝了此类干扰的影响。理论上还存在一种可能，即系统在工作过程中，因某种原因造成秒脉冲输入中断，按照秒脉冲时间轴开窗保护的工作原理，时间同步电路仍可正常守时，以保证导弹系统作战任务的完成。

柱温：起始柱温50 ℃，以每分钟10 ℃的速率升温至150 ℃，维持3 min，再以每分钟15 ℃速率升温至230 ℃，维持5 min。

取本品约200 mg，平行9份，平均分成3组，加入混合杂质对照品贮备液各适量，使供试品溶液中含各已知杂质的质量分数分别为限度质量分数的50%、100%及150%。按外标法计算各杂质的含量，计算回收率，各杂质的回收率均在95.0%～117.6%，RSD均小于5.0%（=9），该方法的准确度良好。

2.2 溶液的制备

之所以有必要在沙盘实训课程中引入激励理论，是因为该课程在实施过程中易出现一些问题，影响了学生学习的积极性。

各杂质定位溶液：每1 mL中约含各杂质10 g的溶液。

混合杂质对照品贮备液：每1 mL约含各杂质1 mg的溶液。

取各杂质对照品贮备液，用溶剂配制成相当于限度质量分数20%～200%的线性系列溶液。精密量取上述系列浓度溶液各1 μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，以进样浓度为纵坐标（）与相应的峰面积为横坐标（），进行线性回归分析。噻吩回归方程为=0.000 6+1.895 6，=0.995 1；2-溴噻吩回归方程为=0.000 9+1.497 0，=0.996 4；3-溴噻吩回归方程为=0.000 8+1.501 5，=0.996 5；2,5-二溴噻吩回归方程为=0.001 2+1.639 0，=0.996 8；3-噻吩乙醇回归方程为=0.000 5+1.589 9，=0.996 4；表明各杂质在限度质量分数20%～ 200%范围内，峰面积与浓度间呈良好的线性关系。

1.3 观察指标 记录并比较两组患者治疗前后的β-内啡肽、促性腺激素释放激素、N端脑钠肽前体、和肽素水平，脑水肿体积，美国国立卫生研究院卒中量表评分，Barthel指数[9]，以及治疗有效率。治疗有效率评价标准[10]：基本痊愈，CT检查显示无血肿，肢体功能恢复，日常生活基本可自理；显效，CT检查显示血肿大部分消失，肢体、语言功能明显改善，日常生活轻度依赖；有效，CT检查显示血肿较治疗前有所缩小，但肢体、语言功能仍有一定障碍，日常生活中度依赖；无效，血肿较治疗前无明显变化，肢体、语言功能存在明显障碍，日常生活重度依赖，甚至病情加重。

供试品溶液：取2-噻吩乙醇适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释制成每1 mL中约含20 mg的溶液。

加标供试品溶液：取本品适量，精密称定，精密加入混合杂质对照品贮备液适量，加甲醇溶解并稀释制成每1 mL中约含2-噻吩乙醇20 mg、各杂质均约20μg的混合溶液。

系统适用性溶液：取2-噻吩乙醇约200 mg，加入混合杂质对照品贮备液200μL，置同一10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 专属性

平行配制6份加标供试品溶液，分别精密量取1μL，注入气相色谱仪，记录色谱图。计算平行6份样品中各杂质的质量分数，结果噻吩平均质量分数为0.11%，RSD为3.4%（=6）；2-溴噻吩平均质量分数为0.11%，RSD为2.3%（=6）；3-溴噻吩平均质量分数为0.11%，RSD为2.4%（=6）；2,5-溴噻吩平均质量分数为0.12%，RSD为1.8%（=6）；3-噻吩乙醇平均质量分数为0.19%，RSD为2.7%（=6）；该方法的重复性良好。

空白溶剂：甲醇。

2.4 线性关系

对照品溶液：每1 mL中约含各杂质20μg的溶液。

2.5 检测限与定量限

取混合杂质对照品溶液适量，逐级稀释，按信噪比约为10∶1配制成定量限溶液；按信噪比约为3∶1配制成检测限溶液。分别精密量取溶液1μL进样分析，噻吩的检测限为0.16 ng；2-溴噻吩的检测限为0.20 ng；3-溴噻吩的检测限为0.21 ng；2,5-二溴噻吩的检测限为0.35 ng；3-噻吩乙醇的检测限为0.17 ng。噻吩的定量限为0.52 ng，2-溴噻吩的定量限为0.68 ng；3-溴噻吩的定量限为0.69 ng；2,5-二溴噻吩的定量限为1.17 ng；3-噻吩乙醇的定量限为0.55 ng。

2.6 回收率

进样口温度：260 ℃；检测器温度：300 ℃；柱流量：每分钟2.4 mL。

2.7 重复性

精密量取空白溶剂、各杂质定位溶液、系统适用性溶液及供试品溶液各1μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。空白溶剂不干扰杂质检测；杂质与杂质之间、杂质与主成分之间分离良好，该方法的专属性良好。

4)环保限制类：自备电厂、高能耗燃煤锅炉等领域，细化、完善各类企业和耗能设备的环保排放标准，提高标准，加强考核。

2.8 中间精密度

在不同时间由不同分析人员使用不同仪器，分别平行配制6份加标供试品溶液并进样分析，计算12份加标供试品溶液中杂质的含量，结果噻吩平均质量分数为0.10%，RSD为3.6%（=12）；2-溴噻吩平均质量分数为0.11%，RSD为3.3%（=12）；3-溴噻吩平均质量分数为0.10%，RSD为3.5%（=12）；2,5-溴噻吩平均质量分数为0.12%，RSD为2.7%（=12）；3-噻吩乙醇平均质量分数为0.19%，RSD为2.4%（=12）；该方法的中间精密度良好。

简单来说，以往日本的创新政策主要聚焦于促进产学官合作下的研究开发活动，但近年来的政策正在逐渐由技术合作向促进开创新业态方向发展。在以往的线性创新活动模式的基础研究、应用研究、产品开发、量产化过程中，大学和国立研究机构承担技术研究，应用研究由大学和大企业共同进行，然后由企业进行商品化。但是近年来，政府正在通过政策调整促进这种线性模式发生变化，主要的做法是先选择适当的领域，然后将企业间、企业与用户间的合作加入到创新活动中。

2.9 溶液稳定性

取对照品溶液、供试品溶液分别于0 h、2 h、4 h、8 h、14 h、16 h后进样分析。对照品溶液中各已知杂质峰面积均小于5.0%，供试品溶液中未新增不小于0.05%的杂质，已知的5个杂质在规定考察时间内的质量分数RSD均不大于5.0%，表明对照品溶液和供试品溶液在所选定的溶剂中稳定性良好。

2.10 耐用性

适当调整色谱条件参数（起始柱温、进样口温度、检测器温度、柱流速），结果系统适用性溶液中主成分与杂质、杂质与杂质之间的分离度均大于1.5，供试品溶液中各杂质检测结果基本一致，可见方法的耐用性良好。

3 讨论

根据2-噻吩乙醇及其杂质的极性，选择了弱极性和中等级性的气相色谱柱，分别考察了DB-5、DB-624、DB1701毛细管色谱柱，其中使用DB-5色谱柱分离时，2,5-二噻吩乙醇与2-噻吩乙醇色谱峰未能基线分离，达不到分离要求；使用DB-1701色谱柱亦未能满足基线分离要求。选用DB-624色谱柱进行分离时，各色谱峰分离良好，灵敏度满足定量需求，故选用该型毛细管色谱柱。

中小学生正处于身心发展高峰期，兴奋与抑制不平衡时期身体发育迅速、骨骼、肌肉快速增长逐步完善且具有强烈的好奇心和自我心理[3]。同时智力发展和知觉越来越敏感、精确、快速。根据最新的学生体质调查，当前的中学生由于家庭环境都比较好动手能力多数较弱，体现出柔韧性、协调性较差，反应能力、动作速度逐年下降。但该阶段学生身体正处于全面发展阶段，如有科学有效的运动刺激就可以促进其骨骼肌肉的生长和身体各机能的完善，使其往更健康的方向发展。在传统教学中的问题是：

where n is the turn ratio of primary coil and secondary coil.The transfer impedance can be simplified from Eq. (3) as:

4 结 论

本文所建立的2-噻吩乙醇有关物质方法专属性良好，可以有效分离2-噻吩乙醇及其相关杂质；方法的灵敏度和准确度高，线性关系和精密度良好，能满足分析检测需求，准确的测定2-噻吩乙醇的有关物质含量，为2-噻吩乙醇提供有效的质控方法。

[1]庄月. 阿司匹林联合氯吡格雷治疗脑梗死的临床效果分析[J]. 中外医疗, 2018 (18) : 120-121.

[2]王灿莲. 氯吡格雷联合肠溶性阿司匹林在急性心肌梗死治疗中的应用效果[J]. 世界临床医学, 2017, 11 (23): 77-79.

[3]李小华. 高纯度氯吡格雷及其硫酸氢盐晶型的制备[D]. 浙江大学, 2018.

[4]刘良辉，李昕颖，胡昱. 硫酸氢氯吡格雷有关物质的合成及工艺应用[J]. 精细化工中间体, 2021, 51 (5): 43-47.

[5]孟庆礼，苏艳华. 氯吡格雷的合成研究[J]. 医药化工, 2017, 43 (5): 191-192

[6]徐江洋，卢玲玲，葛政亮，等. 氯吡格雷中间体-(S)-2-(2-噻吩乙胺基)（2-氯苯基）乙酸甲酯盐酸盐的合成[J]. 化工时刊, 2021, 35 (2): 12-14

[7]朱国峰. 普拉格雷的合成研究[D]. 太原理工大学，2017.

[8]邓康，路楠，李灵君，等. 盐酸普拉格雷的合成工艺改进[J]. 合成化学, 2018, 26 (6): 454-457.

[9]申东升. 经格氏反应合成噻吩乙醇的研究[J]. 精细石油化工, 2001 (3): 30-32.

[10]郑志满,何雪涛. 2-噻吩乙醇的合成及工艺改进[J].广州化工, 2011,39(14): 87-88.

[11]杨海玉，白金，李长波，等. 2-噻吩乙醇的合成技术及其在药物中的应用[J]. 化学与黏合,2007,29(6):435-438.

[12]王文佳，吴凡，丁伟，等. GC-MS内标法测定石油苯中的痕量噻吩[J].化学工程师,2018 (02):29-31

[13]孙儒瑞，高孙慧，黄宏星，等. 气相色谱法与化学发光检测器联用测定石脑油中5种噻吩类硫化物的研究[J]. 辽宁化工, 2019, 48 (12): 1226-1228．

Determination of Related Substances of 2-Thiophenene Ethanol by GC

,,

（Nanjing Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Co., Ltd., Nanjing Jiangsu 210046, China）

A GC method for the determination of the related substances of 2-thiophenene ethanol was established. The related substances was detected by DB624 capillary column with FID detector.The column temperature was programmed.The inlet temperature was 260 ℃ and FID detector temperature was set at 300 ℃.The carried gas flow rate was 2.5 mL·min-1. The results showed that, main substance and its impurities could be well separated. The good linearity for related substances was obtained in the range of 20%～200%(≥0.990). The recovery of related substances was 95.0%～117.6% (＜5.0%,=9). The solution was stable within 16 h, and the RSDs of precision and repeatability were less than 5.0%. So, the method has good precision and high accuracy, and can be used for the detection of related substances in 2-thiophenene ethanol.

2-Thiophenene ethanol; Related substances; GC

O657.7

A

1004-0935（2022）02-0285-03

2021-11-22

葛李薇（1986-），女，安徽安庆人，工程师，硕士学位，2011年毕业于中国药科大学生药学专业，研究方向：药物分析。

兰公剑（1981-），男，工程师，硕士学位：药物分析。