血清CTX-Ⅱ和HO-1水平与类风湿关节炎患者疾病活动度的相关性分析

肖飞 杜磊

(1.宝鸡市第二中医医院，陕西 宝鸡 721300；2.咸阳市泾阳县医院，陕西 咸阳 713700)

类风湿关节炎是一种慢性全身性的炎症疾病，属自身免疫性疾病的范畴，好发于女性[1]。Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)是Ⅱ型胶原的裂解产物，与关节软骨损伤有关，其被认为是可反映软骨破坏程度的评估指标[2]。血红素氧合酶-1(HO-1)是催化血红素在体内氧化降解的限速酶之一，通常在应激条件下表达增加[3]。最近有文献报道，在类风湿关节炎患者的滑膜组织中可检测到HO-1表达[4]。因此，本研究旨在分析血清CTX-Ⅱ和HO-1水平与类风湿关节炎患者疾病活动度的相关性，以探讨CTX-Ⅱ和HO-1对类风湿关节炎疾病活动度的监测意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年1月至2019年6月我院收治的类风湿关节炎患者80例，所有患者均符合风湿关节炎临床诊断标准[5]，排除合并糖尿病、高血压、高血脂、心脑血管疾病、严重肝肾功能障碍、甲状旁腺功能障碍及其他风湿性疾病。其中男22例，女58例，年龄43～75岁，平均年龄(56.37(12.16)岁，病程16～103个月，平均病程(77.82(21.36)个月。另纳入43例非类风湿关节炎患者和39例体检健康自愿者作对照，其中非类风湿关节炎组，男16例，女27例，年龄45～73岁，平均年龄(55.08(10.37)岁，疾病类型：骨关节炎11例、反应性关节炎18例、非类风湿关节炎弥漫性结缔组织病14例；健康对照组，男14例，女25例，年龄41～72岁，平均年龄(54.36(10.91)岁。3组的一般资料相比差异无统计学意义(P<0.05)。

1.2方法

1.2.1样本采集 采集3组空腹外周静脉血4～5 mL，EDTA抗凝处理，室温静置30 min，3 000 rap/min离心15 min，分离上层血清，于-80℃保存备用，血清分离过程中避免发生溶血。

1.2.2主要试剂与仪器 人CTX-Ⅱ酶联免疫吸附法试剂盒购自上海沪震生物有限公司，人HO-1酶联免疫吸附法试剂盒购自上海极威生物科技有限公司，Synergy2多功能酶标仪购自美国BioTek公司。

1.2.3检测方法 采用酶联免疫吸附法检测血清CTX-Ⅱ和HO-1水平，实验步骤严格按照相应试剂盒说明书进行操作，首先设置标准孔、样本孔及空白孔，向标准孔加入按一定比例稀释好的标准品，样本孔加入待测样本，空白孔不加溶液，然后除空白孔外，其余孔均加HRP标记的检测抗体，附上封板膜，37℃温育60 min，弃去孔内液体，甩干、洗板、再甩干，所有孔均加入配置好的底物溶液，37℃避光温育15min，最后向每孔中加入终止液，立即使用Synergy 2型多功能酶标仪在450 nm波长处测定各孔的OD值，然后根据标准曲线计算出血清样本中CTX-Ⅱ和HO-1水平。

1.3观察指标 采用疾病活动度评分28(DAS28)评价类风湿关节炎患者的疾病活动程度，首先计算28个关节的关节肿胀数(SJC)和关节压痛数(TJC)，根据SJC、TJC和血沉(ESR)数值计算DAS28评分[6]。

2 结 果

2.13组血清CTX-Ⅱ和HO-1水平比较 3组血清CTX-Ⅱ和HO-1水平存在显著性差异(P<0.05)，其中类风湿关节炎组血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明显高于非类风湿关节炎组和健康对照组(P<0.05)，非类风湿关节炎组血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明显高于健康对照组(P<0.05)。见表1。

表1 3组血清CTX-Ⅱ和HO-1水平比较

2.2类风湿关节炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平的相关性 类风湿关节炎组患者的血清CTX-Ⅱ水平与HO-1水平呈正相关(r=0.726，P<0.05)。

2.3类风湿关节炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平与疾病活动度指标的相关性 类风湿关节炎组患者血清CTX-Ⅱ水平与SJC及DAS28评分均呈正相关(P<0.05)，而与TJC及ESR不相关(P>0.05)，血清HO-1水平与TJC及DAS28评分均呈正相关(P<0.05)，而与SJC及ESR不相关(P>0.05)。见表2。

表2 类风湿关节炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平与疾病活动度指标的相关性

3 讨 论

有研究显示，在正常情况下细胞内的HO-1基因呈低表达，但当机体发生炎症、缺氧等应激反应时，应激反应转录因子NF-kB可与HO-1启动子区域的特殊位点结合，促进HO-1基因高表达[7]，而普遍认为NF-kB的异常活化与关节损伤及骨膜组织炎性增生密切相关[8]，且近年在类风湿关节炎患者关节液中检测到了HO-1[9]。因此，研究CTX-Ⅱ和HO-1表达与类风湿关节炎的关系有一定意义。

本文结果显示，类风湿关节炎组血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明显高于非类风湿关节炎组和健康对照组(P<0.05)，同时，类风湿关节炎组患者的血清CTX-Ⅱ水平与HO-1水平呈正相关(P<0.05)，表明类风湿关节炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明显上升，且二者具有明显的相关性。

监测类风湿关节炎疾病进展，对于此类患者的临床治疗和预后具有重要意义。本文结果发现，类风湿关节炎组患者血清CTX-Ⅱ水平与SJC及DAS28评分均呈正相关(P<0.05)，而与TJC及ESR不相关(P>0.05)，血清HO-1水平与TJC及DAS28评分均呈正相关(P<0.05)，而与SJC及ESR不相关(P>0.05)，由于DAS28评分是评价类风湿关节炎患者疾病活动程度的重要指标，而血清CTX-Ⅱ和HO-1水平又均与DAS28评分呈正相关，这表明血清CTX-Ⅱ和HO-1水平与类风湿关节炎疾病活动程度呈正相关，检测二者水平对于监测类风湿关节炎疾病活动度具有积极意义。

综上，类风湿关节炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平升高，且与患者的疾病活动度呈正相关，是可用于监测类风湿关节炎疾病活动度的潜在指标。