唐子鹏,曲 木,刘 艳,运永光,翟胜利
(天津市金水族水产养殖有限公司,天津 301800)
水产养殖疫病普遍具有传染性强、致死率高的特点,给水产养殖业造成了巨大的损失。近几年我国对于水产养殖疫病越来越重视,中华人民共和国农业农村部也出台了很多相关监测及管理办法,2020年对我国29个省份4 306个样本的检测结果表明,我国水生动物疫病阳性检出率为8.8%,与2019 年相比降低了0.9%,锦鲤疱疹病毒病(Koi herpesvirus diserse,KHVD)便是每年重点监测的疫病之一[1],2020年河北省检出锦鲤疱疹病毒病阳性样本9例[2]。
锦鲤疱疹病毒病是一种可感染各个年龄段鲤科鱼类(以锦鲤和鲤鱼为主)的全球性疫病,2008年农业部公告第125号将其列为二类动物疫病,其病原为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)。我国是渔业大国,据2020 年中国渔业统计年鉴数据显示,2019 年我国鲤鱼养殖总产量约289 万t,占2019 年全国淡水养殖总产量的9.6%,因此对锦鲤疱疹病毒病的防治研究非常重要,本文对目前研究者们的观点进行综述,以期为从业者提供参考。
锦鲤疱疹病毒病在20 世纪90 年代被发现并确定,随着全球贸易而扩散至多个国家和地区,2002年传入我国[3]。锦鲤疱疹病毒感染性强、传播速度快、对环境的适应能力强,其适宜的生存环境与易感鱼类的适宜环境相似,在春季和秋季易大规模暴发,水温在18~27 ℃范围内的持续时间越长,该病暴发的可能性越大。该病的潜伏期一般为14 d,鱼群在出现患病症状后24~48 h便会出现死亡,发病后2~4 d 内死亡率迅速飙升,可达80%~100%,并且锦鲤疱疹病毒病会和其他细菌病、寄生虫病混合感染,很多时候养殖户会将其与烂鳃、出血病等疾病混淆,影响疾病的判断,耽误救治时间,对渔业生产影响巨大,目前还没有十分有效的治疗方法,只能通过综合预防的手段来尽量避免损失。锦鲤疱疹病毒病的传播方式以水平传播为主,通过暴露的鳃、肠道或者是破损的皮肤进入病鱼体内[4],目前尚无直接证据可以表明存在垂直传播,除了能感染鲤科鱼外,还能通过其他鱼类携带传播,如金鱼、草鱼等[5],携带病毒的金鱼无明显病症,但如果跟锦鲤混养,便会导致锦鲤发病,这进一步增加了该病防治的难度。
鱼眼凹陷、全身出血、内脏坏死及神经性症状是锦鲤疱疹病毒病的典型症状,养殖户在看到鱼有这种情况时,需要及时取样送至专门检测机构进行确诊。锦鲤疱疹病毒的确诊方法包括电镜观察、病原分离鉴定、免疫荧光检测、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链式反应(PCR)、环介导的恒温PCR(LAMP)等,其中病原分离鉴定是最为精准的检测方法,但在分离细胞系范围方面存在一定的局限性。目前PCR 技术以其高准确性、操作简便、单次检测样本多等优势备受青睐[6],该技术也在实践中被一步步优化,安伟等[7]对PCR反应过程中退火温度进行了优化,所建立的鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cy⁃HV-2)嵌套式PCR 检测方法比常规的PCR 检测方法灵敏100~1 000 倍;张文等[8]建立了一种可同时检测鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒的三重PCR 检测方法,相信随着检测技术的进步,可以更快速、更便捷地对该疫病进行确诊。
从养殖全流程入手,一方面要保持稳定、良好的水环境,另一方面要保证在鱼类引进和售出时进行严格检疫,切断传染源,做到生态养殖和规范养殖。日常养殖应以防控为主,做好生产中各个环节的管理。
3.1.1 使用健康苗种
引进苗种时尽量挑选资质齐全的育种公司,应向供种方索要检疫证明[9],引入后单独饲养,经充分隔离观察(一般小规格鱼30 d,大规格鱼45 d)确定无疫后才可与其他鱼混养,养殖户要注意在未确定购置的鱼是否染疫前,隔离观察池的水不能随意排放。尽量不从疫区购买,尤其是进口,口岸应加强检疫管理,并严防走私苗种[10]。王庆等[5]对锦鲤疱疹病毒病的传入风险进行了评估,阐述了在全球贸易的背景下,锦鲤进口属于高风险因素,必须严格管控,避免在我国发生大范围的疫病传播。近两年,我国各地区推进建设产地苗种检疫上报制度和农产品可追溯制度,力求从源头控制重大疫病传播[2]。
3.1.2 定期监测,科学管理
养殖场和相关部门应定期进行抽样检查[11],早发现早处理,尤其是在春秋两季锦鲤疱疹病毒病的高发期,应适当降低养殖密度[12],要时刻关注锦鲤的进食和游动状态,如果锦鲤有进食量突减、长时间不动、刺激无反应的症状,表明其有可能已患病,具体病症需要进一步检测确定。养殖工具要专池专用,避免交叉感染,用完的工具要及时消毒。
在锦鲤疱疹病毒病的预防过程中,要更加注意水体消毒。养殖用水主要包括源水、养殖水和养殖尾水,消毒自然也是针对这三部分。在引入外部水时要做好检疫、杀菌处理[13],有条件的渔场可以引入砂滤罐、紫外线消毒器等设备,降低源水的带毒概率。池塘有养殖动物时,可以用氯制剂(二氧化氯、三氯异氰尿酸等)对水体进行消毒,可有效杀灭水中细菌及病毒[14]。
3.1.3 合理使用药饵
在春秋两季使用的饵料中加入免疫增强剂,连续投喂25 d左右,同时注意不可滥用净水剂、消毒剂[9],以免因水环境剧变造成鱼类应激反应而增加患病风险。有条件的单位可以购买多种消毒、抗菌、杀虫药物,通过药敏试验来选择效果良好的药物[9]。为降低鱼体的抗药性和应激反应,应尽量选用微生态制剂和中草药提取物进行水质调控和日常治疗。
3.1.4 选用优质饲料,提高鱼体免疫力
即使是发病池塘,有的鱼也不会死亡,这与鱼体自身的免疫力有关。沈兆媛等[15]以异育银鲫为研究对象,分别饲喂添加不同中草药的饲料,并注射疱疹病毒做暴露试验,结果发现投喂添加1%穿心莲的饲料的异育银鲫死亡率仅为15%;何杰[16]在异育银鲫饲料中添加胆汁酸,用鲤疱疹Ⅱ型病毒进行攻毒,发现胆汁酸不仅能促进其生长,还能提高异育银鲫的抗病能力。随着研究的逐渐深入,相信在不久的将来会有针对疱疹病毒病的抗毒饲料问世。
目前,我国水产养殖行业多以家庭作坊式小规模饲养为主,存在文化水平不高、饲养随意、对设施设备的投入较低等特点,很多养殖户在养殖过程中换水方式仍是传统的大排大灌,不注重池塘间的交互传染和尾水处理,这些因素在很大程度上增加了疫病发生的可能性和防治难度。对此,渔业龙头企业应积极发挥示范带动作用,定期组织技术人员开展培训、观摩活动,提高渔民的技术水平和健康养殖意识。
目前没有针对锦鲤疱疹病毒病的特效药,因此引进或培育抗病力强的苗种也是预防此病的重要方向。吕大成[17]和王庆等[5]均指出已经有学者通过杂交驯养鲤鱼与野生鲤鱼的育种试验获得了抗病力较高的品种;白珊珊等[18]致力于抗疱疹病毒镜鲤新品种的选育工作,发现通过选育出来的F2、F3的成活率要显著高于F1,且F3 的抗病力已趋于稳定,这都表明通过选育抗病品种来降低患病率是可行的,并且该方法可以从根源上杜绝疾病的发生[19]。
使用疫苗是应对病毒性疫病较为有效的措施,包括灭活疫苗、弱(减)毒疫苗和核酸疫苗等,但目前市面上并无针对锦鲤疱疹病毒病的高效商品化疫苗,如以色列研制的疱疹病毒病减毒疫苗因使用效果存在争议而未实现大范围应用[9],胡峰[20]以锦鲤为研究对象,将研制的疱疹病毒病重组核酸疫苗经肌肉注射进鱼体,发现该疫苗可有效提高锦鲤的成活率,对疱疹病毒有较高的免疫保护力,但该疫苗目前仍处于试验阶段,只能为疫苗市场化做理论依据,现有疫苗产品在保护率、可靠性、稳定性等方面还有待进一步研究完善。
如果发现疑似锦鲤疱疹病毒病而无法确定或已确定为锦鲤疱疹病毒病时,则应在第一时间上报至当地动物疫病防控部门,并积极配合进行检验及消杀处理,不可擅自用药[21]或转移运输。对病鱼的来源和销售情况进行溯源跟踪,开展流行病学调查,及早发现并切断传播路径,降低损失。
捞出死鱼和病危鱼,用生石灰处理后深埋。
锦鲤疱疹病毒还可存在于病鱼的分泌物中在水中传播[22],应注意对染病鱼池的隔离,不得将水外排。使用二氧化氯消毒剂对池边环境和养殖工具进行消毒[5]。此外,紫外线、水温50 ℃以上1 min、2.0×10-4有机碘溶液浸泡20 min、2.0×10-4的漂白粉浸泡30 s等都是杀灭此病毒的有效方法。
为减小损失,可对发病鱼池采取增氧、停食措施。加大水体溶氧,可促进有机物分解,抑制有害微生物的增殖,陈畅等[23]提出在投料台底部安置网格型水管,水管钻孔,向管中通入臭氧,可快速氧化投料台附近的有机质,并且氧化产生的氧气恰好可以缓解由于进食导致局部密度增加造成的氧供应不足等问题。在小型养殖池可通过升温至30~32 ℃并维持7 d 来控制病毒的增殖[24],但此法并不能杀灭病毒,此时锦鲤是携带病毒状态,只是病毒的增殖速度受到温度的影响而减缓不会致命,这种处理方式可以为控制疾病争取时间。
锦鲤疱疹病毒病是一种能够引起鲤科鱼类高病发率、高传染性、高死亡率的鱼类疫病,应引起广大养殖者的高度重视。目前市面上没有药物或疫苗能够有效治疗,只能通过综合防治和科学管理的手段加强预防,在发现后及时上报并进行无害化处理和病原溯源、切断传播途径。
目前渔业绿色生态养殖理念已被业界广泛认可,各地区陆续建立起无规定疫病养殖示范场,同时相关的疫苗也通过多种技术在进行研发试验。相信随着渔业提质增效和疫病防控工作的推进,锦鲤疱疹病毒病将得到进一步的控制和治疗。