鸡大肠杆菌病诊断

赵永平

（四川省南充市高坪区动物疫病预防控制中心，四川 南充 637000）

鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的，表现为大肠杆菌性败血症、大肠杆菌性肉芽肿、气囊病、蜂窝织炎、肿头综合征、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、全眼球炎和脐炎。

1 流行病学

幼龄鸡对本病最易感，发病率可达30%～60%，病死率可达100%，其常发生于3～6周龄幼雏；成年蛋鸡往往在开产阶段发病，其生产性能受影响；种鸡发生本病时影响种蛋孵化率、出雏率，造成死胚和毛蛋增多，健雏率降低。该病不仅能导致鸡发育不良、生长迟缓、生产性能下降，还可造成死淘率增高等。

大肠杆菌耐药菌株较多，耐药谱较广，个别菌株表现出极强的耐药性。在临床防治中，应选择敏感药物预防和治疗本病。

2 临床症状

病鸡精神萎顿，不喜活动，食欲下降，羽毛松乱，两翅下垂，闭目呆立，腹泻，粪便呈灰白色或灰黄色，少数为黄棕色，肛门周围被粪便污染，有的泄殖腔红肿、外翻，发生脐炎，腹部膨胀。

患鸡平衡失调，爪部干缩，呼吸困难，发啰音，部分鸡在昏迷状态中死亡，有的死前倒地，仰卧，两腿向后伸张，拍打翅膀挣扎。病程稍长的出现眼球炎，其上下眼睑严重肿胀，结膜发炎，角膜混浊，部分病鸡失明。

3 剖检变化

病死鸡气囊壁混浊、增厚，并有黄白色纤维絮状物附着，部分鸡气囊腔内有干酪样物；心包混浊、变厚，其上也附有白色纤维样物，少数鸡心包腔内有数量不等的淡黄色积液，心包膜与心外膜黏连；心脏表面有出血点；肝稍肿大、瘀血、质脆，边缘呈黄色，表面有白色纤维素膜附着，易剥离；胆囊肿大；输卵管明显增粗，内积黄白色干酪样渗出物，严重者输卵管阻塞。

4 实验室检查

4.1 分离培养 取5 份病料接种于普通琼脂平板、麦康凯培养基，置37 ℃培养24 h。通过分离培养分离出1 株大肠杆菌，5 个普通琼脂培养基上的菌落均为直径2～3 mm，中等大小，圆形，微突起，表面光滑、湿润，半透明，边缘整齐，在阳光下呈铅灰色。麦康凯培养基上的菌落呈砖红色，大小不一，表面光滑、湿润、微隆起，从培养基侧面观察单个菌落可见纽扣样结构，其中间部位凹陷，周围突起。

分离菌在营养肉汤中培养24 h 后均匀混浊，管底有灰白色沉淀，沉淀振荡后呈云雾状散开并有粪臭味，液面管壁有菌环，符合大肠杆菌特征。

4.2 纯培养 无菌选取普通琼脂平板上的单个可疑菌落，划线接种到麦康凯琼脂上，37 ℃培养24 h 后，挑取麦康凯琼脂平板上单个红色的菌落再接种于麦康凯琼脂平板上，37 ℃培养24 h，如此反复纯化3 次，选择纯培养菌落接种到营养肉汤中，置4 ℃条件保存备用。

4.3 染色镜检 挑取纯培养的单个菌落少许制片，革兰氏染色，镜检。

4.3.1 制片过程 取玻片用95%的酒精棉揩擦后，在酒精灯灯焰上轻拖几次；用灭菌接种环从营养肉汤中取3 环置于玻片中央，均匀涂布成适当大小的薄层后自然干燥；干燥后将涂抹面向上，玻片背面在酒精灯灯焰上来回通过数次，每次过焰后以不烫手为度，进行固定。

4.3.2 革兰氏染色步骤 在干燥、固定好的抹片上滴加草酸铵结晶紫溶液，经2 min水洗，加革兰氏碘溶液于抹片上媒染，作用3 min，加95%酒精于抹片上脱色，1 min 后水洗；加稀释的石炭酸复红复染30 s，水洗，吸干。

4.3.3 镜检 显微镜下见到染为红色的杆菌，其两端钝圆，散在、成对或成丛存在，偶尔有3 个连在一起的，无芽孢。

4.4 生化鉴定 生化试验表明所分离的菌株对葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇均产酸产气，不发酵蔗糖，MR试验阳性、VP试验阴性、靛基质试验阳性、枸橼酸盐利用试验阴性、三糖铁试验阴性。试验结果符合大肠杆菌的特性。

4.5 动物试验 将18只37日龄健康雏鸡随机分为A、B 二组，每组9 只。A 组颈部皮下接种致病菌0.2 mL/只，B 组颈部皮下接种相同剂量的灭菌生理盐水作对照。接种后的雏鸡按正常标准隔离饲养，喂给不含药物的饲料，每天上、下午各记录一次鸡的死亡情况及发病症状，对病死鸡可刮取肠黏膜染色、涂片、镜检，并采集心血进行细菌分离、生化鉴定，直到接种后7 d为止，若A组中仍有鸡存活，对其进行捕杀，观察病变。10 d后对B组鸡进行剖检，观察有无病变。

接种后A 组鸡均发病，主要表现为精神沉郁，呼吸困难，喘气，垂翅，竖毛，缩颈，饮食欲下降或废绝，死亡高峰在发病12～24 h，病死鸡病变主要见于心包、气囊、肝，其心包积液，气囊混浊和肝脏肿大、瘀血，典型病变出现于接种48 h后，可见死亡鸡纤维素性心包炎、肝周炎，气囊上有多量干酪样渗出物。对照组鸡均健活，捕杀时未见眼观病变，心、肝等也未分离出细菌。

刮取接种后死亡鸡的肠黏膜染色、涂片，进一步接种麦康凯培养基，并进行生化鉴定试验，结果证实为大肠杆菌。

4.6 药敏试验 用无菌棉拭子蘸取致病菌液，在普通琼脂培养基上均匀涂抹后，于室温放置5 min。将药敏纸片相隔一定距离均匀贴于平板上，于室温放置15 min 后将平板倒置，于37 ℃温箱中培养24 h，观察记录结果。

结果表明大肠杆菌对青霉素、强力霉素轻微耐药，而对丁胺卡那霉素、磺胺嘧啶敏感。

5 防控措施

为减少细菌耐药性产生，提高疗效，应合理使用抗菌药物。用药时应严格根据适应症，合理确定用药剂量与疗程，不要长期使用某几种药物，应采用联合用药、交叉用药或轮换用药等方法。

大肠杆菌病在鸡群中的发生和流行除与天气变化及大量滥用抗生素导致耐药菌株产生有关外，饲养环境、养殖条件、鸡场卫生状况等也是引起发病的重要因素。减少或者杜绝大肠杆菌病发生需加强饲养管理、搞好环境卫生、严格消毒并坚持自繁自养、全进全出，不从有大肠杆菌病感染史的种鸡场或孵化室购鸡，确需购买的应进行大肠杆菌病监测，确定无病后方可购入。鸡场应控制饲养密度，防止过分拥挤并保持空气流通、新鲜，防止有害气体蓄积，同时应定期消毒鸡舍、用具及养殖环境。■