眼树莲化学成分研究

何柳艳，梁 艳，唐云丽，潘翠柳，梁臣艳*

（1.广西卫生职业技术学院，广西 南宁 530023；2.广西中医药大学，广西 南宁 530200）

眼树莲为萝藦科眼树莲属附生藤本植物眼树莲Dischidia chinensisChamp.ex Benth.的全株，又名乳汁藤、望水王仙桃、金瓜核、瓜子藤、上树鳖、翼鱼草、小耳环、树上瓜子等［1］，主要分布于广西、广东、海南等地［2］。其味甘、微酸，性寒，具有清肺热、化疟、凉血解毒之功效，主治肺燥咳血、疮疖肿毒、小儿疳积、痢疾、跌打肿痛、毒蛇咬伤［3］。眼树莲以全株入药，在广西部分民间地区常用于治疗肺燥咳痰、咳血、百日咳、支气管炎及肺痨咳嗽等，有较好的疗效［4］。霍丽妮等［5］研究表明眼树莲乙酸乙酯部位具有较强的体外抗氧化作用；杨柳等［6］研究发现海南眼树莲乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物为其抗炎活性部位；洪家立等［7］研究结果表明，眼树莲乙醇提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位均对人胃癌SGC 细胞具有明显抑制作用；本课题组前期研究表明眼树莲乙酸乙酯部位提取物具有一定的止咳、平喘、祛痰作用。为明确眼树莲的药效活性成分，本文对眼树莲全草乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行了化学成分研究。

1 实验材料

1.1 试药与试剂 眼树莲药材采集于广西横县，经广西中医药大学药学院梁子宁教授鉴定为萝藦科眼树莲属眼树莲Dischidia chinensisChamp.ex Benth.的全株。硅胶G 板（青岛海洋化工有限公司，批号：20191228），柱层析硅胶（100～200目，青岛海洋化工有限公司，批号：20190417）；提取分离用乙醇为食用级酒精，其余试剂均为分析纯。

1.2 仪器 AutoSpec Permier P776 质谱仪（美国Waters 公司）；AVANCE Ⅲ 500 MHz 核磁共振仪（德国Brucker 公司）；超声波清洗器（KH-600B，昆山禾创超声仪器有限公司）；旋转蒸发仪（CCA-1112A，上海爱朗仪器有限公司）；恒温水浴锅（HH-S6，巩义市与予华仪器有限责任公司）；电子天平（YP5002，上海佑科仪器仪表有限公司）；三用紫外分析仪（ZF-2 型，上海市安亭电子仪器厂）。

2 方法与结果

2.1 提取与分离 称取7 kg 干燥切碎的全株眼树莲药材放置容器中，加入75%乙醇在常温下浸泡7 d，过滤，滤液减压回收乙醇，连续浸渍提取共4 次，减压浓缩后得到乙醇粗浸膏947.7 g。取乙醇总浸膏用蒸馏水混悬后，依次加入石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取，得到眼树莲3个不同极性部位浸膏，分别为257 g，230 g，200 g。取眼树莲乙酸乙酯部位浸膏约80 g，经硅胶色谱柱，二氯甲烷∶丙酮（80∶1～1∶1）梯度洗脱，洗脱液减压回收溶剂，再采用硅胶柱色谱及重结晶等方法进行分离和纯化，分别得到化合物1（528 mg）、化合物2（780 mg），化合物3（14 mg）、化合物4（5.0 mg）、化合物5（42 mg），化合物 6（8 mg）。

2.2 结构鉴定

化合物1：白色粉末，易溶于氯仿。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ（ppm）：0.88（3H，d，J=6.9 Hz，H-23），0.72（3H，s，H-24），0.87（3H，s，H-25），1.01（3H，s，H-26），1.05（3H，s，H-27），1.18（3H，s，H-28），1.00（3H，s，H-29），0.95（3H，s，H-30）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ（ppm）：22.4（C-1），41.7（C-2），213.5（C-3），58.4（C-4），42.3（C-5），41.4（C-6），18.4（C-7），53.2（C-8），37.6（C-9），59.6（C-10），35.8（C-11），30.6（C-12），39.8（C-13），38.4（C-14），32.9（C-15），36.1（C-16），30.1（C-17），42.9（C-18），35.5（C-19），28.3（C-20），32.6（C-21），39.4（C-22），7.0（C-23），14.8（C-24），18.1（C-25），20.4（C-26），18.8（C-27），32.2（C-28），31.9（C-29），35.2（C-30）。以上数据与文献［8］中报道对照基本一致，鉴定化合物1为木栓酮。

化合物2：白色粉末，易溶于氯仿，与实验室自制的β-谷甾醇对照品共薄层，用石油醚-乙酸乙酯（5∶1）作为展开系统，Rf值一致，与对照品混合后熔点不下降，鉴定化合物2为β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物3：无色针状晶体，易溶于丙酮、二氯甲烷，微 溶 于 水 。 EI-MS m/z：199［M+1］+。1H-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：7.31（2H，s，H-2，6），3.87（6H，s，2-OCH3）；13C-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：121.4（C-1），108.0（C-2，6），148.2（C-3，5），141.5（C-4），167.4（C-7），56.5（3，5-OCH3）。以上数据与文献［9］中报道对照基本一致，鉴定化合物3为丁香酸。

化合物4：无色透明针晶，1H-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：7.59（1H，d，J=1.7 Hz，H-2），7.55（1H，dd，J=1.7，8.2 Hz，H-6），6.89（1H，J=8.2 Hz，H-5），3.89（3H，s，-OCH3）；13C-NMR（500 MHz，Acetone）δ：124.7（C-1），115.4（C-2），147.9（C-3），147.9（C-3），151.9（C-4），113.3（C-5），124.7（C-6），56.2（-OCH3），167.3（COOH）。以上数据与文献［10］中报道对照基本一致，鉴定化合物4为异香草酸。

化合物5：白色粉末结晶，溶于丙酮，氯仿，不溶于石油醚。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ：5.16（1H，s，H-23a），4.91（1H，s，H-23b），3.76（1H，m，H-3a），3.65（1H，m，H-3b），2.38（2H，m，H-7），1.94（3H，s，H-24）；13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：20.6（C-1），34.2（C-2），61.6（C-3），149.7（C-4），76.7（C-5），20.9（C-6），42.3（C-7），53.5（C-8），39.3（C-9），60.2（C-10），34.3（C-11），30.3（C-12），39.6（C-13），38.4（C-14），32.5（C-15），39.1（C-16），29.9（C-17），42.7（C-18），35.3（C-19），28.1（C-20），32.7（C-21），36.0（C-22），114.5（C-23），23.5（C-24），15.5（C-25），20.1（C-26），18.7（C-27），32.2（C-28），34.9（C-29），31.8（C-30）。以上数据与文献［11］中报道对照基本一致，鉴定化合物5为眼树莲二醇。

化合物6：白色针状结晶，易溶于氯仿，难溶于水。EI-MS m/z：426［M］+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ（ppm）：4.68（1H，d，J=2.3 Hz，H-29）、4.56（1H，d，J=2.3 Hz，H-29）、1.68（3H，s，H-30）、1.02（3H，s，H-26）、0.97（3H，s，H-23）、0.91（3H，s，H-25）、0.79（3H，s，H-28）、0.76（3H，s，H-24）。13C-NM（125 MHz，CDCl3）δ（ppm）：38.9（C-1），27.5（C-2），79.0（C-3），38.8（C-4），55.3（C-5），18.3（C-6），34.3（C-7），40.8（C-8），50.4（C-9），37.2（C-10），20.9（C-11），25.1（C-12），38.1（C-13），43.0（C-14），27.4（C-15），25.2（C-16），42.8（C-17），48.3（C-18），48.0（C-19），151.0（C-20），29.9（C-21），40.0（C-22），28.0（C-23），15.9（C-24），16.1（C-25），16.0（C-26），14.5（C-27），18.0（C-28），109.3（C-29），19.3（C-30）。以上数据与文献［12］中报道对照基本一致，鉴定化合物6为羽扇豆醇。

3 小 结

本实验通过反复柱色谱、重结晶等现代中药化学分离手段和NMR、MS 等波谱技术，结合文献数据，对眼树莲全草乙醇提取物的乙酸乙酯部位化学成分进行了研究，从中共分离得到6个化合物，分别鉴定为木栓酮（1）、β-谷甾醇（2）、丁香酸（3）、异香草酸（4）、眼树莲二醇（5）、羽扇豆醇（6），其中化合物 1～5 首次从该植物中分离得到。目前有关眼树莲的研究主要侧重于药理作用研究，而药效物质基础的研究比较薄弱，国内外相关的研究报道也较少。已经证实，羽扇豆醇有抗氧化、抗炎症、促进皮肤愈合等作用，且对乳腺癌、前列腺癌以及小鼠的黑色素瘤有一定的抑制作用［13］。推测羽扇豆醇是眼树莲的抗氧化和抗肿瘤药效物质基础。前期的实验研究为眼树莲的生物活性成分筛选和研究提供了实验基础和技术支持，下一步应对眼树莲的化学成分进行更深入的研究，探索药效物质基础，为眼树莲的进一步开发研究提供依据和参考。