壮药调理补虚方质量标志物初步预测：基于质量标志物“五原则”

陈海燕，随家宁，李芳婵，郭勇秀，谢孟姣，赖信宏，黄小洪，梁资就，蒋 林，2，3*

(1.广西中医药大学，广西 南宁 530200；2.广西壮瑶药工程技术研究中心，广西 南宁 530200；3.广西高校中药制剂共性技术研发重点实验室，广西 南宁 530200)

壮药调理补虚方由益智仁、补骨脂、乌药、金樱子、覆盆子、黄精、枸杞子、桑椹、芡实、肉苁蓉和炙甘草十一味药组成，诸药合用共奏暖肾祛寒、温脾养肝、缩尿止遗之功，主治肾阳虚、脾肾两虚，下元虚冷之腰膝酸软，尿频遗尿等症，该药在广西扶绥壮族地区临床应用多年，对老年人夜尿症有很好的疗效。老年人夜尿症是老年人临床常见病、多发病，70岁以上老年人的患病率大于60%，严重影响老年人的健康和生活质量，可引发抑郁、认知功能障碍、情绪障碍等症状[4]。目前国内外尚缺少理想而有效的治疗方法，无法满足夜尿症患者的需求，开发治疗夜尿症药物具有较大的应用前景。本研究通过对复方中各药味化学成分和药理作用进行梳理总结，基于中药质量标志物“五原则”——即有效、特有、传递与溯源、可测性和处方配伍对该方全面论述，预测其质量标志物成分，为开发临床有效、工艺合理、质量可控、满足社会需要的医院制剂——壮药调理补虚膏提供理论依据。

1 主要化学成分

现代研究表明，壮药调理补虚方中主要含有黄酮类、多酚类、多糖类、挥发油类、倍半萜等成分。

1.1 黄酮类

壮药调理补虚方中补骨脂、益智仁、金樱子、覆盆子、枸杞子、桑椹和芡实中均含有黄酮类成分，如杨芽黄素、白杨素、良姜素、橙皮苷、金丝桃苷、芦丁、木犀草素、山柰素、槲皮素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、椴树苷、紫云英苷、二氢槲皮素、芹菜素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、4′-O-甲基补骨脂查耳酮、补骨脂色烯查耳酮等[5，20]。

该方中还含有较多的类黄酮-花色苷类成分，如桑椹中含有矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷、矢车菊色素、芍药色素等[21-24]。

1.2 多酚类

壮药调理补虚方中含有较多的多酚类成分，如乌药中含有表儿茶素、原花青素等黄烷醇类多酚[25]；金樱子中含有原儿茶酸、没食子酸、儿茶素[8，26]；覆盆子中含有鞣花酸[10]；枸杞子中含有咖啡酸、阿魏酸、反式肉桂酸等[27-28]；补骨脂中含有补骨脂酚等单帖酚类成分[18]。

1.3 倍半萜类

壮药补虚方中倍半萜类成分多来源于君药益智仁，如圆柚酮、7-表-香科酮、香科酮、12-羟基圆柚酮等[29-31]。

1.4 挥发油类

壮药调理补虚方中含有较多的挥发油成分，如益智仁中主要含有油酸、亚油酸、棕榈酸 (十六烷酸)、香草酸等[30-34]；乌药中含有香樟内酯、(-)-马兜铃烯、β-桉叶油醇等[22，35-36]；芡实中含有棕榈酸、硬脂酸、十五酸、月桂酸、肉豆蔻酸等挥发油成分。

1.5 多糖类

壮药调理补虚方的多糖类成分较多，如金樱子多糖[37]、桑椹多糖[38]、黄精多糖[39]、肉苁蓉多糖[40]。

2 药理作用

中医将夜尿症归属于“肾虚”“遗溺”等范畴，认为其发病与脾肺肝肾密切相关，多属中医肝肾不足、命门火衰、膀胱气化无力等病机，而中医辨证求其根本，应调以肝肾、责以膀胱气化[41]。津液代谢的重要环节是尿液的生成，与肝、脾、肺密切相关，尿液的排泄与膀胱和肾有关，肾阴封藏与肾阳推动作用的平衡发挥着重要作用[42]。由此可见，夜尿症的发生，与肾、肝、脾、肺、膀胱有密切的联系。肾精亏虚，脑髓化生乏源，髓海失充失养，则脑功能发挥失常，出现眩晕耳鸣、痴呆、记忆力减退等记忆障碍[41]。且骨骼的生长有赖于骨髓的滋养，而骨髓为肾精所化，故肾精亏虚，会导致骨质疏松症的发生[43]。因此，夜尿症的发生会间接引起阿尔兹海默和骨质疏松等病症的发生。以下将重点论述壮药调理补虚方在调节膀胱、肝、肾功能，以及改善记忆力和抗骨质疏松方面发挥的作用。

2.1 调节脏腑功能

2.1.1 调节膀胱功能 《素问》有言：“水泉不止者，是膀胱不藏也。” 若下焦湿热，膀胱气化失司，亦如热积膀胱，小便“不禁而频来”，夜间亦如此。因此，膀胱功能失调，会引起夜尿症的发生。通过查阅文献可知，壮药调理补虚方中作用于膀胱发挥缩尿作用的主要为益智仁和乌药。HAN YUN等[44]研究发现，益智仁多糖可通过增加膀胱逼尿肌蛋白激酶A蛋白的表达，降低老年尿失禁大鼠的排尿量，对尿失禁具有较好的治疗效果。龚晓猛等[45]研究发现，益智仁中7-表-香科酮可通过抑制膀胱逼尿肌收缩张力，发挥缩尿作用。谈博等[46]研究发现，乌药提取物可改善膀胱过度活动症大鼠膀胱上皮细胞的生长。综上所述，益智仁多糖、7-表-香科酮以及乌药提取物可作为发挥缩尿作用的药效物质基础。

2.1.2 调节肝功能 《格致余论》曰：“主闭藏者肾也，司疏泄者肝也。”若肝阳亢盛或肝阴虚，阴不制阳，虚火内炎；或肝气郁而化热，而致肝疏泄太过，涉及水津，即肝之疏泄胜于肾之封藏，则肾主水无权而水液失调，即可出现夜尿频数。因此，调节肝功能，可改善夜尿增多的情况。陈益耀等[47]研究发现，益智仁中原儿茶酸和白杨素可通过抗氧化应激减少肝细胞内脂肪滴，对非酒精性脂肪肝细胞起到保护作用。陈方亮等[48]研究发现，乌药醚内酯高剂量可降低CCl4诱导的肝损伤大鼠体内MDA与ALT、AST的浓度，提高SOD和GSH-Px的活力，从而起到护肝作用。有研究表明，补骨脂酚可通过不同的作用机制对肝脏起到保护作用[49-51]。

大量研究表明，多糖类、多酚类及黄酮类成分均具有保护肝脏的作用，如黄精多糖可通过抑制血清中酶的活性，提高抗氧化和抗凋亡作用，对肝脏起到保护作用[52-53]；桑椹花色苷提取物可对酒精性肝病模型发挥改善作用[54]；桑椹花青素提取物能通过调节红细胞相关因子缓解肝细胞损伤[55]；桑椹多糖可改善抗氧化防御系统，发挥出对肝脏的保护作用[56]；芡实多酚类成分可通过调控IRs-1和CYP2E1来消除脂质积累和氧化应激，从而改善非酒精性脂肪肝[57]；山柰酚-3-O-芸香糖苷具有保护肝脏、抗肝毒性作用[58]。综上所述，乌药醚内酯、补骨脂酚、黄精多糖、桑椹多糖、枸杞多糖、桑椹花色苷、桑椹花青素、白杨素、原儿茶酸、芡实多酚类、毛蕊花糖苷、松果菊苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷是具有保肝作用的活性成分。

2.1.3 调节肾功能 隋代巢元方《诸病源候论》有言：“肾气下通于阴，腑既虚寒，不能温其脏，故小便白而多。其至夜尿偏甚者，则内阴气生也。” 指出体内阴寒较胜者，肾与膀胱阳气虚衰更甚，在“小便白而多”基础上则可见夜尿频数、小便清长，故肾功能失调可引起夜尿症的发生。通过查阅文献可知，壮药调理补虚方中多糖类和黄酮类成分为改善肾功能的主要有效成分。苏上贵等[59]研究发现，金樱子多糖可增加TRPV5的表达，改善肾小管重吸收功能，恢复肾功能。籍艳秋等[60]研究发现，覆盆子中正丁醇可改善氢化可的松所致的小鼠肾阳虚症状，研究还发现可从覆盆子有效部位中分离出覆盆子素、山柰酚、槲皮素等有效物质成分。肖小妹等[61]研究发现，黄精多糖可增加红细胞免疫功能，改善儿童肾病综合征的蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症和水肿的症状。王忠彦等[62]研究发现，甘草酸可提高ConA所致急性肾损伤大鼠肾组织中白细胞介素-25 (IL-25)，从而下调巨噬细胞TLR4的表达，改善肾脏功能。综上所述，黄精多糖、金樱子多糖、覆盆子素、山柰酚、槲皮素、甘草酸等，可能是改善肾功能的活性成分。

2.2 对夜尿症引起的并发症的影响

2.2.1 保护神经 《内经精义》指出：“事物之所以不忘赖此记性，记在何处，则在肾精。盖肾生精化为髓而藏之于脑中。”由此可见，肾虚会导致健忘、记忆力衰退的症状[63]。通过查阅文献可知，壮药调理补虚方中挥发油类、黄酮类、苷类和多糖类为保护神经的主要有效成分。益智仁中的挥发油、圆柚酮、原儿茶酸均可改善学习和记忆障碍[64-68]；补骨脂中的补骨脂素可改善阿尔茨海默病症状[69，70]；覆盆子中的覆盆子黄酮具有抗阿尔兹海默证的作用[71]；覆盆子中槲皮素和山柰酚对损伤的细胞具有保护作用，初步说明黄酮类成分可改善学习记忆功能[72]；桑椹中的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷可提高大鼠的记忆力[73]；肉苁蓉中肉苁蓉多糖以及毛蕊花糖苷可保护D-半乳糖致衰小鼠的脑神经细胞[74-75]。综上所述，圆柚酮、原儿茶酸、白杨素、补骨脂素、槲皮素、山柰酚、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、毛蕊花糖苷等，具有保护神经功能的药效物质基础。

2.2.2 抗骨质疏松 《医经精义》载：“肾藏精，精生髓，髓生骨，故骨者肾之所合也。髓者肾精所生，精足则髓充，髓充者则骨强。”由此可见，肾虚导致的夜尿症亦可引发骨质疏松症[43]。通过查阅文献可知，壮药调理补虚方中多糖类、黄酮类、苷类成分为抗骨质疏松症的主要有效成分。王军等[76]研究发现，补骨脂中异补骨脂素具有抗骨质疏松的作用。龚剑秋等[77]研究发现，覆盆子覆盆子素A、覆盆子素B可抑制破骨细胞活性以及骨吸收，山柰酚、槲皮素可刺激成骨细胞的活性。王延涛等[78]通过网络药理学筛选，发现肉苁蓉中毛蕊花糖苷等13个主要成分可通过成骨分化特异性转录分子2 (RUNX2)等靶点，WNT (Wingless/Integrated)、VEGF、TNF等信号通路治疗骨质疏松。王琳琳等[79]研究发现，肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷可通过刺激产生雌激素，从而对骨质疏松发挥治疗和预防作用。综上所述，异补骨脂素、覆盆子素A、覆盆子素B、山柰酚、槲皮素、肉苁蓉多糖、松果菊苷、毛蕊花糖苷等，具有发挥抗骨质疏松作用的药效物质基础。

2.3 其他

壮药调理补虚方还具有抗肿瘤、抗疲劳、改善更年期的作用，其中倍半萜类、多糖类、黄酮类和苷类为主要有效成分。刘自尧等[80]研究发现，乌药中异乌药内酯可通过线粒体途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡，且这种诱导作用呈时间和剂量依赖性。黄俞龙等[81]从金樱子中分离纯化出多糖以及芦丁和槲皮素两种黄酮类化合物，这些化合物均可抑制人类肝癌细胞BEL-7402的增殖，初步证明金樱子多糖和黄酮类化合物具有抗肿瘤作用。KWOK CHUI CHENG等[82]采用桑椹水提物作用于二乙基亚硝胺(DEN)诱导肝肿瘤大鼠模型，发现肿瘤变小。闫磊等[83]研究发现，肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰老小鼠可产生抗疲劳的作用。张娜娜[84]研究发现，肉苁蓉多糖可改善内分泌，发挥改善更年期症状的作用。张涛等[85]研究发现，肉苁蓉多糖和松果菊苷可干扰K562白血病细胞的细胞周期，从而抑制细胞的生长，最终发挥抗白血病的作用。

3 质量标志物的预测分析

3.1 基于质量传递与溯源的质量标志物预测分析

以壮药补虚调理方中的十一味药材作为关键词，通过TCMSP(https：//tcmspw.com/tcmsp.php)数据库，根据药物动力学筛选条件“OB≥30%，DL≥0.18” 进行检索，共筛选出247个活性成分；其中益智中有34个成分、黄精中有14个成分、覆盆子中有12个成分、桑椹中有6个成分、肉苁蓉中有6个成分、枸杞子中有58个成分、金樱子中有14个成分、芡实中有2个成分、乌药中有9个成分、甘草中有92个成分，由于在TCMSP数据库中未载入补骨脂的相关成分，但是通过ETCM(http：//www.tcmip.cn/ETCM/)数据库发现补骨脂含亚油酸、补骨脂素、异补骨脂素、胡萝卜苷等42个成分。

由于中药里面真正发挥药效的活性成分与其他固有成分存在不同，因此只有从血中发现直接作用的活性物质才能真正揭示中药临床疗效的药效物质基础[86]。本研究通过调研“中国知网”“维普”“万方”等数据库，结果发现尚未有将壮药调理补虚方作为一个整体复方的入血成分的研究报道，同时此部分研究内容也是本课题组正在进行研究的内容。因此，可选取对壮药调理补虚方中各单味药体内入血成分或者在其他复方中可能的入血成分，作为质量标志物的预测分析基础。秦子飞[87]研究发现，中药复方“仙灵骨金葆”大鼠给药后入血成分补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂苷、异补骨脂苷等可归属于补骨脂；李梦琪[88]通过研究缩泉丸大鼠入血成分，发现益智仁中含有圆柚酮、7-表-香科酮、杨黄芽素、白杨素、益智醇、益智酮甲及其代谢成分11，1-二羟基圆柚酮等有效成分；许飞等[89]通过灌胃大鼠实验，发现楼桂枝汤中甘草可能发挥入血作用的成分含有黄酮类化合物，包括甘草苷、芒柄花苷、甘草素及三萜类成分，如甘草酸、甘草次酸等；颜昱[90]对中药肉苁蓉进行了体内成分分析，结果表明肉苁蓉中毛蕊花糖苷、松果菊苷、异毛蕊花糖苷、肉苁蓉苷F、咖啡酸等17个成分以原型成分出现于血浆中；林秀莲[91]通过研究补肾强身片血中移行成分，发现金樱子中原儿茶酸以原型成分形式存在；王玲[92]对右归丸入血成分进行研究，发现甜菜碱、原儿茶酸和原儿茶醛为方中枸杞子的入血成分。

3.2 基于成分特有性的质量标志物预测分析

益智仁为姜科植物益智AlpiniaoxyphyllaMiq.的干燥成熟果实，药典规定益智仁挥发油为含量测定指标性成分。益智仁中主要含有倍半萜类、单萜类、二萜类、二苯庚烷类、黄酮类、简单芳香族化合物及脂肪族化合物，其中圆柚酮、7-表-香科酮等倍半萜类为其特征性成分[93]。

乌药为樟科植物乌药Linderaaggregata(Sims) kosterm.的干燥块根，药典规定乌药醚内酯和去甲异波尔定为指标性成分。乌药主要成分为呋喃倍半萜及内酯、挥发油、黄酮类、异喹啉生物碱类等，其中包含一些主要且特殊的成分，如乌药醚内酯、去甲异波尔定等[94]。

补骨脂为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的干燥成熟果实，药典规定补骨脂素和异补骨脂素为指标性成分。补骨脂属共有130种植物，我国仅补骨脂一种有分布。补骨脂主要成分为香豆素及苯并呋喃类、黄酮类、单萜酚类等，具有多种生物活性[95]。

金樱子为蔷薇科植物金樱子RosaLaevigataMichx.的干燥成熟果实，药典规定金樱子多糖为指标性成分。金樱子中主要成分为多糖类、黄酮类和三萜类等[96]。

覆盆子为蔷薇科植物华东覆盆子RubuschingiiHu的干燥果实，药典规定鞣花酸和山柰酚-3-O-芸香糖苷为其指标性成分。覆盆子中有效成分主要包括黄酮类、萜类、甾醇、挥发油、氨基酸等，其中覆盆子素、葡萄糖苷、山柰酚和槲皮素等均具有多种生物活性[97]。

黄精为百合科植物滇黄精PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.、黄精PolygonatumsibiricumRed.或多花黄精PolygonatumcyrtonemaHua 的干燥根茎，药典规定黄精多糖为其指标性成分。黄精主要成分包括多糖类、皂苷类、黄酮类、挥发油、氨基酸等，其中黄精多糖和三萜皂苷类毛地黄皂苷、薯蓣皂苷以及菝葜皂苷为其主要有效成分[98]。

枸杞子为茄科植物宁夏枸杞LyciumbarbarumL.的干燥成熟果实，药典规定枸杞多糖和甜菜碱为其指标性成分。枸杞子中主要有效成分包括黄酮类、挥发油类、生物碱类和氨基酸类等，其中绿原酸、芦丁、槲皮素以及山柰酚等成分在枸杞子中含量最高[99]。

桑椹为桑科植物桑MorusalbaL.的干燥果穗，桑椹主要成分包括黄酮类、多糖类、花色苷类等，其中矢车菊-3-O-芸香糖苷、天竺葵-3-O-芸香糖苷、矢车菊-3-O-葡萄糖苷和天竺葵-3-O-葡萄糖苷等花色苷类具有广泛的药理活性[100-101]。

芡实为睡莲科植物芡EuryaleferoxSalisb.的干燥成熟种仁，芡实主要成分为木脂素类、脑苷脂类、生育酚类、环二肽、多酚类和黄酮类，其中山柰酚、没食子酸、槲皮素、芦丁等具有多种药理活性[102]。

肉苁蓉为列当科多年生草本寄生植物荒漠肉苁蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma和管花肉苁蓉C.tubulosa(Schenk) Wight干燥带鳞叶的肉质茎，药典规定松果菊苷和毛蕊花糖苷为其指标性成分。肉苁蓉主要有效成分包括苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、木脂素类成分等[103]，其中苯乙醇苷类是列当科的代表性成分，也是发挥药效的基础物质，仅存在于列当属、肉苁蓉属和草苁蓉属中，且肉苁蓉属中含量最高，因此苯乙醇苷类成分专属性较强[104]。

炙甘草为豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch、胀果甘草GlycyrrhizainflataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根和根茎，药典规定甘草苷和甘草酸为其指标性成分。甘草中主要有效成分包括黄酮类、三萜类、生物碱类和糖类等[105]。

通过以上总结可知，总多糖类、总黄酮类、萜类、香豆素类、花色苷类、苯乙醇苷类、挥发油类为壮药调理补虚方的主要成分，可作为基于成分特有性的质量标志物的预测首选。

3.3 基于成分与药效的相关质量标志物预测分析

据前文可知，益智仁多糖、7-表-香科酮具有缩尿作用；黄精多糖、金樱子多糖、覆盆子素、山柰酚、槲皮素、甘草酸可对肾脏起保护作用；补骨脂酚、乌药醚内酯、黄精多糖、桑椹多糖、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、花青素、原儿茶酸、白杨素、毛蕊花糖苷和松果菊苷可改善肝功能；圆柚酮、原儿茶酸、白杨素、补骨脂素、槲皮素、山柰酚、毛蕊花糖苷、肉苁蓉多糖、肉苁蓉苷具有保护神经的功效，可提高记忆力，改善学习记忆障碍。异补骨脂素、覆盆子素A、覆盆子素B、山柰酚、槲皮素、松果菊苷、毛蕊花糖苷、益母草碱、京尼平酸等可延缓骨质疏松；松果菊苷可抗白血病；肉苁蓉多糖可抗疲劳、改善更年期症状、抗白血病；山柰酚-3-O-芸香糖苷具有保护肝脏和神经系统的作用。

因此，益智仁中益智仁多糖、7-表-香科酮、圆油酮、原儿茶酸、白杨素；补骨脂中补骨脂酚、补骨脂素、异补骨脂素；乌药中乌药醚内酯、异乌药内酯；金樱子中金樱子多糖；覆盆子中覆盆子素、山柰酚-3-O-芸香糖苷；肉苁蓉中肉苁蓉多糖、毛蕊花糖苷、松果菊苷、肉苁蓉苷、益母草碱、京尼平酸；黄精中黄精多糖；芡实中山柰酚、槲皮素、芦丁；甘草中甘草酸；桑椹中桑椹多糖、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、花青素；甘草中甘草酸等，可作为与药效相关的质量标志物预测分析的首选成分。

3.4 基于配伍原则的质量标志物预测分析

壮药调理补虚方中君药盐益智仁能暖肾温脾、固精缩尿；盐益智仁中益智仁多糖、7-表-香科酮具有调节膀胱功能的作用；原儿茶酸和白杨素具保肝作用；圆柚酮、原儿茶酸具保护神经的作用。君药补骨脂温肾助阳、纳气平喘、温脾止泻，补骨脂酚具保肝作用，补骨脂素可保护神经，异补骨脂素有抗骨质疏松作用。乌药行气止痛、温肾散寒，能除膀胱和肾间冷气，止小便频数；金樱子固精缩尿；覆盆子益肾固精缩尿，三药能收涩固肾、温下焦虚寒以辅助君药加强治疗肾虚之下元虚冷，共为臣药。乌药醚内酯具保肝作用，金樱子多糖、覆盆子素A、覆盆子素B、山柰酚、槲皮素可改善肾功能，抗骨质疏松。黄精补脾气、益脾阴、益肾精；枸杞子滋补肝肾，益精血；桑椹滋阴补血，生津润燥，三药均具滋肾阴之效，在补阳之中配伍补阴药，意在“阴中求阳”，可协助君药补肾暖脾并滋补肝肾而强筋骨、温腰府，缓解腰膝酸软等证；芡实益肾固精，且可健脾；肉苁蓉具有补肾阳、益精血、润肠通便的功效；以上五药共为佐药。黄精多糖、桑椹多糖、桑椹花色苷和花青素、芡实多酚类及肉苁蓉中毛蕊花糖苷、松果菊苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷具保肝作用；桑椹中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷改善记忆力；松果菊苷、毛蕊花糖苷、益母草碱、京尼平酸可抗骨质疏松；黄精多糖和皂苷可改善肾功能；甘草酸可改善肾功能，甘草益气补中、调和药性，诸药合用共为使药。根据以上分析，上述成分可作为基于配伍原则的质量标志物预测的首选成分。

3.5 基于可测性相关质量标志物的预测分析

紫外分光光度计可检测总多糖的含量[106]，采用HPLC法可测定盐益智仁中白杨素[107]和圆柚酮[108]，补骨脂中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚[18]，金樱子中槲皮素、山柰酚的含量[109]，覆盆子中山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚的含量[110]，黄精中薯蓣皂苷元、槲皮素及山柰酚的含量[111]，甘草中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸、甘草酸铵等成分的含量[112]。 采用UPLC-Q-TOF-MS法可测定益智仁中原儿茶酸、白杨素、山柰素、杨芽黄素、圆柚酮等成分的含量[113]，乌药中乌药醚内酯、去甲异波尔定等成分的含量[25]，桑椹中天竺葵-3-O-葡萄糖苷、氯化芍药素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊-3-O-芸香葡萄糖苷、锦葵色素-3-5-二葡萄糖苷、矢车菊-3-O-葡萄糖等成分的含量[114]。采用UPLC法可测出松果菊苷、肉苁蓉苷A、毛蕊花糖苷、管花苷A、异毛蕊花糖苷、2'-乙酰毛蕊花糖苷和管花苷B等成分的含量[115]。经过临床研究发现，壮药调理补虚方的水提液为治疗夜尿症的有效物质，而不溶于水的乌药醚内酯、圆油酮，以及山柰酚、槲皮素、芦丁等存在于多个药材中，专属性不强，因此不能作为质量标志物的首选成分。

在壮药调理补虚方质量标准物预测分析的过程中，虽然方中有许多成分，但经过分析发现，部分成分不可测，或无专属性和药效相关性，故而需要选取成分特有，与壮药调理补虚方药效有关联且便于检测的化合物。综上所述，壮药调理补虚方中多糖(益智仁多糖、金樱子多糖、黄精多糖、枸杞多糖、肉苁蓉多糖、桑椹多糖)、原儿茶酸、白杨素、补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚、山柰酚-3-O-芸香糖苷、松果菊苷、毛蕊花糖、甘草酸等成分均可以作为该方初步质量预测分析的标志物。见表1。

表1 壮药调理补虚方的质量标志物信息

4 结语

壮药调理补虚方是以广西壮族自治区壮族民间常用验方为基础研制的药方，全方重在调理肾、脾、肝三脏，诸药合用共奏暖肾祛寒、温脾养肝、缩尿止遗之功，主治肾阳虚、脾肾两虚、下元虚冷之腰膝酸软、尿频遗尿等症。组方符合壮医药主帮带原则，药味虽然较多，但不杂乱，立法严谨，选药适当，处方水提液经多年临床观察和动物实验，结果表明治疗效果良好，未见毒副反应。但是作为民间验方，尚未有研究将壮药调理补虚方作为一个整体复方进行研究，本课题组也正在将壮药调理补虚方作为整体复方进行质量标准、血清药物化学等一系列研究，因此本研究的质量标志物初步分析为本课题组的整体复方研究提供了理论基础，同时也为建立壮药补虚调理膏质量控制及质量溯源体系提供了参考依据。