羊快疫诊断与防治

毛志福，马亚楠

（昌吉州农产品质量安全中心，新疆 昌吉 831100）

0 引言

我国是畜牧业大国，养羊业在青海、新疆等牧区是一个重要的经济产业，但由于缺少规模化养殖，养殖密度高，卫生环境差，各种疫病时常爆发，对养殖户造成巨大的经济损失。羊快疫作为一种常见的羊类疫病，虽然已有了成熟的商品化疫苗，但该病在我国的主要羊养殖地区仍然广泛流行。

1 羊快疫及腐败梭菌

1.1 腐败梭菌简介

腐败梭菌属于梭菌属，是一种厌氧杆状革兰氏阳性菌，可产生高致病的外毒素，可存在于多种自然环境中，如土壤、海洋、污水、腐烂和生锈的制品，以及动物胃肠道及分泌物中。引起绵羊和牛在内的多种反刍动物的化脓性坏死性脂肪瘤及禽类的坏疽性皮炎和蜂窝组织炎。该菌可产生包括α毒素、β毒素、γ毒素、δ毒素、神经氨酸酶、血凝素、几丁质酶、弱脂肪酶活性和唾液酸酶等多种有毒产物[1]。

1.2 羊快疫简介

羊快疫又称羊腐败梭菌病，是由腐败梭菌引起的一种急性、恶性传染病，该病发病急、病程短、死亡快，往往来不及发现便引起患畜死亡，给养殖业造成巨大的经济损失。该病在我国很多地区广泛流行，但在青海、新疆等养羊较多的畜牧地区更为常见，且致死率很高可到50%。腐败梭菌感染无种属特异性，其可感染多种反刍动物，但对绵羊的感染能力最强，其中尤其是6～18月龄的绵羊更为易感。腐败梭菌是一种条件性致病菌，可以芽孢体的形成分布于水、土壤、潮湿的草地和被污染的饲料等低洼潮湿的地区，羊通过采食或者饮水摄入腐败梭菌，进而帮助其定居于健康动物的消化道内。当动物的肠道菌群失调、寄生虫感染或炎性反应导致中性粒细胞减少进而导致腐败梭菌感染[2]。

1.3 临床症状

与其他多种细菌性疾病相似，羊快疫发病无特征性的临床症状，发病初期病羊的食欲下降，采食减少或废绝，呼吸困难，腹痛呻吟，进而出现运动障碍，卧地不起并很快死亡。病羊死亡后，由于细菌的大量增值，可见尸体迅速腐败，腹部肿胀，部分患病羊可见到口腔或者鼻腔内流出红色的泡沫状液体。

1.4 病理变化

对病死羊进行剖检可观察到大网膜有弥漫性的出血，腹腔内有大量的积液和血凝块，肝脏肿大破裂，呈土黄色，并有点状出血，心包积液呈胶冻状，心肌变性坏死，左心室内膜有大量的点状出血，胆囊肿大。全身淋巴结肿大。消化道病变更为明显，皱胃及十二指肠有块状出血，胃幽门区域及十二指肠幽门段有出血及坏死。

2 诊断

2.1 病原分离培养

羊快疫鉴定的传统方法是对病原分离物进行培养、鉴定和进行致病性实验，无菌采集病死羊的肝、脾等实质脏器或腹腔积液，接种于葡萄糖琼脂鲜血培养基，置于37 ℃厌氧培养箱培养36 h，待长出单个菌落，可观察到菌落边缘不整齐且可产生溶血环。将单个菌落进行革兰氏染色镜检可发现大量的单个分布或首位相连的革兰氏阳性杆菌。将分离好的纯培养物进行生化鉴定，生化结果为葡萄糖+、麦芽糖+、水杨苷+、乳糖+、甘露醇-、卫矛醇-、蔗糖-，牛乳产酸凝固、过氧化氢-。为了快速鉴定，也可将病死羊的肠内容物静脉注射小鼠，同时设置高温处理肠内容物的小鼠对照，如实验组小鼠在20 min内死亡，而对照组小鼠健康存活无异常，可初步判定为腐败梭菌感染所导致的羊死亡[3]。

2.2 PCR检测

随着分子生物学的快速发展，新的研究技术也被应用到羊快疫疫病的诊断中，有研究人员通过分析比对不同梭菌的基因组序列，建立了基于α毒素的特异性鉴定引物，成功建立了能鉴别诊断产气荚膜梭菌或气肿疽梭菌和腐败梭菌的双重PCR检测方法。该方法较传统方法灵敏度更高，特异性更强，所需时间更短且不需要进行动物致死性实验，成本也较低，适用于在基层兽医站或养殖类企业广泛的推广。

2.3 实时荧光定量PCR检测

研究人员根据细菌的常用鉴定基因16SrRNA和16S-23SrRNA基因间隔区或鞭毛蛋白基因建立腐败梭菌的检测方法。但由于PCR扩增后检测期间可能对扩增子造成污染，常规PCR具有产生假阳性结果的潜在风险。后续研究人员又建立实时荧光定量PCR检测方法进而鉴别诊断腐败梭菌和气肿疽梭菌感染。该方法检测时间更短，且假阳性率低，但样品处理和操作需要专业的设备和实验室操作人员。更适用于实验室的流行病学调查检测，对于基层兽医站和畜牧类企业，由于缺少专业的设备和人员，该方法并不是十分可效。

3 羊快疫常用疫苗

3.1 灭活疫苗

目前常用的商品化羊快疫疫苗主要为多价的细菌灭活苗，通常是选择地方流行菌株传代培养后加入适当的灭活剂进行灭活，然后与其他灭活病原混合并加入适当的免疫佐剂，进而免疫易感动物。目前常用的商品化疫苗有联合梭状芽胞杆菌、羊梭菌病四防疫苗、羊厌氧梭菌疫苗、羊水肿梭菌和腐败梭菌的黑疫快疫五联混合苗，羊快疫、羊肠毒血症、羊猝狙三联疫苗，羊快疫、羊肠毒血症、羊猝狙五联疫苗或羊快疫、羔羊痢疾和羊肠毒血症灭活四联疫苗。

3.2 亚单位疫苗

腐败梭菌是一种革兰氏阳性菌，其在复制过程中会分泌许多有致病作用的毒素类物质，其中α毒素不仅是其一种重要的外毒素，也是腐败梭菌重要的免疫原蛋白。由研究人员通过纯化腐败梭菌培养物中的α毒素，使用福尔马林将α毒素进行灭活制备类毒素并与铝磷酸盐凝胶体佐剂混合制备一种α类毒素疫苗。动物实验证明该疫苗可很好地刺激机体产生抗毒素并抵抗腐败梭菌芽孢的攻击，但研究还处于实验室阶段，距离商品化应用还有许多工作要做。

4 防控与治疗

4.1 饲养管理与防控

为有效地预防羊快疫，除要对羊进行定期免疫接种外，同时也需要加强饲养管理和防控措施。在饲养中，避免将养殖场低选在低洼潮湿易寄生腐败梭菌的区域，避免羊采食腐败的饲草和饮水，同时做好保暖工作避免羊受寒应激导致机体应激抵抗力下降。在发现羊中有疑似病例暴发时应将发病动物紧急隔离，并对死亡的病羊进行无害化处理和深埋，同时使用3%福尔马林对饲养羊的圈舍和使用的工具进行紧急消毒。

4.2 药物治疗

当羊中出现疑似病例时，可采用药物进行紧急治疗，如对同羊中的健康个体紧急免疫羊快疫疫苗，同时对羊投喂2%硫酸铜。可有效控制羊快疫疫情的进一步扩大。也可对发病羊肌肉注射羊快疫高免血清和抗生素头孢噻呋钠，同时对其他圈舍羊肌肉注射青霉素进行预防。

5 结束语

羊快疫在我国牧区仍然广泛流行，养殖户要合理饲养，对羊进行科学免疫，掌握羊快疫的病原及诊断，避免羊与腐败梭菌污染物的接触，对疑似患病羊及时隔离、诊断并治疗，有效控制该疾病的爆发，降低经济损失。