多种有机磷农药在GC和GC-MS/MS中的回收率对比研究

郑乐涛，李 琰，赵迎春，李国富，胡嘉敏

（鹤山市农产品质量监督检验测试中心，广东 鹤山 529700）

追求高效、准确、简便的农残检测技术和方法，是每个农残检测实验室努力的方向。在农残检测中，前处理方法和检测仪器设备是检测过程重点中的重点，应深入研究和改善。早些年，农检实验室引入的第一台大型检测设备多为气相色谱仪（GC）[1]，因其性能稳定，操作和维护较为简单，被从业者所青睐；农残检测一般运用《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》（NY/T 761-2008）的前处理方法[2]。近段时间，更为先进的三重四极杆气质联用仪（GC-MS/MS）[3]越来越被农检实验室采购使用，普及率逐步提高，多运用《食品安全国家标准植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定气相色谱-质谱联用法》（GB 23200.113-2018）中QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）[4]前处理方法。

本次试验选取的试验基质品种为冬瓜和柑。在我国，冬瓜种植面积大，消费量大，是餐桌上的常见农产品；而柑在南方地区种植居多，其不仅可以新鲜食用，还可以后期深加工为其他干制类产品。选取这两种果蔬，具有较好的代表性和现实意义。通过添加甲胺磷、乙酰甲进行研究胺磷、甲拌磷、毒死蜱、甲基对硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷、乐果、杀螟硫磷这10种有机磷农药，进行方法和仪器对比研究，根据试验结果，验证其差异。

1 材料和方法

1.1 试剂和耗材

甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、毒死蜱、甲基对硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷、乐果、杀螟硫磷标准溶液（100 μg/mL）、乙腈（色谱纯）、硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠、乙

二胺-N-丙基硅烷化硅胶、丙酮（色谱纯）、乙酸乙酯（色谱纯）、滤膜（0.2 μm，有机溶剂膜）、陶瓷均质子。

1.2 设备

三重四极杆气质联用仪（型号：Agilent 8890-7000D）、气相色谱仪（型号：Agilent 7890B）、电子天平（型号：梅特勒托利多ME4002E）、离心机（型号：天美VELOCITY18R）、匀浆机（型号：天津恒奥HFJ-10）、水浴氮吹仪（型号：北京成萌伟业CM-24）、组织捣碎机（日本松下MX-151SG1）、漩涡振荡器（型号：德国IKA MS3 control）。

1.3 主要设备运行条件

气相色谱仪Agilent7890B运行条件：气体流量：载气20 mL/min、氢气100 mL/min、空气80 mL/min、加热温度：柱温50℃～280℃、进样口200℃、检测器240℃。

检测器类型：FPD色谱柱：DB-1701P。

三重四极杆气质联用仪Agilent7000D运行条件：气体流量：1.2 mL/min、加热温度：柱温60℃～310℃、进样口280℃、接口280℃、离子源280℃、质谱类型：MSD色谱柱：HP-5MS UI。

两部设备运行良好，状态正常。

1.4 试验基质样品

冬瓜、柑（市场购买），各3 kg。

2 试验步骤

2.1 样品前处理

2.1.1 试验样品制备

将冬瓜和柑分别按以下方法制备：去柄，取全瓜或全果，切碎后，用四分法缩分，用组织捣碎机打成浆状，封装标记后备用。

2.1.2 试验样品农药添加

对试验样品进行农药添加，称量数量和农药添加情况见表1。

表1 试验样品农药添加浓度情况表Tab.1 The pesticide addition concentration of experimental samples

2.1.3 试验样品提取和净化

（1）NY/T 761—2008第1部分方法二的提取和净化方法[5]：在称量好的25 g试样中加入50 mL的乙腈，通过匀浆机匀浆2 min，过滤到装有6 g氯化钠的具塞量筒中，手压紧具塞量筒剧烈震荡1 min后静置30 min，使乙腈相和水相分层。静置结束后，用刻度吸管吸取10 mL上层乙腈溶液，放入烧杯中，将烧杯放置在80℃的水浴氮吹仪中氮吹，蒸发至近干，加入2 mL丙酮，转移至玻璃离心管，并用3 mL丙酮冲洗烧杯，再继续转移至玻璃离心管，定容至5 mL，漩涡混匀后用有机膜过滤到检测样品小瓶，约1 mL。

（2）GB 23200.113—2018 QuEChERS的提取和净化方法[6]：称量10 g试样置于50 mL的离心管中，加入10 mL的乙腈，再加入0.5 g柠檬酸氢二钠、1 g氯化钠、4 g硫酸镁、1 g柠檬酸钠和一颗陶瓷均质子。剧烈振荡1 min，离心5 min（4 200 r/min）。准确吸取6 mL上清液到15 mL离心管中，加入885 mg硫酸镁、150 mg乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶，旋涡1 min，再离心5 min（4 200 r/min），用刻度吸管吸取2 mL上层清液于试管中，放置在40℃的水浴氮吹仪中氮吹，蒸发至近干，加入1.0 mL乙酸乙酯，漩涡混匀后用有机膜过滤到检测样品小瓶，约0.8 mL。

2.2 标准溶液配制

将浓度为100 μg/mL的甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、毒死蜱、甲基对硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷、乐果、杀螟硫磷，用丙酮稀释配制至10 μg/mL，再分别用2.1.3制备出来的冬瓜和柑基质[7]，稀释配制成这10种农药的混合标准工作溶液，浓度分别为0.005 μg/mL、0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1 μg/mL。

2.3 上机检测

按试剂空白、试样、混合标准工作溶液（基质）的顺序在气相色谱仪（GC）和三重四极杆气质联用仪（GC-MS/MS）检测。

3 试验结果与分析

3.1 定量的线性关系

在气相色谱仪（GC）上0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL系列浓度混合标准工作溶液，在三重四极杆气质联用仪（GC-MS/MS）上0.005 μg/mL、0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL系列浓度混合标准工作溶液，绘制标准曲线。从表2中可以看出，两种方法的10种有机磷农药的线性相关系数均＞0.990，线性关系良好。

表2 线性方程和相关系数Tab.2 The linear equation and correlation coefficient

3.2 冬瓜基质的回收率和精密度

冬瓜基质下，两种方法的不同添加浓度的回收率和精密度情况见表3。

表3 两种方法的回收率和精密度（冬瓜基质）Tab.3 The recovery rate and precision of the two methods(wax gourd matrix)

总体数据为：GB 23200.113—2018 QuEChERS法的回收率在47.0%～120.0%，总体平均回收率为79.6%，精密度在2.5%～8.3%。NY/T 761—2008第1部分方法二的回收率在43.0%～106.0%，总体平均回收率为77.7%；精密度在0.8%～5.1%。

对分析部分异常试验数据可知，添加浓度为0.01 mg/kg的各种农药回收率起伏较大，精密度较大；GB 23200.113—2018 QuEChERS法中的甲拌磷的回收率较低，NY/T 761—2008第1部分方法二的丙溴磷、毒死蜱、甲胺磷回收率偏低；其他农药的回收率均能落在60.0%～100.0%的理想区间且精密度良好。

总体分析可知，两种方法的回收率差别不大。

3.3 柑基质的回收率和精密度

柑基质下，两种方法的不同添加浓度的回收率和精密度情况见表4。

表4 两种方法的回收率和精密度（柑基质）Tab.4 The recovery and precision of the two methods(citrus matrix)

总体数据为：GB 23200.113—2018 QuEChERS法的回收率在51.0%～120.0%，总体平均回收率为76.9%；精密度在2.3%～9.8%。NY/T 761—2008第1部分方法二的回收率在45.0%～102.0%，总体平均回收率为77.6%；精密度在0.9%～6.2%。

对部分异常试验数据进行分析可知，添加浓度0.01 mg/kg的各种农药回收率起伏较大，精密度较大；GB 23200.113—2018 QuEChERS法中的甲胺磷、甲拌磷的回收率偏低；其他农药的回收率均能落在60.0%～100.0%的理想区间且精密度良好。

总体分析可知，NY/T 761—2008第1部分方法二的回收率稍微好一些。

4 结论

通过10种有机磷农药运用NY/T 761—2008第1部分方法二和GB 23200.113—2018 QuEChERS法分别在GC和GCMS/MS得出的数据和分析结果可知，两种试验方法在冬瓜和柑这两种果蔬基质上NY/T 761—2008第1部分方法二的回收率稍高一点，两种方法的精密度均符合试验要求。但GB 23200.113—2018 QuEChERS法所用试剂较安全，操作较简便，高效，GC-MS/MS的样品检测时间较短。希望以后通过众多科研人员对GB 23200.113—2018 QuEChERS法在GC-MS/MS上进行不断摸索、研究、优化、改进，逐步提高农药回收率，为农残检测探索出一种优良的试验路径。