肠道病毒在反复呼吸道感染住院患儿中的分子流行病学意义

王 欣，李 宁

(开封市儿童医院，河南 开封 475000)

呼吸道感染是儿童常见病症，也是导致5岁以下婴幼儿死亡的重要原因[1]。其中反复呼吸道感染(Recurrent respiratory tract infections, RRTI)是儿科常见的呼吸道感染[1]。反复呼吸道感染定义是指一年内上呼吸道感染超过一定次数。呼吸道常见感染病原种类多样，由副流感嗜血杆菌等社区获得性肺炎感染，由铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌等医源获得性肺炎感染，白色念珠菌和曲霉菌所致真菌感染。儿童的呼吸道感染病原与成人的呼吸道感染病原存在明显差异，病毒感染是儿童呼吸道感染常见的病原，其中人肠道病毒HEV是导致儿童呼吸道感染的主要致病病毒，根据遗传物质常见致病肠道病毒HEV属于RNA类病毒[1，2]。本研究以反复呼吸道感染的患儿为对象，通过进行肠道病毒感染流行病学研究，为儿科相关疾病的预防和治疗提供参考依据。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选择2018年12月～2020年10月在开封市儿童医院治疗的反复呼吸道感染的儿童406例。患儿均符合中华医学会儿科学分会呼吸学组联合《中华儿科杂志》编辑委员会在2007年修订的《反复呼吸道感染诊断参考标准》：反复上呼吸道感染：0～2岁每年上呼吸道感染次数大于7次，3～5岁大于6次，6～14岁大于5次；反复下呼吸道感染：0～2岁每年反复气管支气炎大于3次或反复肺炎大于2次，3～14岁反复气管支气管炎大于2次或反复肺炎大于2次。家属已签知情同意书。

患儿一般资料收集包括一年内呼吸道感染次数，症状，实验室检查结果，影像学检测结果等。采集患儿入院当天鼻咽分泌物，放置存在RNA保护液的离心管中，置于4℃保存。

1.2 方法

1.2.1 病毒RNA提取 使用QIAGEN的QIAamp Viral RNA Kit试剂盒提取样品中的病毒RNA，操作严格按说明书进行，去除人rRNA，提取病毒总RNA后，使用Qbuit进行提取。

1.2.2 RT-PCR检测病毒 使用TaKaRa的RT-PCR试剂盒进行检测，操作严格按说明书进行。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 患儿一般资料

入组患儿一般资料如下：男：女为1.1∶1，年龄分布：1～2岁126例(31.0%)，3～5岁235例(57.9%)，6～14岁45例(11.1%)。反复呼吸道感染易感因素：营养素缺乏203例(50.0%)，被动吸烟264例(65.0%)，药物使用不当340例(83.7%)，集体生活347例(85.5%)，早产174例(42.9%)。

2.2 肠道病毒检测结果

406例中单一病毒检出阳性的268例(66.0%)，两种及两种以上病毒检出阳性的96例(23.6%)。肠道病毒HEV检出21例(5.2%)，其中肠道病毒HEV-D68 15例(71.4%)，丙型肝炎病毒CV-B1 1例(4.8%)0，丙型肝炎病毒CV-B4 1例(4.8%)，肠道病毒HEV-C117 1例(4.8%)，肠道病毒HEV-A71 1例(4.8%)，ECV 2例(9.6%)。

2.3 肠道病毒的临床特点

21例肠道病毒感染的患儿中，男：女为1.1∶1，年龄中位数2岁1月，易感因素：营养素缺乏12例(57.1%)，被动吸烟9例(42.9%)，药物使用不当4例(19.0%)，集体生活5例(23.8%)，早产9例(42.9%)。

3 讨论

反复呼吸道感染是儿科常见疾病，给患儿及患儿家庭带来心理和经济负担。反复呼吸道感染的主要发病机制之一是呼吸道免疫屏障破坏，病毒感染与调节性T细胞存在联系。肠道病毒感染后诊断主要依赖于荧光PCR，不同于细菌感染，病毒感染后进入到人体细胞导致无法进行实验室培养，只能依托于病毒核酸片段进行PCR或二代高通量测序等方式[3，4]。

本研究对肠道病毒HEV在反复呼吸道感染中的发生及特点进行研究，结果显示反复呼吸道感染中肠道病毒HEV感染率为5.2%，主要以肠道病毒HEV-D68为主，占71.4%，其他CV-B1，丙型肝炎病毒CV-B4，肠道病毒HEV-C117，肠道病毒HEV-A71，ECV2均有感染，所占比例较少。肠道病毒HEV感染的反复呼吸道感染主要诊断为肺炎，毛细支气管炎和哮喘，这可能是因为主要是肠道病毒HEV-D68感染。肠道病毒71型(EV-A71)感染与多种疾病的严重程度有关，突变体VP1-280T和VP2-139T之间产生的氢键有助于加强VP1-VP2复合物的网状相互作用结构[1，3]。不同分子分型病毒感染后，疾病感染严重程度和预后存在差异，因此，探究不同分子分型病毒在我国儿童发病情况，对于精准诊治和判断预后都有重要意义。

本研究认为肠道病毒HEV感染是引起反复呼吸道感染的原因之一，其中主要以肠道病毒HEV-D68感染为主，下呼吸道感染和哮喘的肠道病毒HEV感染率较高，营养素缺乏，被动吸烟和早产是肠道病毒HEV感染的易感因素。