柳光明
(山东省栖霞市蛇窝泊畜牧兽医站 265313)
支原体有20 多个血清型,但其中具有重要意义的是鸡败血支原体和鸡滑液囊支原体,对火鸡有意义是火鸡支原体,鸡败血肢体病在国内流行较广泛,一般鸡场都有此病存在,滑液囊支原体病虽有存在,但数量较少。火鸡支原体主要引起火鸡窦炎。此病可通过种蛋传递,也可水平传递,有高感染率、低发病率的特点,鸡感染后临床症状不明显,仅能靠血清学和细菌培养而证实鸡被感染,饲养管理的好坏与此病有密切的关系,二者成正相关,因此,在饲养多年龄鸡群的大型鸡场中预防此病的发生很困难。
本病以冬春季节较为严重,特别是当环境条件变化和管理不善或有其他并发病时,发病率和死亡率有密切关系。幼鸡临床症状比较明显,流浆性或黏性鼻液,咳嗽,有呼吸啰音,病鸡无神闭眼,生长缓慢。成鸡感染后的临床症状不明显,有的似幼鸡症状,但甚轻微而易被忽略。成鸡最明显的症状是摇头,当进入鸡舍时,鸡头朝向来人方向抬起并左右摇动,然后呆立不动,此时若击掌或作其他声响,又从呆立状态变为摇头。夜间病鸡有呼吸啰音。产蛋量下降,下降幅度根据病情的严重程度而定,和有无并发病有很大差异,种蛋孵化的弱雏较多。病鸡若有并发症时死亡率增高,可达30%左右。一般10日龄内雏鸡对支原体病的易感性较大,若有某些病毒或细菌,如新城疫、传染性支气管炎或大肠杆菌病毒等侵入鸡群时,或者是有某些不利因素,如营养缺乏、温差较大、氨气或灰尘过多,潮湿和拥挤等都可促使鸡感染败血支原体病。在发生并发症时,病鸡往往多表现出并发病的症状,支原体病的症状则被忽视。
有鼻炎症状的鸡鼻腔有渗出物,眶下窦肿大附着黏液,气囊变厚且混浊,气囊上及肺部发现有干酪物,也可能发生某种程度的肺炎,严重的病例可能有纤维素性肝周炎和心外膜炎。火鸡鼻有窦炎变化,败血支原体可引起鸡与火鸡的输卵管炎,鸡感染滑液囊支原体后常有关节炎和腱鞘炎的病理变化[1]。
分离病原菌并进行鉴定、确诊。
3.1.1 采集病料
(1)活鸡:由于支原体病是呼吸道疾病,并且鸡群中多数鸡常受感染,因此,可对外表健康的鸡采取5~10 个气管拭子,接种于液体培养内。若有关节炎时,可用针头插进滑液囊,抽取液体,若液体已干酪化时,可将局部消毒后切开,用湿棉拭干擦洗关节组织面,然后将棉拭接种于培养基内。
(2)死鸡采:若鸡已死亡,可采取喉头气管气囊的病灶部位或干酪物、鼻窦黏膜或鸡胚的卵黄膜,分别接种于液体培养基内。
3.1.2 培养基
支原体对培养基的要求较高,需要有10%~15%血清、滑液囊支原体尚需加辅酶才能生长。
3.1.3 分离培养
(1)将采集的病料接种肉汤后放37℃培养14d,若无生长时可废弃。在培养过程中,若发现肉汤中有生长时(肉汤变混浊或pH 有改变),则用吸管移植0.5~1.0mL 至5~10mL 肉汤中。瓶塞需用蜡封口或更换橡皮塞。如培养5d 尚无生长表现时,则可吸取一滴肉汤加入琼脂平皿上。用铂金铒在平皿上涂布,也可以用取病料的棉拭在平皿上涂布。
(2)平皿应放在湿润的容器内或将平皿用胶布密封,放37℃温箱培养3~5d。在放大20~50 倍显微镜下,观察有无支原体菌落出现。支原体的菌落很小,直径约100~1000μm,中央隆起呈光滑型。初代培养物可能不出现此隆起中央,传数代后即变为明显,菌落可以用铂金铒移植,也可以用小手术刀连同琼脂切取一小块,一同接种至肉汤。平皿若观察至21d 无菌落出现时停止观察。
3.1.4 支原体的特性鉴定
支原体的菌落细小平滑,中央致密隆起(有人称为脐形),平皿上若有此种菌落时,很大可能性是支原体菌落,但它属于哪一种支原体尚需作一些有关试验对其特性进行鉴定。
3.1.5 支原体的快速鉴定
因支原体可凝集鸡的红细胞,利用红细胞凝集抑制试验可以快速鉴定培养物是否为支原体。采取或制作支原体(败血或滑液囊支原体) 阳性血清,血清连续作倍量稀释至32×,取2~32×稀释的血清各1 滴,放在玻片上,然后取新鲜培养物在不同倍数的稀释血清中各加1 滴,充分混合后再加5%红细胞1滴,再进行混合,同时作阴性血清对照,若在16×以下稀释的血清出现抑制红细胞凝集者,则此培养物为支原体。
鸡感染支原体后,血清学呈现阳性反应,大约持续一个月左右时间会变阴性,血清学变阴性后,该鸡并非已痊愈,支原体病的血清学诊断应从鸡的群体诊断来考虑。
3.2.1 全血玻片凝集试验
全血玻片凝集试验抗原是一种用结晶紫,将支原体染成紫色的抗原。应用时,2 滴抗原加1 滴被检鸡血,混合后轻轻摇动,在2min 内根据出现大块凝集者和小凝集块者来判定阴性阳性。
3.2.2 血清玻片凝集试验
一滴抗原加一滴血清混合,判定方法与全血法相同。
3.2.3 支原体微量血凝抑制试验
支原体可凝集鸡的红细胞,据此可制备支原体的血凝抗原,制备的抗原需进行滴定。试验时用两种浓度的抗原,一种是50μl 中含8 个血凝单位,另一种是50μl 中含4 个血凝单位。每份血清占用一排孔。在另一支小试管中制备1:5 血清稀释液。按照顺序在每个孔中加入不同数量的血凝单位抗原,配制0.5%鸡红细胞悬液,向所有孔各加入50μl 红细胞液,充分震荡后,放室温约1h,然后判定结果。凝集抑制效价在4 个血凝单位抗原时,1∶80 或以上的效价为阳性,1∶40 效价为可凝,1∶20 或以下的效价为阴性[2]。
(1)应注意鸡败血支原体病与其他呼吸道病的区别,避免与新城疫、气管炎、鼻炎或鸡痘等相混,滑液囊支原体病的关节肿胀,易同病毒性关节炎或葡萄球菌病相混。可通过临床观察、病理剖检、细菌培养和血清学反应加以区别。
(2)有时鼻腔内浆液性分泌物和眼结膜内的干酪物易同维生素A 缺乏症相混,可通过其他部位的病理变化、细菌培养和补充维生素A 而加以区别。
支原体病当无并发症时,仔鸡和成年鸡死亡率非常低。若遇到应激因素刺激,支原体迅速生长繁殖,从而使鸡体抵抗力显著降低。一旦有并发症发生,支原体病易被忽略,鸡的死亡率也因并发病而增加。此时针对并发病进行治疗,效果往往不好,因此,在有支原体病的鸡群中,治疗并发病的同时要采取对支原体病的治疗,这样才能收到较好的治疗效果。
若有并发病发生时,死亡率可达10%~30%,鸡蛋减产10%~40%,孵化率降低10%~20%,弱雏率升高至10%左右。日常为了预防和治疗支原体病,所花费的药物费也是相当可观的。因此,对支原体病需采取有效的防治方法,这对养禽业生产和发展有重要意义。
应有二间更衣室,进入鸡舍前,有条件的需经过淋浴,然后进入内部更衣室,更换衣服和鞋帽,洗手消毒后进入鸡舍,不得进入其他非工作区。每天要清除鸡粪,死鸡要送往指定地点。离开鸡舍吃午饭时应更换衣服。饲养员不能串舍或相聚聊天。
在没有支原体病种鸡场购买雏鸡。雏鸡入舍前应将鸡舍、用具彻底清洗和消毒,每栋鸡舍为一隔离单位。经常采血检查鸡群的健康状况,1 日龄雏鸡采血20 只,检查有无母源抗体,以后每周采血20 只,检查有无抗体。以鸡舍为单位,鸡群执行全进全出计划。
(1)检疫鸡群,淘汰病弱鸡。鸡群可选用2~3 种抗支原体病药物交替使用。做好种蛋处理,入孵前经过甲醛蒸气消毒,然后向蛋内引进抗支原体药物或加热处理,将种蛋预先加热至38~40℃,然后浸入0~4℃时泰乐菌素、四环素或1%链素的水溶液中,20~30min 后取出,晾干后孵化,要有专用的孵化器和出雏器。
(2)加强雏鸡群的管理,每1000 只雏鸡为一隔离鸡群,有专门的饲养员和单独的隔离鸡舍。鸡达到3 月龄时对鸡群进行检疫,每月1 次,连续3 次没有发现阳性鸡时可作为种鸡群。
(3)应用此法培育无支原体病的鸡群时,需同时分数群进行,分群数目多和鸡群的鸡数少时,则培育成功的机会增多。阴性鸡群建成后,可以按无支原体病的鸡群进行管理。
许多抗生素对支原体病都有治疗效果,如泰乐菌素、链霉素、红霉素和螺旋霉素等,但任何一种药物都不能将此病治疗,药物仅可杀死在气囊外的支原体,气囊上或干酪物中的支原体在适当条件下会扩散至鸡体的其他部位而发生感染,促使其活动的条件是前述的一些应激因素。因有这一特性,决定了支原体阳性鸡群需要长期用药。长期应用一种药物易产生副作用,最好选用一种以上的有效药物交替使用,一般鸡场的用药计划如下,可任选其中之一[3]。
(1)将抗生素混在饲料中,每月的第1 周和第3 周投药,全周用药,可供选择的抗生素有泰乐菌素,混在饲料中的含量为0.1%。金霉素、四环素和土霉素混在饲料中的含量为250g/t,饲料中加入0.4%对苯二甲酸可以提高其疗效。多西环素混在饲料中的含量为0.01%~0.02%。新霉素为0.007%~0.014%。泰牧霉素为0.013%~0.025%。北里霉素为0.033%~0.05%。红霉素为0.013%~0.025%。
(2)将抗生素混在饮水投给,用法按照饲料中的方法使用,只是用量减半。如泰乐菌素混在饲料中的含量为0.1%,混在饮水中的含量则为0.05%,其他抗生素的用量据此类推。
(3)将抗生素稀释后进行肌肉注射,每月注射1 次,可供选择的抗生素有泰乐菌素、盐酸土霉素、红霉素肌肉注射量均为每千克体重25mg。林可霉素、庆大霉素、卡那霉素肌肉注射量均为体重20mg/kg。壮观霉素肌肉注射量为体重30mg/kg。链霉素、盐酸金霉素肌肉注射量为体重40mg/kg。
(4)其他给药途径。滴鼻和气雾有时也用于预防支原体病,如支原体阳性的雏鸡群,在作新城疫免疫时,常用链霉素滴鼻来预防,用量按照1 日龄和7 日龄各用2000 和5000IU。气雾时则用0.2g/m3,其他抗生素的用量可酌情增减。
(5)免疫。雏鸡进场后,应按照防疫程序及时进行支原体菌苗滴鼻免疫,可有效抵抗支原体病毒的侵害。