卢腾娟
鹿寨县人民医院 广西 柳州 545600
丙型肝炎(丙肝)是一种由丙型肝炎病毒引起的急性和慢性传染病,人群普遍易感,且以丙型肝炎病毒阳性的人为主要传染源,该病是一类严重危害人类健康的肝脏传染病,且丙肝的传播途径较多,如血液、母婴、性行为、器官移植等,然而因丙肝较乙肝的发病率低,人们对丙肝的重视度不够[1]。丙型肝炎具有慢性化程度高、起病隐匿、传播途径明确的特点,HCV感染会造成肝纤维化和慢性炎症坏死,少数情况会发展为肝细胞癌或肝硬化,对患者生命健康产生威胁[2]。因此应加强对丙肝的重视,尽早诊断并给予治疗,以防疾病的恶性发展。目前临床中暂无特效疫苗,主要进行抗病毒治疗,具有较高的病毒清除率,因此,对丙肝进行准确检验并尽早治疗对维护患者健康十分重要。本文通过对丙肝病毒生物学特性、流行病发展现状、临床检验技术及效果等进行论述,详细内容如下。
HCV是引起丙型肝炎的病原体,丙肝的形成与HCV病原的部分生物学特性存在一定关联。HCV是RNA病毒,基因组是单股正链的RNA,可将其分为5'非编码区、编码区及3'非编码区,且由于HCV具有的高度变异性会对HCV的基因型产生影响,从而形成不同的基因型及基因亚型[3]。黄超群等[4]学者、戴俊斌等[5]学者通过进行不同地区的HCV基因特征分析研究,发现HCV基因分型具有明显的地域性,且HCV不同基因型与抗病毒治疗效果有密切的关联,会对抗病毒治疗的应答、疾病转归等产生重要影响。
目前丙型肝炎病毒感染已呈现世界性分布,严重影响人们的健康,且随着HCV感染情况的加重,会诱发慢性肝炎、肝硬化、肝癌等不良后果,因此对丙型肝炎进行早诊断、早预防显得十分重要。丙肝在全世界流行,且不同国家及地域的流行状况存在一定差异。相关研究资料表明,通过对捷克共和国的3000名成年人群进行血清检测,发现标本中阳性率为1.67%、HCV RNA阳性率为0.93%,且经分析发现男性的阳性率明显高于女性,另外在不同年龄段的阳性率也存在明显区别[6]。另外吴护华[7]学者研究发现在美国与欧洲供血者中抗-HCV流行率低,约为0.047%-1.2%。
贾艳艳等[8]学者研究表明,我国丙型肝炎约占输血后肝炎的60%-80%,丙型肝炎的感染率仅次于乙型肝炎。相关研究调查分析发现,我国2004-2012年丙型肝炎发病率均呈逐年上升趋势,发病率由3.03/10万上升至14.96/10万,可见丙型肝炎在我国具有较高的增长率,同时研究表明丙型肝炎无明显季节性,但在我国有明显的地区差异,且随着年龄增加发病率呈现升高趋势[9]。
目前丙肝的实验室诊断主要有酶联免疫吸附法、胶体金免疫层析法、逆转录聚合酶链反应法等,能够通过对HCV抗体、RNA进行检查,从而做出疾病诊断,因此就常见的检验方法及原理作出以下分析。
该方式是酶免疫测定技术中应用最广的技术,主要是通过将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使抗体抗原反应在固相载体表面进行,并利用洗涤法将液相中的游离成分洗涤,最终酶作用于底物后会出现相应的显色反应,从而辅助进行结果判断,且显色颜色的深浅与标本中相应抗体或抗原的量之间成正比。
ELISA检测主要通过相应的试剂盒进行,有研究表明,采用试剂盒检测的效果较优,且该检验方式对于免疫功能正常的丙型肝炎病毒-RNA阳性感染患者来说,具有高于99%的抗丙型肝炎病毒检出率,因此在临床中的应用较多。ELISA检测法具有价格低廉、检测方便、敏感度高、标记物来源丰富、无放射性污染等优点,在检验诊断丙型肝炎中有重要作用[10]。但该检验方式仍存在局限性,受多种因素的影响可能出现假阳性的结果,影响临床诊断及后期治疗,因此应对相关风险因素进行规避,保证检验效果的准确性。陈连旺[11]学者在研究中指出,由于受到检测设备及试剂的多样化、规模化等因素的影响,不同生产厂家的试剂对同一项目的检测结果也可能会出现偏差情况,从而导致实验室各种血清指标的检测结果存在一定差异。曾艳华等[12]学者针对上述问题展开不同试剂对检测结果的影响研究,发现不同检测系统在检验丙型肝炎中不存在明显的差异,对于疾病的诊断均有重要价值,但定性试验中Cut-off值存在一定差异,主要与不同试剂和有关,因此造成检验结果的差异。
临床中关于ELISA检验丙型肝炎抗体的研究较多,其中余燕儿等[13]学者对ELISA检测的可行性进行研究发现,应用ELISA检验法能够获得较为理想的丙型肝炎抗体检测结果,对于提高丙型肝炎诊断准确性有重要作用,且对患者后期临床治疗有积极效果。
化学发光酶免疫分析法是一种标记抗体与被测抗原同时与包被抗体结合的反应形式,主要是通过利用磁性微珠被磁场吸引的原理,在磁场作用下能够发生力学移动,从而迅速捕捉到被测抗原。在进行丙型肝炎病毒检测时,血清标本中的抗原与磁性抗体形成复合物,在磁力作用下快速进行复合物及其他非特异性物质的分离效果,再经洗涤去掉未结合的抗体后加入发光底物,最终各类光子能量被计算机捕捉记录并进行分析,从而获取标本中的抗体含量。化学发光酶免疫分析法虽与ELISA检测法存在一定的相似性,但前者检测中所用的包被载体为具有更大表面积的磁性颗粒,能够在磁力作用下快速下沉,从而便于洗涤和分离,有利于缩短反应周期且有效提高了分离效果,使得最大光信号峰值的时间更短,检测灵敏度更高,因此在检测丙型肝炎中具有重要作用[14]。
化学发光酶免疫法是利用化学发光剂直接标记抗原或抗体,通过启动发光实际作用而发光,该方式具有反应简单、快速、无需催化剂的优点。刘天尧[15]研究通过对110例丙型肝炎病毒抗体的患者进行化学发光酶免疫分析法及酶联免疫吸附法,对比发现前者检测阳性率明显高于后者,且前者对相关抗体检测的结果明显高于后者,结果可知上述两种检测方法在进行丙型肝炎病毒初筛检测时的效果无明显差异,但比较发现酶联免疫吸附法的特异性较好,而化学发光酶免疫分析法的灵敏度较高。
胶体金免疫层析法作为一种新式检验,具有操作简便、观察直观、不需要特殊设备、经济、检测时间短的优点,该方式主要是通过将胶体金作为标志物,依据层析作用来进行抗原、抗体反应的检测,目前在临床中应用较广,能够对丙型肝炎病毒抗体进行有效筛查,从而为疾病诊断提供准确的依据。有关研究通过对比胶体金免疫层析法与酶免疫吸附法,两种方式的检测结果及时间比较发现,两组在丙型肝炎病毒抗体的检出率上无明显差异,但胶体金免疫层析法的检测时间较酶免疫吸附法短,可见两种检测方式均对丙型肝炎病毒有较优的检出率,临床中可根据实际情况选择相应的检测方式,对于标本量大、有时间要求的情况可优先选择胶体金免疫层析法,能够迅速、准确的进行疾病筛查[16]。
丙型肝炎在我国具有较高的发生率,且疾病可经血液、母婴等方式进行传播,加之丙型肝炎的临床症状并不明显,患病后人们不容易发现,因此对丙型肝炎的关注度明显低于乙型肝炎,因此对丙型肝炎的筛查及诊断不重视,随着病毒不断加重对人体的损害,会导致其他相关严重后果,威胁人们的健康及安全,因此应预防性地进行疾病临床检验,可及时发现疾病并尽早展开治疗,从而获得较优的预后。临床检验的方式较多,均能够对丙型肝炎病毒进行有效的筛查,但各类方式存在一定的局限性或不足,因此在进行临床检验时需严格按照规范操作进行,根据检验时的实际情况选择检验方式,规避其他因素对检验结果造成的影响。另外可选择进行联合检验,能够弥补检验中的局限性,从而提升检验的准确性,对患者及临床工作均有积极意义。