类风湿关节炎特异性自身抗体研究进展

苗继珍

（桂林市中医医院，广西 桂林，541001）

类风湿关节炎疾病是一种慢性关节疾病，具有较高的致残率，该疾病病变部位主要在关节，患者起病最初对关节损伤较为严重，且早期诊断难度较大，严重影响患者生活质量。临床治疗主要以使用免疫抑制剂为主，可有效控制病情，减轻关节受损程度，以此避免关节功能降低[1]。在对该疾病进行早期诊断期间，寻找特异性检测指标是临床研究的重要内容。本文深入分析类风湿关节炎患者特异性自身抗体研究进展，综述如下。

1 抗核周因子

在本研究疾病患者机体中检测出一种细胞核周围的抗体，临床称之为抗核周因子[2]。该抗原成份存在于人颊粘膜上皮细胞胞浆内的不溶性蛋白质，通过间接免疫荧光法显微镜下呈现出圆形颗粒，研究者使用抗人球蛋白血清对核周荧光进行阻断，以此对抗原抗体性质有效确定，且分为lgG、IgA、Ign 等类型，主要以lgG 型为主，IgG 型抗核周因子对该疾病诊断的敏感性发生率约为49%，特异性为73%-99%[3]。抗核周因子对该疾病诊断特异性与血清稀释呈正比关系，随着血清不断稀释，疾病特异性逐渐增加，其敏感性降低[4]。李玲等[5]对不同血清稀释度下抗核周因子检测结果进行对比，对判断实验方法优劣实施判断时采用正确诊断指数，最佳血清稀释倍数为l：20。

本研究疾病早期时极易出现抗核周因子，由于患者病程与检出率无关，抗核周因子与类风湿因子、抗角蛋白抗体高度密切相关，且与抗RA33 抗体无相关性[6]。有学者认为[7]，抗核周因子与病情活动性指标呈正相关，也有学者认为，抗核周因子阳性与放射学病情进展相关，提示该疾病预后不良指标中，抗核周因子是其指标之一。IgM—APF、IgA—APF 与IsG—APF 三种抗体之间不具有替代性，且检测具有补充性；若三种抗体联合检测，其特异性与阳性预测值分别为98%、96.9%[8]。

2 抗角蛋白抗体

研究发现，在类风湿关节炎患者中采用间接免疫荧光法在血清中发现角质层中的抗体，临床将此叫做角质蛋白抗体。与该疾病相关的角质蛋白抗体属于IgGl 型，在检测时可在关节液以及血清部位检出，但该抗体很难在关节液中浓集[9]。报道显示[10]，角质蛋白抗体对一般患者诊断敏感度、特异性分别为60%、98%。抗角蛋白抗体与核周因子之间具有相关性，主要是因核周因子检测抗原底物为人颊粘膜细胞，该细胞中含有filaggrin。患者在患病早期极易出现角质蛋白抗体。分析发现，角质蛋白抗体检测可对该疾病进行早期诊断。

3 抗Sa 抗体

Sa 抗体主要在机体脾脏器官中，研究者采用蛋白质免疫印迹法在患者机体中检测出此抗体，具有较高特异性，约为98.9%，同时患病时间＜12 个月患者阳性率约为29%。sa 抗原是一种非酰基化多肽，最早在脾脏器官中，而后又在类风湿滑膜翳与胎盘中，由此可见该抗体可存在于机体正常组织中，是机体正常组织中的一部分。本研究患者中类风湿因子无无论是阳性还是阴性，sa 抗体均可呈现阳性，所以抗Sa 抗体是类风湿因子的有效补充，特别是类风湿因子阴性患者，可将此抗体作为诊断的重要指标。实验显示[11]，若患者患病时间＜12 个月，抗Sa 抗体阳性患者中X 线病情分期与阴性患者相比较高，抗体为阳性患者在患病12 个月期间发病较快。

4 抗Ⅱ型胶原抗体

在动物内体中，胶原含量较为丰富，在人体中胶原含量约占总蛋白的1/3。在机体关节透明板软骨中，胶原类型含量有明显差异，Ⅱ型胶原含含量最高。临床研究了抗Ⅱ型胶原抗体检测方法，如免疫荧光、间接血凝、固相放免等方法，目前主要常用方法为酶联免疫法。临床采用新鲜兔血清封闭酶标反应板分析，提示在该疾病早期诊断中，该抗体可作为重要的诊断指标。报道显示[12]，采用改进后的ELISA 法对II 型胶原抗体水平检测发现，对照组抗天然II 型胶原抗体阳性率相对较低，特异性为96.9%，对于初期患者中敏感性更高，提示在对此病进行诊断时，II 型胶原抗体可作为疾病诊断的有效补充指标。实验发现，Ⅱ型胶原抗体与患者互动指标无相关性，对患者病情变化监测时，该抗体无法起到病情监测的目的。

患者的Ⅱ型胶原抗体阳性率表现相对较低，主要原因表现在以下几个方面：①II 型胶原抗体与关节遗传易感性相关，相关遗传基因可产生此抗体，如HLA-DR4，在发病的整个过程中均有参与，因此此抗体仅在有遗传的部分患者中起到一定作用。②在对抗II 型胶原抗体采用ELISA 法测定期间，需确保Ⅱ型胶原包板的完整性，但认为只有Ⅱ型胶原中CB10 多肽片段与患者有相关性，完整Ⅱ型胶原包板无法使致病基团充分暴露，导致抗体阳性率很难提高。

5 抗聚角蛋白微丝蛋白抗体

聚角蛋白微丝蛋白主要在人表皮中提取，是一种居间纤维，可使角蛋白不断聚集形成粗大纤维，能够构成真核细胞骨架细丝间。Filaggrin 的理化性质是一酸/中性蛋白，等电点介于58—74 间，可溶于水。报道显示，可将此作为抗原，采用免疫印迹法与酶联免疫吸附法对患者血清中针对filaggrin 特异性自身抗体进行检测，在该疾病诊断中，该抗体可作为重要的诊断指标。在对此抗体进行检测期间，主要方法有WB、IIF 以及ELISA，诊断敏感性与特异性分别为达75%、95%。在患者早期发病时，机体出现此抗体，可对早期患者通过检测抗聚角蛋白微丝蛋白抗体实施诊断。报道显示[13]，此抗体与患者病程、年龄等无相关性，学者认为若此抗体呈阳性，其病情具有较高的活动性，同时该抗体与HLA-DR4 有密切相关性，提示HLA-DR4与患者疾病严重程度相关，同时可显著改善患者预后，若该抗体为阳性，表明患者病情相对较重，同时预后较差。曾小峰等[14]研究者通过研究发现，抗核周因子、抗角蛋白抗体、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体的靶抗原均是filaggrin，且三种抗体之间存在相关性，但处于不完全重叠状态，主要是因抗原通过不同形式存在，致使抗原表位暴露不同。本抗体可用于该疾病的诊断，与抗核周因子、抗角蛋白抗体检测形成有效补充，以此能够提升患者早期诊断率。

6 抗环瓜氨酸肽抗体

目前，临床在研究期间发现，抗聚角蛋白微丝蛋白抗体、抗核周因子在对该疾病诊断时，特异性相对较高，但因抗原底物个体差异，同时采用的免疫荧光检测方法模型判断具有一定主观性等因素，使临床实验室普及与推广受到一定限制。对该疾病深入研究显示，抗聚角蛋白微丝蛋白抗体、抗核周因子中的靶抗原是上皮细胞分化终末阶段的细胞骨架成分filaggrin，抗聚角蛋白微丝蛋白抗体、抗核周因子是这族抗体中不同抗原表位的抗体，通过对filaggrin 研究显示，在对此成分识别时主要采用瓜氨酸。近年来，临床在研究期间，将瓜氨酸肽链中丝氨酸转化为半胱氨酸，以此产生二硫键，且与B 转角相似性较高，以此可建立ELISA 检测方法。临床常采用环瓜氨酸多肽对抗环瓜氨酸多肽抗体进行有效的检测，可对早期患者起到较好的诊断效果。该抗体在患者早期发病时可出现，Kroot 等[15]研究者对本研究患者进行研究，采用影像学评分对患者进行观察，显示患者骨破坏该抗体阳性较阴性相对严重，表明该抗体缓释片与患者疾病严重程度相关。报道显示，该抗体与类风湿因子、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体、抗核周因子阳性率有差异，不同方法检验结果密切相关，抗CCP 抗体评价指标较类风湿因子、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体、抗核周因子优。研究证实，对患者诊断期间，CCP 抗体是其重要的诊断指标。

结语

综上所述，类风湿因子阳性率相对较高，且抗Sa 抗体特异性最高，对以上抗体实施检测可对患者进行早期诊断，以此能够提升疾病诊断的特异性，弥补类风湿因子对该疾病诊断的不足，且不同抗体进行联合诊断可显著提升诊断阳性率。