液相色谱法测定化妆品中紫外光吸收剂UV-360的含量

张晓芝

(水利部珠江水利委员会水文局，广东广州，510000)

皮肤如长时间暴露在阳光下，可能会导致不同的皮肤性疾病[1,2]。防晒的化妆品被用来减少阳光的危害，因此得到越来越多的应用，然而过度使用则会导致皮肤敏感[3,4]。紫外线吸收剂作为一种有前景的产品，广泛应用于护肤品、洗发水、纺织品洗涤剂等当中。人们对紫外线的防护意识日益增强，对紫外线吸收剂也提出了越来越严格的方案[5]。化妆品公司大部分采用减少防晒剂的添加量来增加安全性能，同时加大配方研发，使得产品达到同样的效果。在符合法规的前提下，对防晒剂的含量进行检测，利用相关数据进行宣传，能够起到促进产品销售的作用[6]。

对防晒剂进行检测，是化妆品产品的一项常规工作，这样做能够保障消费者的使用安全性，有利于监管部门对其进行监管。在《化妆品安全技术规范》中，常常采用高效液相色谱法[7]、液相色谱串联质谱法来测定防晒剂的含量，其中高效液相色谱法应用最广[8]，但是在整个实验过程当中，要用到大量的四氢呋喃，这不仅对实验仪器有严重的腐蚀，同时刺激性气味很重，对实验人员的身体健康造成伤害，因此很有必要对该方法进行优化。经过优化后，本实验能大大减少四氢呋喃的用量，能准确、快速地进行定量。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

仪器：BSA2 24S电子天平(赛多利斯公司)；WQ-20超声波清洗器(吉姆斯实验技术有限公司)；TB-W涡旋器(吉姆斯实验技术有限公司)。

试剂：紫外光吸收剂UV-360标准品(鹤山市金润纳新型材料有限公司)；紫外光吸收剂UV-360样品(碧柔水活防晒水感凝蜜，花王公司)。

1.2 标准储备液、中间液和工作液的配制

1.2.1 标准储备液的配制

称取紫外光吸收剂UV-360标准品10mg于一个10mL的容量瓶中，四氢呋喃稀释并定容至刻度，混匀，得到1000μg/mL的标准储备液，用作标准储备液。

1.2.2 标准中间液的配制

从标准储备液中取出1.0mL标准储备液，用N,N-二甲基甲酰胺稀释至10mL，得到100μg/mL的标准中间液。

1.2.3 标准工作液的配制

分别精密吸取对照品溶液0.1mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL至不同的10mL容量瓶中，使其稀释至10μg/mL，40μg/mL，60μg/mL，80μg/mL，100μg/mL，混匀，作为标准系列工作溶液。分别取1.0mL过滤后进样，测定保留时间和峰面积以测得的峰面积均值对浓度(μg/mL)绘制标准曲线。

1.3 样品制备

称取样品约0.2g(精密至0.001g)，置于20mL烧杯中，用10mL四氢呋喃溶解，再从中取1mL样液于10mL容量瓶中，以N,N-二甲基甲酰胺稀释至刻度，取1.0mL溶液过滤，上机待测。

2 结果与讨论

2.1 色谱图

色谱图见图1。

图1 紫外光吸收剂UV-360标准溶液的色谱图

2.2 样品提取溶剂的优化

本试验的目标物为防晒剂，不能用甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等，因此本实验提取溶剂参照相关的规定，采用四氢呋喃进行溶解、提取，同时采用能够与大部分物质相容的N-N二甲基甲酰胺进行溶解稀释，结果发现采用N-N二甲基甲酰胺能有效地和四氢呋喃混溶，同时也能与大部分有机溶剂相容，而且没有产生沉淀物。因此本实验采用这种方法进行测试。

2.3 流动相的选择

根据《化妆品安全技术规范》(2015年版)，其流动相中四氢呋喃的比例占比为45%，根据该方法虽然能重现该目标物质的相关信息，但是其保留时间过长，增加了时间成本，因此，本试验以常见的甲醇、乙醇、异丙醇和一级水进行流动相配比探讨，结果发现甲醇与水和乙腈与水配比的流动相不能出峰，而以异丙醇与水作为配比，且异丙醇占比超过50%的时候，能出峰，同时异丙醇的含量越高，峰就越对称，且保留时间较长，因此本试验选择的流动相为100%异丙醇。

2.4 色谱柱的选择

本实验分别考察了C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)、C16(250 mm×4.6 mm，5 μm)、RX-SIL(250 mm×4.6 mm，5 μm)在柱温为35°C时，对于样品的分离效果。实验表明C18色谱柱分离效果更好。

2.5 线性关系与检出限

分别精密吸取对照品溶液0.1mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL至不同的10mL容量瓶中，使其稀释至10μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL，混匀，作为标准系列工作溶液。在上述色谱条件下，分别取1.0mL 过滤，进样，测定保留时间和峰面积以测得的峰面积均值对浓度(μg·mL-1)绘制标准曲线。如图1所示(x轴为目标物所配置的浓度，Y轴为峰面积)，回归方程与相关系数详见表1。

检出限以3倍信噪比(3S/N)计算，结果见表1。

表1 标准曲线考察结果

2.6 回收试验与精密度

以不含UV-360的化妆品作为空白基质，分别对其添加低、中、高三个水平的混合标准溶液，每个水平测试6次，回收率和测定值的相对标准偏差(RSD)见表2。

表2 精密度和回收率试验结果(n=6)

3 结论

本工作优化了高效液相色谱法测定防晒化妆品中紫外光吸收剂UV-360含量方法，方法操作过程中只用到少量的四氢呋喃，色谱峰能完全分离，所用的化学试剂少，具有较高的准确度和精密度，可为广大检测工作者提供一种检测防晒化妆品中紫外光吸收剂UV-360的方法。