不同孕期孕妇蛋白C、蛋白S、纤溶酶原变化及其临床意义

钱蓓蓓， 陶佳莹， 毛佩敏， 刘晓艳

（复旦大学附属妇产科医院，上海 200011）

妊娠期女性因机体生理状况发生改变，凝血系统平衡发生变化，特别是蛋白C、蛋白S、纤溶酶原等抗凝和纤溶系统相关蛋白水平随妊娠进展会发生改变[1-2]，导致妊娠期女性机体呈高凝状态；而此类蛋白活性异常与流产、子痫等产科不良事件相关[3-4]。妊娠期女性凝血障碍和血栓性疾病的诊断和治疗非常重要，临床应区别生理性和病理性改变，预防不良事件发生。目前，相关研究大多局限于妊娠某个阶段或少数凝血指标，或样本量较小。本研究分析健康非孕女性和不同妊娠期（早期、中期、晚期）孕妇蛋白C、蛋白S、纤溶酶原活性的变化，为临床预防产科不良事件的发生提供参考。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2020年11月—2021年8月复旦大学附属妇产科医院行常规产前检查的不同孕期女性 759例，根据《妇产科学》[5]妊娠分类标准分为孕早期（孕期＜12周，242例，年龄19～38岁）、孕中期（孕期为13～27周，256例，年龄21～39岁）和孕晚期（孕期≥28周，261例，年龄21～39岁）；纳入标准：既往无心、肝、肺、肾系统疾病史，无异常妊娠史，无妊娠高血压、妊娠糖尿病和肿瘤，入组前6个月及研究期间未服用任何药物。另选取同期健康非未孕女性241名作为正常对照组，年龄19～47岁；入组标准：体检健康，无家族性遗传病史，无心脑血管疾病，无肝、肾、肺、胰等重要器官功能障碍，无大量饮酒或酗酒史，近期无手术史、输血史或服用药物。所有研究对象年龄差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经复旦大学附属妇产科医院伦理委员会批准，所有研究对象均知情同意并签署知情同意书。

1.2 方法

采集所有研究对象空腹静脉血1.8 mL，置于109 mmol/L枸橼酸钠抗凝真空采集管中（1∶9抗凝），轻轻颠倒混匀后，2 070×g离心10 min，分离上清，获得乏血小板血浆，在4 h内完成检测。蛋白C、纤溶酶原活性采用发色底物法检测，蛋白S活性采用凝固法检测。采用CS-5100全自动凝血分析仪（日本Sysmex公司）及配套试剂、质控品、校准品进行检测，严格按仪器和试剂说明书进行操作，质控样本随检测样本一起上机。

1.3 统计学方法

采用SPSS 24.0软件进行统计分析。呈非正态分布的计量数据以中位数（M）[四分位数（P25～P75）]表示，组间比较采用Kruskal-Wallis检验，两两比较采用Mann-Whitney U检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

孕中期组和孕晚期组蛋白C活性显著高于孕早期组（P＜0.01），而不同孕期各组与正常对照组之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。不同孕期各组蛋白S活性均显著低于正常对照组（P＜0.01），纤溶酶原活性均高于正常对照组（P＜0.01）。孕中期组和孕晚期组蛋白S活性均显著低于孕早期组（P＜0.01），纤溶酶原活性均高于孕早期组（P＜0.01）。孕中期组与孕晚期组之间蛋白S活性和纤溶酶原活性差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1、图1。

表1 正常对照组和不同孕期各组蛋白C、蛋白S、纤溶酶原活性比较

图1 正常对照组与不同孕期各组蛋白C、蛋白S、纤溶酶原活性变化趋势

3 讨论

妊娠期是女性一个特殊的生理阶段，机体随着妊娠期发展产生相应生理性改变，出凝血系统在这个过程中也发生了很大变化，主要表现为高凝状态。而机体凝血系统异常会导致流产等产科病理症状，了解女性这一生理阶段凝血系统指标的变化具有积极的临床意义。蛋白C、蛋白S、纤溶酶原是纤溶-抗凝系统的主要组成部分，国内外已有多项研究[3-4，6-10]对该阶段各项凝血指标进行分析，但部分研究存在样本量少[3]或仅针对某个孕期（中期或晚期）[10]等不足。本研究对不同妊娠阶段孕妇和健康非孕女性蛋白C、蛋白S、纤溶酶原活性进行了测定，并分析了这3个指标在女性不同生理状态下的变化趋势，从而对妊娠期抗凝-纤溶系统变化有了更深入的了解。

蛋白C是一种维生素K依赖丝氨酸蛋白酶原，主要由肝脏合成。在血浆中，蛋白C本身无生物学作用，以酶原形式存在。凝血酶和凝血酶调节蛋白复合物可激活蛋白C，使其转化为活化蛋白C，活化蛋白C在磷脂和Ca2+的参与下灭活活化因子Ⅴ和活化因子Ⅷ，通过灭活纤溶酶原激活物抑制物（plasminogen activator inhibitor，PAI）-1激活纤溶系统。本研究结果显示，不同孕期女性蛋白C活性与非孕健康女性之间差异无统计学意义（P＞0.05），但孕中期和孕晚期高于孕早期（P＜0.01）。有研究发现，蛋白C在孕期可发生轻微的升高，尤其是在孕早期（＜12周），以每天0.21%的幅度增长，随着孕期的增长，蛋白C活性可呈显著增加[11-12]；蛋白C活性在孕期发生改变的原因目前尚不可知，有研究认为妊娠阶段蛋白C水平的升高抵消了凝血酶生成增加趋势，从而维持凝血系统平衡[12]。

蛋白S是一种维生素K依赖非酶性血浆蛋白，主要由肝脏合成，是蛋白C/凝血因子途径重要的辅因子。人血浆中40%的蛋白S处于游离状态，60%的蛋白S与补体4b结合蛋白结合形成复合物。蛋白S与带负电荷的磷脂有很高的亲和力，可与活化蛋白C形成复合物，使活化蛋白C活性得以发挥。本研究发现，蛋白S活性随妊娠进展呈降低趋势，从孕早期开始即显著下降，且随着妊娠进展持续下降（P＜0.01）。孕期蛋白S活性下降提示对患有蛋白S缺陷症的孕妇进行诊断存在一定难度，如采用正常对照人群的标准来判断孕期女性蛋白S活性，可能会将健康孕妇（无深静脉血栓家族史、无病理产科史等）诊断为蛋白S缺陷症。因此，了解相对应孕周蛋白S活性水平有积极的临床意义。

纤溶酶原是纤溶系统的主要成分，也是纤溶过程起始因子，是一种含糖β-球蛋白，主要由肝脏合成，在血浆中稳定，无活性，主要功能是在各种纤溶酶原激活剂，如血浆纤溶酶原激活物（tissue plasminogen activator，t-PA）、尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator，uPA）的作用下形成纤溶酶，从而激活纤溶系统，但这一过程常被α2抗纤溶酶（alpha 2 plasmin inhibitor，α2-PI）抑制。本研究发现，纤溶酶原活性在孕早期（＜12周）即轻度升高，到孕中期（13周～27周）显著升高，并维持到孕晚期（≥28周，P＜0.01）。提示纤溶酶原变化与妊娠期高凝状态维持有关，当机体凝血水平发生改变时，纤溶系统也随之发生改变，从而维持新的动态平衡。有多项研究分析了PAI-1、PAI-2和t-PA、u-PA等调节纤溶酶原活性的影响因素与正常妊娠、病理性妊娠的关系，发现在正常妊娠过程中，PAI-1、PAI-2、t-PA和u-PA抗原水平均缓慢增加，而妊娠子痫组PAI-2则显著低于正常妊娠组，t-PA显著高于正常妊娠组[13-15]，但这些研究尚缺乏纤溶酶原相关数据。本研究分析了健康妊娠女性纤溶酶原活性水平，可在此基础上，对病理性妊娠纤溶酶原活性开展研究，或许会有新的 发现。

综上所述，蛋白S和纤溶酶原活性会随妊娠进展发生生理性改变，这为临床提供了合适的参考数据，有利于临床对妊娠期女性凝血和纤溶功能进行有效监测，预防产科不良事件的 发生。