经MGT法检测的60例血标本ABO血型正反定型不符的主要影响因素及干预对策

陈岚融

（福建医科大学附属福州市第一医院，福建 福州 350009）

ABO血型系统是临床上根据人类血型的抗原最早进行命名的血型系统，对其进行正确的检测对于临床上的法医学鉴定、输血等方面有重要的意义。临床上常于输血之前对血型进行检测，只有当ABO血型一致时才可保证临床上输血的安全性，若临床上血型不符合，进行输血极易导致血管中的红细胞凝集，进而促使凝血反应的发生，最终使得临床上出现诸多的输血不良反应发生，若进行大量输血，极易引发被输血者的死亡[1-3]。故而，临床上对于血型的准确鉴定具有重要的意义，而临床上ABO血型正反定型不符又是较为常见的现象，为降低临床上不良现象的发生率，提升输血的安全性，需对ABO血型正反定型不符的相关影响因素进行研究探讨。微柱凝胶（MGT）法属于临床上较为常规的一种血型检测方法，但既往研究发现，其易受血清蛋白异常、血清抗体效价降低、血清中含有纤维蛋白等因素的影响，导致ABO血型正反定型不符现象的出现，使得临床上对于血型的判断出现一定的偏差[4-5]。故本研究旨在探讨MGT法检测ABO血型正反定型不符的相关危险因素，进而采取相应的干预策略降低其临床上的发生率，以期为临床上输血的安全性提供一定参考，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性选取我院2017年1月至2022年1月收治的71 163例经输血科诊断为ABO血型患者的临床资料，其中正反定型不符的标本为60例（排除进行多次重复送检的标本）。知情同意并签署知情同意书，本研究已获得我院伦理委员会的批准（伦理编号：202208047）。

1.2 方法 ①检测试剂及仪器：ABO血型正反定型及Rh血型检测卡[（微柱凝胶法）规格：8孔/卡，2×25卡/盒]及全自动配血及血型分析仪（北京佰利申科贸有限公司WADiana Compact，国械注进20163404539），孵育器DG Therm及医用离心机 DG Spin（北京佰利申科贸有限公司，规格：DG Therm，国械备20161428号及DG Spin，国械备20161402号）低速冷冻离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司，型号：KDC-2046），医用数显恒温箱（常州普天仪器有限公司），血型专用离心机（日本久保田，型号：KA-2200）。②检测方法：采用MGT法对所有ABO血型患者的血型进行检测[6]。所有患者均采集EDTA2K抗凝血样本约2 mL，其检测的基本原理为根据样本离心后的凝集状态进行判定，将凝胶、人球蛋白血清抗体置于微柱中进行离心，而后观察其状态，当抗原抗体出现凝集块，经离心后发现其不能通过凝胶间隙且保留在凝胶上层时，则为阳性反应（ABO血型正反定型不符），若其为出现凝集，未凝集的红细胞经离心后发现可以通过凝胶间隙，且沉积于凝胶管底部，则表明为阴性反应（无ABO血型正反定型不符）。对患者的临床基本资料进行分析检测时需要注意，排除操作失误等因素对于检测结果的影响，对于出现问题的血样需及时的重新抽取样本，必要时须增抽一管无添加剂的样本进行检测。

1.3 观察指标 ①血清ABO血型抗体检测结果：比较所有纳入样本的血型抗体检测结果，对各血型的正反定型不符情况进行统计并比较。②正反定型不符的影响因素分析。主要通过对人为因素（标本稀释、标本溶血、纤维蛋白原干扰）、生理因素（老年＞60岁、脂血、ABO亚型）、疾病因素（冷凝集素、白血病、多发性骨髓瘤）、治疗因素（骨髓移植）、其他因素（不规则抗体干扰）等的正反定型不符的标本例数及占比进行统计比较。③致血型抗原/抗体减弱或缺失的影响因素分析。主要对包括年龄＞60岁、试剂干扰、ABO亚型、恶性实体肿瘤、恶性血液疾病在内的因素对血型抗原/抗体减弱或缺失的影响程度进行统计比较。④ABO血型抗原抗体出现额外反应的影响因素分析。主要包括对ABO血型抗原抗体出现正定型额外反应、反定型额外反应、同时额外反应的影响因素（血清蛋白较高、同种抗体、试剂、ABO亚型、同种抗体及自身抗体、自身抗体）进行统计比较。

1.4 统计学方法 应用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清ABO血型抗体检测结果 71 163例ABO血型的患者中，正反定型不符的标本有60例，其中A、B、O血型正反定型不符分别为22例（36.67%）、26例（43.33%）、12例（20.00%），差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 血清ABO血型抗体检测结果

2.2 正反定型不符的影响因素 60例正反定型不符标本的影响因素中，人为因素为6例（10.00%），生理因素为19例（31.67%），疾病因素为16例（26.67%），治疗因素为2例（3.33%），其他因素为17例（28.33%）。见表2。

表2 正反定型不符的影响因素

2.3 血型抗原/抗体减弱或缺失的影响因素分析 60例正反定型不符的标本中，血型抗原/抗体减弱或缺失的标本有16例，其中年龄＞60岁、恶性血液疾病、试剂干扰、ABO亚型、恶性实体肿瘤是致血型抗体减弱或缺失的主要影响因素。见表3。

表3 血型抗原/抗体减弱或缺失的影响因素分析[n（%）]

2.4 ABO血型抗原抗体出现额外反应的影响因素分析 60例正反定型不符的标本中，ABO血型抗原抗体出现额外反应的标本有19例，其中ABO亚型、自身抗体是正定型额外反应的主要影响因素，血清蛋白较高、同种抗体、试剂、同种抗体及自身抗体、自身抗体是反定型额外反应的主要影响因素，自身抗体是同时额外反应的主要影响因素。见表4。

表4 ABO血型抗原抗体出现额外反应的影响因素分析[n(%)]

3 讨论

血型是否相符是决定临床上献血安全性的主要因素，故对于血型的正确鉴定是十分必要的。临床上若存在ABO正反定型不符会严重影响抢救时机，甚至加重被输血者的临床症状，进一步威胁其生命健康，为保障临床上输血的安全性，需采取有效的方法对血型进行准确的鉴定，并对ABO正反定型不符的原因进行分析，进而采取针对性的措施进行处理[7-9]。对于ABO正反定型不符现象临床上较为常见的原因为混合视野反应、技术错误、弱反应或缺失抗原、多余抗原反应等[10-12]。据既往研究表明[13]，最为主要的为抗体减弱和ABO血型抗体量合成不足，其中血型抗体减弱多发生于有免疫药物治疗史者、老年人、新生儿等人群中，其主要原因为此类人群抗体水平下降或还未产生抗体。

MGT法检测血型的本质为根据血凝反应对血型进行鉴别，其属于一种较为新型的免疫检测方法，基本原理为使用离心技术和生物化学凝胶技术作用于红细胞，根据凝集状态对血型进行鉴定[14-15]。既往研究表明[16]，MGT法相较于聚凝胺法、抗人球蛋白酶法等具有更高的灵敏度，对于血清的检测结果较为准确，故本研究对于所有患者均采取MGT法进行血型检测。

本研究结果显示，正反定型不符的标本中A、B、O血型正反定型不符有差异，这可能与血液标本中有IgG性质不规则抗体有关，进而使得临床上出现配血不合导致退血，临床上可采用谱细胞及细胞筛选对血型的不规则特异性抗体进行检测鉴定[17]。此外，血型ABO正反定型不符的影响因素中最为主要的为生理因素中的年龄＞60岁及其他因素中的不规则抗体干扰，年龄＞60岁者易导致血型抗原减弱或缺失，有多次妊娠史及反复输血的患者易出现不规则抗体，进而造成血型鉴定中正反定型不符的现象，临床上可通过选择相应抗体显示阴性红细胞的反应细胞，以尽量降低不规则抗体对血型鉴定结果的影响。血型抗原减弱或缺失的主要因素为恶性血液疾病、试剂干扰、ABO亚型、恶性实体肿瘤，ABO血型抗原抗体出现正定型额外反应的主要因素为ABO亚型、自身抗体，反定型额外反应的主要影响因素为血清蛋白较高、同种抗体、试剂、同种抗体及自身抗体、自身抗体。分析其原因可能在于：①当患者存在恶性血液疾病时，会使得其血液中的成熟红细胞含量降低，而不规则形态的红细胞比值反而上升，进而使得机体的抗原能力降低，致使其经血型检测出ABO正反定型不符的比率较高，对于此类患者临床上需采用试管法排除干扰后再进行血型的鉴别。②当患者年龄＞60岁，随着机体自身各项功能的降低，使得其免疫能力下降，进而导致抗体的水平有所下降，致使此类患者临床上出现ABO正反定型不符现象，故临床上需将采集的标本置于37 ℃的条件下并进行10～30 min的水浴后再进行检测。③当患者的血清蛋白含量较高时，会导致机体内可促进反定型的红细胞出现凝集的状态，进而易判断为阳性，出现ABO正反定型不符，临床上可在进行试验的过程中加入生理盐水，观察凝集状态是否消失来进行准确的判断，或对血液稀释后再进行测定。④ABO亚型是一种具有明确血清学特点和一定遗传基础（排除妊娠、疾病等不可遗传因素）的血清基因改变，当基因发生改变时会致使患者临床上出现抗体减弱或缺失，进而出现ABO正反定型不符，此类患者临床上可采取分子生物技术结合血清学实验特性对样本的血型进行明确[18-20]。

综上所述，对于ABO正反定型不符患者的影响较大的因素为生理因素，其次为其他因素和疾病因素，人为因素次之；年龄＞60岁者易导致血型抗原减弱或缺失，而血型抗原减弱或缺失的主要因素为恶性血液疾病、试剂干扰、ABO亚型、恶性实体肿瘤；ABO血型抗原抗体出现正定型额外反应的主要因素为ABO亚型、自身抗体，反定型额外反应的主要影响因素为血清蛋白较高、同种抗体、试剂、同种抗体及自身抗体、自身抗体；临床上可针对患者的疾病史、自身血液情况等进行针对性的血清学试验来确认患者的ABO血型，对患者的血型进行准确的区分，进而保证患者临床上输血的安全性。