耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的分布与耐药性分析

骆 曦，向国云

（重庆市万州区上海医院检验科，重庆 404120）

在现代临床中，肠杆菌科细菌属于十分常见且重要的致病菌种类，共包含70 多种细菌，其中阴沟肠杆菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌较为常见，易出现在人体多个重要器官、组织中[1-2]，从而使患者发生尿路感染、呼吸道感染、消化系统感染、血流感染等。近年来随着临床上抗生素的广泛应用[3-4]，使得对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌逐渐增多，且其耐药性越来越高，治疗的难度也越来越大，受到了全世界医学者的广泛关注[5-6]。目前，我国各级医院肠杆菌科细菌的检出数量明显增多，尤其是耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌数量的增加，为临床治疗带来了极大挑战[7-8]。本文主要是分析耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的分布与耐药性，为临床合理用药提供指导，保障患者用药的安全性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本文的研究对象是2020 年1 月至12 月期间我院实验室分离出的100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌。检测标本包括尿液标本、痰液标本、脓液本病、血样标本等。

1.2 方法

1.2.1 仪器 细菌测定系统，型号：DL-96 Ⅱ，产品注册号：粤械注准20152400595，生产厂家：珠海迪尔生物功能有限公司。

1.2.2 试验方法 根据质控菌、实验菌微量稀释法- 药物敏感性试验获取最小抑菌浓度（MIC），并分别用水稀释成4 个不同药物浓度，以备用。向比浊管中按拉丁方排列分别加入配置好的各浓度药物1.0 mL，然后加入9.0 mL 合适浓度的菌悬液，使菌液的终浓度为5×105 cfu/mL，使药物的终浓度分别为MIC、1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC。将含有不同浓度药物、菌液混悬液的比浊管放置于细菌测定系统中，培养温度为37℃，监测间隔时间为30 min，监测时间为16 h，对实时吸光度进行测定。采用微生物系统对菌株类别进行鉴定，并开展药物敏感性试验（药敏试验），采用mic 浊度法对菌株的耐药性进行检测，利用改良Hodre 试验法对肠杆菌科细菌的耐碳青霉烯类抗生素的效能进行测定分析。

1.3 观察指标

观察100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的分布、检测标本来源、科室分布及耐药性。

1.4 统计学方法

用SPSS 21.0 软件处理本研究中的数据，计量资料用±s表示，用t检验，计数资料用% 表示，用χ² 检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的分布

在100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中，共有肺炎克雷伯菌83 株（占83.0%），阴沟肠杆菌12 株（占12.0%），大肠埃希菌5 株（占5.0%）。详见表1。

表1 100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的分布

2.2 耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的检测标本来源

在100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中，有50株（占50.0%）细菌分离自痰液标本，有27 株（占27.0%）细菌分离自尿液标本，有13 株（占13.0%）细菌分离自脓液标本，有10 株（占10.0%）细菌分离自其他标本。详见表2。

表2 耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的检测标本来源

2.3 100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的科室分布

在100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中，有72株（占72.0%）细菌来源于重症监护室，有11 株（占11.0%）细菌来源于呼吸内科，有9 株（占9.0%）细菌来源于心血管与肾内科，有8 株（占8.0%）细菌来源于其他科室。详见表3。

表3 100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的科室分布

2.4 100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性分析

在100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中，阴沟肠杆菌对氨苄西林、头孢呋辛、头孢西丁、头孢唑林的耐药性最高（均达到100%），对复方新诺明、哌拉西林、替卡西林、头孢吡肟、头孢曲松、头孢他啶的耐药性较高；大肠埃希菌对氨苄西林、头孢噻肟、头孢唑林、头孢曲松、复方新诺明、头孢呋辛的耐药性较高；肺炎克雷伯菌对头孢噻肟的耐药性最高（达到100%），对氨苄西林、呋喃妥因、氯霉素、头孢吡肟、复方新诺明、头孢呋辛、头孢曲松、头孢唑林均有一定的耐药性（均达到10% 以上）。详见表4。

表4 100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性分析（%）

3 讨论

近年来的临床研究发现，在感染标本中分离出的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的数量逐年增多[8]。耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌具有较高的耐药性及多重耐药性，因此此类病原菌所致感染的致死率高于其他病原菌，具有更大的风险[9]。本研究的结果显示，在100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中，共有肺炎克雷伯菌83 株，阴沟肠杆菌12 株，大肠埃希菌5 株。其中，有50 株细菌分离自痰液标本，有27 株细菌分离自尿液标本，有13 株细菌分离自脓液标本，有10 株细菌分离自其他标本；有72 株细菌来源于重症监护室，有11 株细菌来源于呼吸内科，有9 株细菌来源于心血管与肾内科，有8 株细菌来源于其他科室。肠杆菌科细菌属于革兰阴性菌，主要存在于人体的呼吸道、尿道及消化道中，可引发呼吸道感染、泌尿系统感染及消化系统感染[10]。耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性较高，其原因在于：耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌多来源重症监护室，而重症监护室收治的患者普遍存在病情危重、高龄、免疫功能低下、需要接受气管插管或气管切开术、留置导管等情况，因此其应用的广谱抗生素较多，且用药时间较长[11]，易导致病原菌出现严重的耐药性，增加临床治疗的难度[12-13]。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素产生耐药性的机制主要是：1）肠杆菌科细菌可产生碳青霉烯酶；2）肠杆菌科细菌可产生AmpCβ 内酰胺酶（AmpC 酶），且存在膜孔蛋白缺失的情况；3）肠杆菌科细菌青霉素结合蛋白（PBPs）的结构发生改变。文献报道，耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的产生与外膜孔蛋白的丢失及产酶情况有关[14-15]。肠杆菌科细菌在上述机制的共同影响下，可使其对碳青霉烯类抗生素的耐药性越来越强。本研究的结果显示，在100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中，阴沟肠杆菌对氨苄西林、头孢呋辛、头孢西丁、头孢唑林的耐药性最高（均达到100%），对复方新诺明、哌拉西林、替卡西林、头孢吡肟、头孢曲松、头孢他啶的耐药性较高；大肠埃希菌对氨苄西林、头孢噻肟、头孢唑林、头孢曲松、复方新诺明、头孢呋辛的耐药性较高；肺炎克雷伯菌对头孢噻肟的耐药性最高（达到100%），对氨苄西林、呋喃妥因、氯霉素等抗生素均有一定的耐药性。研究指出，虽然耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌对阿米卡星的耐药性较低[16]，但此药的肾毒性较为明显，因此临床上在应用此药时要严格控制其用药剂量，在保证患者治疗有效性的同时尽量减少其不良反应，提升其治疗的安全性[17-18]。美罗培南和亚胺培南是临床上常用的β 内酰胺类抗生素，具有较强的抑菌活性及较广的抗菌谱，能有效抑制革兰阴性菌[19]，尤其是对于肠杆菌科细菌，能产生较强的抑菌活性。美罗培南和亚胺培南的抗菌机制是：阻碍细菌细胞壁粘肽的合成，使细菌的胞壁缺失，并提升酶的稳定性及细胞膜的通透性[20]。本研究的结果显示，在100 株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中，肺炎克雷伯菌的占比为83.0%，阴沟肠杆菌的占比为12.0%，大肠埃希菌的占比为5.0%。这与张贞等[21]的研究结果（在耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中肺炎克雷伯菌的占比为85.0%，阴沟肠杆菌的占比为11.0%，大肠埃希菌的占比为4.0%）基本一致。虽然耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌多分布于欧美国家，但近年来于我国耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的检出数量明显增加，因此临床上应提高重视度，以减少耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌感染的发生。

综上所述，本研究中分离出的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌主要为肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和大肠埃希菌，其中阴沟肠杆菌和大肠埃希菌的耐药性均较高，肺炎克雷伯菌的耐药性相对较低。