QuEChERS-气相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中拟除虫菊酯类农药残留

黄锦殷

（佛山市食品药品检验检测中心，广东佛山 528000）

我国是鸡蛋生产和消费大国，鸡蛋作为我国居民日常膳食的重要组成部分，其质量安全应当引起重视。作为动物源性食品，鸡蛋中的兽药残留一直是其主要安全风险因素，但其农药残留状况同样不可忽视。例如，2019年欧洲“毒鸡蛋”事件是鸡蛋因受农药氟虫腈污染，致使大量蛋鸡被宰杀[1]。鸡蛋中的农药残留主要是由饲料原料带入，蛋鸡采食后农药及代谢物在鸡蛋内沉积[2]。此外，农药和兽药并无明显的界限，一些常见的农药如敌敌畏、马拉硫磷、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯等也作为兽药纳入《食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》（GB 31650—2019）[3]的管理。若养殖户使用不规范，可能导致蛋鸡和鸡蛋受到污染。本文对鸡蛋中的15种拟除虫菊酯类农药残留进行探索，结合QuEChERS前处理和气相色谱-串联质谱法，建立了一种蛋类中农药多残留的检测方法，该方法简便快捷，灵敏度高，定量准确，能满足食品安全国家标准的检测需求。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

鸡蛋，于佛山市内超市及农贸市场分散采购。

标准品：外环氧七氯B（内标）；七氟菊酯；烯丙菊酯；联苯菊酯；苯醚菊酯；胺菊酯；甲氰菊酯；氟丙菊酯；氯氟氰菊酯；氯菊酯；氟氯氰菊酯；氯氰菊酯；氟氰戊菊酯；氰戊菊酯；氟胺氰菊酯；溴氰菊酯。乙腈、乙酸乙酯，均为分析纯；

QuEChERS萃 取 盐 包（含4 g无 水 硫 酸 镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、1.5 g柠檬酸二钠）；QuEChERS净 化 管（含900 mg硫 酸 镁 和150 mg PSA）；0.22 µm微孔有机滤膜。

1.2 仪器与设备

气相色谱-三重四极杆串联质谱仪；氮吹仪；电子天平；均质器；离心机；涡旋振荡器。

1.3 实验方法

1.3.1 标准溶液配制

准确称取一定量的各农药和外环氧七氯B，用乙酸乙酯分别配制成1 000 mg·L-1的农药混合储备液和100 mg·L-1的外环氧七氯B内标储备液，再分别稀释成10 mg·L-1的农药混合工作液和5 mg·L-1的内标溶液，-18 ℃避光储存。各农药根据需要用空白样品基质逐步稀释配成基质标准曲线以供使用。

1.3.2 试样制备

取约1 kg新鲜鸡蛋洗净去壳后用组织匀浆机充分搅拌均匀，放入聚乙烯瓶中冷藏保存。

1.3.3 样品前处理

称取10 g试样于50 mL塑料离心管，加入 20 mL预先在4 ℃冷却的乙腈，涡旋混合3 min。加1包萃取盐包，盖上离心管盖，剧烈振荡1 min， 5 000 r·min-1离 心5 min。吸 取10 mL上 清 液 到 一支净化管中，涡旋混匀1 min，5 000 r·min-1离心 5 min，准确吸取2 mL上清液于10 mL试管中，40 ℃水浴氮吹至近干。加入20 µL内标溶液（5 mg·L-1），加入1 mL乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜，用于测定。

1.3.4 仪器条件

色 谱 柱：VF-1701ms色 谱 柱（30 m×0.25 mm× 0.25 µm）；色谱升温程序：40 ℃保持1 min，然后以40 ℃·min-1升至120 ℃，再以5 ℃·min-1升至 240 ℃，再以12 ℃·min-1升至300 ℃，保持6 min；载气：氦气（≥99.999%）；流速：1.0 mL·min-1；进样口温度：280 ℃；进样量：1 µL；不分流进样；电离能量：70 eV；离子源温度：280 ℃；传输线温度：280 ℃；扫描方式：多反应监测（MRM）；内标法定量。多反应监测条件见表1。

2 结果与分析

2.1 前处理选择

传统动物源性样品检测农药残留时多采用有机溶剂提取，凝胶渗透色谱净化的方式，我国多个动物源性食品中农药多残留的检测标准如GB/T 5009.19—2008[4]、GB/T 5009.162—2008[5]、GB/T 20772—2008[6]等也采用这一前处理方法。但凝胶渗透色谱一般来说普遍存在净化时间长、溶剂用量大的缺点。QuEChERS法由于操作简便、溶剂消耗少、速度快、效率高等优点，已越来越多地用于动物源性样品前处理中[7-9]。

目前主流的QuEChERS前处理法主要包括EN 15662：2018法（乙腈提取，萃取盐包含柠檬酸和柠檬酸钠）[10]以及AOAC 2007.01法（乙酸-乙腈提取，萃取盐包含乙酸钠）[11]。本文对两种方法均进行了实验，结果表明两者对拟除虫菊酯类农药的回收率、检出限、精密度等的影响区别不大，没有显著 差异。

表1 多反应监测（MRM）条件

2.2 线性范围、检出限和定量限

用空白样品基质配制成5.0～200.0 ng·mL-1系列标准溶液，结果表明各化合物在此范围内线性均良好，线性系数R2均在0.997以上。15种化合物及内标的总离子流图见图1。以3倍信噪比法及10倍信噪比法确定各化合物的检出限和定量限，各化合物的线性系数、检出限与定量限结果见 表2。

图1 拟除虫菊酯类农药总离子流图

表2 线性系数、检出限和定量限

目前《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2021）[12]规定了蛋类的107项农药最大残留限量，其中多种拟除虫菊酯类如甲氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯等最大残留限量均设为 0.01 mg·kg-1（ 氯 菊 酯 为0.1 mg·kg-1）； 而 GB 31650—2019则规定溴氰菊酯在蛋类中的最大残留限量为30 µg·kg-1[3]，本方法检出限、定量限均能满足上述检测需求。

2.3 回收率和精密度

在不含上述农药的鸡蛋中添加混合标准溶液，在0.01 mg·kg-1、0.05 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1这3个浓度水平下进行加标回收实验，每个浓度平行测定6次，考察方法精密度。结果表明，各化合物回收率均在80%以上，相对标准偏差为2.5%～8.3%，详见表3。

表3 加标回收率和精密度

2.4 实际样品测定

运用本方法对本市超市和农贸市场售卖的10批次新鲜鸡蛋进行检测，均未发现上述农药残留。

3 结论

本文建立了QuEChERS前处理结合气相色谱-串联质谱法同时测定鸡蛋中多种拟除虫菊酯类农药残留的方法，与传统凝胶渗透色谱的前处理方法相比，消耗溶剂更少，操作更便捷，效率更高，同时该方法灵敏度高，精密度和准确度好，适用于大批量蛋类样品的快速检测。