蜜饯中合成着色剂含量的测定

赵俊峰，冼土秀，温慧敏

（广东省绿色产品认证检测中心有限公司，广东 广州 510440）

引言

近年来，随着民众食品安全意识的提升和市场监督管理局执法力度的加强，食品质量安全深入人心，蜜饯作为常见的零食，其质量优劣关系着消费者的健康。在国家市场监督管理局官方网站，以蜜饯为关键词进行索引，在质量报告专栏查看通报情况，情况却不容乐观。各地市局通告不合格项目主要有四类：一是菌落总数不合格；二是添加剂含量超标，其中尤以糖精钠超标最为常见；三是合成着色剂超标；四是水分含量超标。本文通过比较不同提取方法对蜜饯类食品中合成着色剂的提取效果，为各检测员提供思路，共同达到准确检测的目的。

食品合成着色剂，也称食品合成染料。食品合成色素，是指人工合成的有机着色剂，其具有着色力强，颜色艳丽，不易褪色，稳定性强，成本低廉等优点。但其也存在致毒性，致泄性和致癌性等缺点，因此国标对合成所色剂的添加有严格规定[1-3]。果品在热烫处理和硫化处理中会发生褐变，添加合成着色剂能显著改变蜜饯的色泽。

1 实验部分

1.1 实验仪器、试剂

Agilent LC1100 高效液相色谱仪（配有紫外检测器）；超声波清洗仪；漩涡振荡仪；旋转蒸发仪。

合成着色剂标准品（柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红）；甲醇，分析纯；乙腈，分析纯；氨水，化学纯；甲酸，分析纯；乙酸铵；聚酰胺小柱，500 mg/6 mL。

1.2 前处理方法

1）国家标准法5009.35[4-5]水提取法：称取1 g～2 g粉碎样品（精确至0.001 g），放入50 mL 离心管中，加水30 mL，温热溶解，分2 次提取，用柠檬酸溶液调节pH 到6 左右。经过甲醇、水活化的聚酰胺小柱，分2 次用3 mL 10%氨水甲醇洗脱，用空气吹干，以1∶1流动相定容，使用0.22 μm 聚四氟乙烯水相膜过滤，上机。

2）氨水甲醇提取法：准确称量1 g～2 g 样品（精确值0.001 g），放入50 mL 离心管中，用15 mL 10%氨水甲醇分2 次超声提取，以70 ℃振荡提取1 h，重复提取2 次，合并上清液。用旋转蒸发仪蒸至剩约5 mL，用柠檬酸溶液调节pH 至6 左右。过柱，淋洗，洗脱，用空气吹干，用1∶1 流动相定容，上机。

3）甲酸甲醇提取法：准确称取1 g～2 g 样品（精确值0.001 g），用15 mL 10%甲酸甲醇分2 次超声提取，其余步骤同上。

1.3 标准曲线配置

将柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红用一级水配成100 μg/mL 的混合标准溶液，并逐级稀释为1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 μg/mL 的标准系列溶液。

1.4 色谱条件

Agilent Eclipse plus C18（4.6×250 mm，5 μm），柱温35 ℃，波长254 μm，流速1.0 mL/min，进样量为10 μL，流动相：A 为甲醇，B 为0.02 mol/L 乙酸铵溶液。梯度洗脱表如表1。

表1 梯度洗脱程序

2 实验数据

2.1 标准校正曲线的建立

本实验选用3 种不同的提取方法对蜜饯中合成着色剂进行提取，通过建立标准曲线，比较不同方法回收率确定提取效率，除提取条件不同外，其余实验条件均相同。总结归纳不同条件对色素提取的影响，得出提取效率最高的方法。

将标准系列溶液同样以10 μL 进样，以质量浓度为横坐标轴，以峰面积为纵坐标绘制标准曲线图，通过回归计算求得回归方程与回归系数。若回归系数为0.999 以上，则说明该标准系列曲线配置良好，适宜作为标准曲线验证待测物质含量。由表2 可知，本次各组分回归系数均大于0.999，故标准曲线的建立是准确的。

表2 色素标准曲线校正表

2.2 试样色谱图

试样色谱图见图1～图3。

图1 国家标准法水提取色谱图

图2 氨水甲醇提取法色谱图

图3 甲酸甲醇提取法色谱图

2.3 实验回收率与准确度

按照既定条件连续测定不同方法提取相同质量待测样品的合成着色剂含量，并计算其回收率，其结果如表3 所示。本实验的准确度以相同提取方法在相同待测参数间回收率差值的绝对值来表示，两次回收率的绝对差值低于5%，则说明该方法稳定性强，重复性好。经过计算，本次相同方法各参数的回收率差值均在5%以内，说明在实验过程中没有明显差错，增加了实验结论的可信度。通过比较，发现使用氨水甲醇提取法在各种合成着色剂的提取效率均优于水提取法和甲酸甲醇提取法。甲酸甲醇提取法的提取效率显著低于水提取法和氨水甲醇提取法，合成着色剂偶氮类结构决定了其在酸性溶液中的溶解度较差，在水及碱性溶液中的溶解度较好。各食品检测人员可使用碱性氨水甲醇溶液提高合成着色剂检测的准确性。

表3 各实验方法的回收率 %

3 实验结论及建议

本实验通过对不同提取方法对蜜饯的实验，得出使用10%氨水甲醇方法提取在各种人工色素的提取中效果均为最优的结论。对于含糖量高、提取困难的蜜饯样品，可以通过碱性甲醇溶液提取的方法进行提取，需要进行说明的是，准确测定蜜饯中的人工着色剂，不仅可以优化改善提取方法，也可以从样品的制备角度进行改善，建议在样品冷冻状态下进行制样，在常温制样常常不能充分均质，样品仍为粘连的块状，而非细小的粉末状，这对于准确测定也是有较大影响。