日粮中添加鲜柠檬对地方鸡生产性能、蛋品质和盲肠微生物的影响

■孙 帅 豆腾飞 黄 英 赵 筱 刘丽仙 贾俊静* 李琦华

（1.云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明 650201；2.云南农业职业技术学院畜牧兽医学院，云南昆明 650031）

鸡蛋富含蛋白质、脂质、维生素和矿物质，被人们誉为全营养食品。同时鸡蛋又有易吸收、价格低廉和易加工等特点，在全世界的食品消费中有着极高的地位。我国是禽蛋生产和消费大国，禽蛋产量居世界首位[1]，同时我国土地辽阔，有着丰富的地方禽类资源，据《中国家禽遗传资源志·家禽志》收录，我国家禽遗传资源地方鸡种已经高达100余种[2]。地方鸡虽然产蛋性能不如商品蛋鸡，但低产蛋率使得营养物质积累时间充足，风味口感更好[3]。如何提高地方鸡的生产性能，一直是家禽育种的重要内容。

柠檬富含柠檬酸、维生素C 和糖类等营养物质，是具有药用价值的水果之一，对人和动物十分有益。柠檬中含有的柠檬酸和其他有机酸对畜禽的作用类似复合酸化剂，能够通过调控肠道pH、抑制病原菌生长来维护肠道健康、提高机体免疫力和养分利用率[4]。已有研究表明，日粮中添加鲜柠檬能够显著提高鸡蛋的蛋品质[5-6]，还能有效缓解产蛋后期产蛋率下降速率，提高饲料报酬[6]。云南是我国柠檬的主要产地[7]，但每年收获季节相当数量卖相不好但不影响食用的残果难以销售，此问题一直困扰着果农。本试验利用云南剥隘鸡、盐津乌骨鸡和河南固始鸡为研究对象，探讨日粮中添加鲜柠檬对地方鸡生产性能、蛋品质和盲肠微生物的影响。旨在为柠檬资源的优化利用和改善地方鸡生产性能和蛋品质提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

鲜柠檬，品种尤力克，购自云南西双版纳。试验所用剥隘鸡、盐津乌骨鸡和固始鸡由云南农业大学实验鸡场提供。

1.2 试验设计

试验采用单因子完全随机设计。分别选取均为60 周龄、体况正常、产蛋率和体重相近的剥隘鸡144 只、盐津乌骨鸡120 只、固始鸡208 只，每个品种随机分为2 组（对照组和试验组），每组4 个重复（剥隘鸡每个重复18只鸡、盐津乌骨鸡每个重复15只鸡、固始鸡每个重复26 只鸡），对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮，试验组在基础日粮中添加3.5%的鲜柠檬（将柠檬洗净，切片后用搅拌机榨浆，然后与饲料混合），每2 d拌料一次。参照NRC（2004）和中华人民共和国专业标准（ZB B 43005—86）《蛋鸡的饲养标准》，结合地方鸡品种及本地的情况，设计基础日粮配方，日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.3 饲养管理

饲养试验在云南农业大学实验鸡场进行。试验鸡采用三层阶梯式笼养，自由采食和饮水，每天9：00和16：00喂料。温度控制在20 ℃左右，每天光照16 h，每天清粪1次，鸡舍自然通风与机械通风相结合。预试期为7 d，正试期为90 d。预试期内将鲜柠檬添加到基础日粮中，添加比例由低到高，保证试验鸡不会因日粮的突变产生应激。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生产性能

试验期间每天相同时间（16：00）对各组各重复的产蛋数进行记录，计算产蛋率。以自然周为单位，每周一早上回收余料，计算平均日采食量。

1.4.2 蛋品质

每周周四进行一次蛋品质测定，上午在各组各重复中随机取8枚鸡蛋，共32枚，2枚备用。取完鸡蛋后立即进行蛋品质检测。用电子天平称量蛋重和蛋黄重；用电子游标卡尺测量鸡蛋的纵径与横径，计算蛋形指数；用日本Robotmation 公司model-Ⅲ型蛋壳强度仪测定蛋壳强度；用日本Robotmation 公司EMT-7300多功能蛋品质测试仪测定蛋白高度、哈夫单位和蛋黄色泽。

1.4.3 盲肠大肠杆菌与乳酸杆菌数量

试验进行到第90天时每组每个重复随机挑选1只鸡进行屠宰，将盲肠两端结扎然后取出，放入-20 ℃冰箱保存备用。使用前4 ℃解冻，待融化后在超净工作台内室温下取出盲肠食糜0.5 g，置于装有49.5 g的生理盐水的三角瓶中，振荡3～5 min，制成10-2稀释液，然后继续用生理盐水依次倍比稀释到10-7。每个稀释度溶液取100 mL 接种到含有培养基的培养皿中，每个稀释度3 个重复，大肠杆菌使用麦康凯培养基37 ℃培养24 h 计数，乳酸杆菌使用莫匹罗星锂盐（Man Rogosa Sharpe Medium，MRS）培养基37 ℃厌氧培养48 h计数，计数时选择最适宜的稀释度进行平板计数（以30～300个菌落为宜），求其平均值，结果用lg CFU/g表示。

1.4.4 统计与分析

试验数据采用Excel 2019 软件进行整理，采用SPSS 26.0统计软件进行t检验和因子分析。t检验结果数据以“平均值±标准差”表示，各处理平均值间的比较采用Duncan’s 法进行多重比较，P＜0.05 表示差异显著。因子分析先对数据进行KMO和巴特利特球形检验，结果以成分矩阵的方式表示。

2 结果与分析

2.1 日粮添加3.5%鲜柠檬对地方鸡产蛋率和平均日采食量的影响（见表2）

表2 日粮添加3.5%鲜柠檬对地方鸡产蛋率和平均日采食量的影响

由表2 可知，盐津乌骨鸡试验组与对照组相比，产蛋率从42.62%降低到31.34%，呈显著降低（P＜0.05），平均日采食量无显著差异（P＞0.05）。在日粮中添加3.5%鲜柠檬对剥隘鸡和固始鸡平均日采食量和产蛋率影响均不显著（P＞0.05），但剥隘鸡试验组产蛋率较对照组提高4.11个百分点。

2.2 日粮添加3.5%鲜柠檬对地方鸡蛋品质的影响（见表3～表5）

表3 日粮添加3.5%鲜柠檬对盐津乌骨鸡蛋品质的影响

表4 日粮添加3.5%鲜柠檬对剥隘鸡蛋品质的影响

表5 日粮添加3.5%鲜柠檬对固始鸡蛋品质的影响

由表3可知，日粮中添加3.5%鲜柠檬对盐津乌骨鸡鸡蛋的蛋形指数、蛋壳强度、蛋重、蛋白高度、蛋黄色泽、哈夫单位、蛋黄重的影响均不显著（P＞0.05），但是试验组鸡蛋哈夫单位和蛋壳强度有不同程度的降低，哈夫单位降低了1.75，蛋壳强度降低了0.21 kg/cm2。

由表4 可知，相比对照组，在日粮中添加3.5%鲜柠檬能显著提高剥隘鸡鸡蛋的蛋白高度和蛋黄重（P＜0.05）；哈夫单位和蛋重分别提高了2.24 和4.69 g，但差异不显著（P＞0.05）；对于蛋形指数、蛋壳强度、蛋黄色泽无显著影响（P＞0.05）。

由表5可知，相比对照组，在日粮中添加3.5%鲜柠檬会使固始鸡试验组鸡蛋的蛋壳强度从3.40 kg/cm2显著降低到3.10 kg/cm2（P＜0.05），蛋重从66.15 g显著降低到62.53 g（P＜0.05）。对蛋白高度和哈夫单位虽然影响不显著，但是也有不同程度的降低，蛋白高度降低了0.44 mm，哈夫单位降低了3.15。蛋形指数、蛋黄色泽、蛋黄重等无显著影响（P＞0.05）。

2.3 日粮添加3.5%鲜柠檬对地方鸡盲肠微生物的影响（见表6）

表6 日粮添加3.5%鲜柠檬对地方鸡盲肠微生物的影响（lg CFU/g）

由表6 可知，在日粮中添加3.5%鲜柠檬能显著提高盐津乌骨鸡、剥隘鸡和固始鸡的盲肠乳酸杆菌数量（P＜0.05），同时显著地降低盲肠大肠杆菌的数量（P＜0.05）。

2.4 因子分析（见表7、表8）

表7 成分矩阵

表8 旋转后成分矩阵

由于采用单一品种两个处理t检验的方式，3 个品种地方鸡的生产性能和蛋品质反应有差异，所以用因子分析的方式对差异指标进行二次分析，结果如表7和表8所示。由表7、表8可知，因子1和因子2在矩阵旋转前后对指标的影响指数变化不大，结合两因子的累计贡献率，表明两因子对指标的诠释度较好，因子1对蛋黄重、蛋重和蛋白高度影响较大，因子2 对蛋壳强度影响较大，因子1和因子2都对产蛋率影响较小。

3 讨论

3.1 日粮中添加3.5%鲜柠檬对地方鸡生产性能的影响

本试验在日粮中添加3.5%鲜柠檬对盐津乌骨鸡、剥隘鸡和固始鸡的采食量无显著影响，与Boling等[8]的研究结果基本一致，但刘艳丽等[4]的研究表明，日粮中添加0.05%酸化剂能显著提高蛋鸡的平均日采食量，可能是由于鲜柠檬可以一定程度上改善饲料的适口性，但还不足以显著影响采食量。鸡的产蛋性能受品种、日龄、营养水平和饲养管理等多种因素的影响。本试验在日粮中添加3.5%鲜柠檬对剥隘鸡和固始鸡的产蛋率无显著影响，但盐津乌骨鸡试验组的产蛋率呈显著降低。本试验选取的是60周龄产蛋后期的地方鸡，各项生理机能已经开始退化，单纯改变饲粮结构可能无法起到良好作用。其次，本试验柠檬的添加量设定为3.5%，是否是最佳添加量，还有待进一步研究，将地方鸡品种与是否添加柠檬作为双因子进行因子分析，结果显示因子1 和因子2 都不是产蛋率降低的主要因素。有报道显示，在64 周龄海兰褐壳蛋鸡的日粮中添加2%的鲜柠檬，虽然对产蛋性能无显著影响，但是产蛋率下降了1%，软破壳蛋率上升了0.2%[5]。盐津乌骨鸡产蛋率下降可能是由鸡自身的日龄和柠檬添加量共同作用的结果。

3.2 日粮中添加3.5%鲜柠檬对地方鸡蛋品质的影响

蛋白高度是衡量蛋白品质和鸡蛋新鲜度的重要指标[9]，蛋白高度越高鸡蛋越新鲜，并且蛋白高度关联鸡蛋的大小[10]。Drabik 等[11]的研究表明，柠檬酸可以改善鸡蛋的蛋白高度和哈夫单位。蛋黄是鸡蛋的核心部分，鸡蛋的营养成分主要集中在蛋黄里[12-13]，蛋黄越大，鸡蛋的营养水平越高[14]。本试验结果显示，日粮中添加3.5%鲜柠檬可以显著提高剥隘鸡鸡蛋的蛋白高度和蛋黄重，改善蛋品质，但作用机理尚需进一步探明。日粮中添加鲜柠檬对盐津乌骨鸡鸡蛋的各项蛋品质指标无显著影响，但会使固始鸡鸡蛋的蛋重和蛋壳强度显著降低，并且蛋白高度和哈夫单位也有不同程度的下降，这与Grashorn等[15]和刘璐璐等[5]的研究结果相反，Grashorn等[15]试验选用的是产蛋中期的蛋鸡，刘璐璐等[5]的试验表明，在60周龄蛋鸡日粮中添加鲜柠檬和柠檬酸，鸡蛋的蛋壳强度呈先升高后下降的趋势，截至60 d试验结束时，蛋壳强度还在下降，而本试验的试验周期为90 d，此外，盐津乌骨鸡的蛋品质虽然没有显著变化但是蛋壳强度也有一定程度的降低。因子分析结果显示，因子1对蛋白高度、蛋黄重和蛋重影响较大。有研究表明，鸡蛋的蛋品质性状主要取决于母鸡的品种[14]，蛋品质会随着蛋鸡年龄的增长而下降[16]，由此推测因子1可能代表着不同的品种，因子2代表着是否添加鲜柠檬。Pearlin等[17]报道称由于胃肠道微生物群的差异性，酸化剂对不同品种蛋鸡蛋品质的影响结果不同。本试验在日粮中添加3.5%鲜柠檬对3个品种地方鸡蛋品质的影响结果不同，这种结果可能是地方鸡的品种、日龄、是否添加鲜柠檬以及鲜柠檬的添加量等多因素共同作用造成的，当试验鸡的日龄较大时，添加鲜柠檬能否起到显著地改善生产性能和蛋品质作用以及试验鸡品种不同时最适添加量应当如何调整，是有待进一步研究的重要内容。

3.3 日粮中添加3.5%鲜柠檬对地方鸡盲肠微生物的影响

乳酸菌是动物肠道菌群中最主要的有益菌之一，是以乳酸杆菌、双歧杆菌、拟杆菌为主的优势菌群，占肠道总菌量的90%以上[18]。Gao 等[19]研究发现，日粮中添加有机酸能增加肉鸡盲肠中乳酸杆菌数量，并降低大肠杆菌和沙门氏菌数量。王阳等[20]的研究表明蛋鸡饮水系统添加微酸性电解水或常规酸化剂能提高蛋鸡肠道乳酸杆菌数量并降低大肠杆菌数量。鲜柠檬中富含柠檬酸和苹果酸等多种有机酸，其中最主要的是柠檬酸，其含量约为（16±6）mg/g[5]，本试验中在日粮中添加3.5%鲜柠檬折合柠檬酸当量约为560 mg/kg。柠檬酸够降低肠道pH，进而促进有益菌的生长，抑制有害菌的增殖。本试验结果表明，在日粮中添加3.5%鲜柠檬能显著提高盐津乌骨鸡、剥隘鸡和固始鸡的盲肠乳酸杆菌数量，显著降低3个品种地方鸡的盲肠大肠杆菌数量，与前人的研究结果基本一致，在日粮中添加鲜柠檬对地方鸡的肠道环境改善具有积极意义。

4 结论

①日粮添加3.5%鲜柠檬对剥隘鸡和固始鸡的生产性能无影响，但是会降低盐津乌骨鸡的产蛋率。

②日粮中添加3.5%鲜柠檬可以提高剥隘鸡鸡蛋的蛋白高度和蛋黄重，降低固始鸡鸡蛋的蛋壳强度和蛋重，对盐津乌骨鸡鸡蛋的蛋品质无影响。

③日粮中添加3.5%鲜柠檬可以提高盐津乌骨鸡、剥隘鸡和固始鸡的盲肠乳酸杆菌数量，降低大肠杆菌数量。