线栓法大脑中动脉闭塞性兔脑缺血模型稳定性提升的研究

王泽洋 孙宇强 杨林 焦昌平

在临床治疗中，缺血性脑血管疾病是较为常见的疾病，有较高的发病率，严重威胁着人们的身体健康及生命安全[1-3]。当前缺血性脑血管疾病已经发展成为影响人类身体健康的重大疾病，而且发病率逐年升高，会造成患者神经功能障碍、肢体功能障碍等，给患者及患者的家庭带来较大的负担[4]。为了提高缺血性脑血管疾病的治疗效果，临床上做了很多的实验和研究，寻找新的治疗方法和技术，大脑中动脉闭塞模型是当前常见的脑血管动物模型，通过运用该模型，进行治疗方法的实验研究，可以减少对机体的伤害，不断地完善治疗方法[5]。线栓法是一种不开颅、损伤小、可重复操作的一种治疗方法，有诸多的优点，在缺血性脑血管疾病动物模型中，利用线栓法进行实验分析，可以不断地改进方法，提高治疗的稳定性[6]。文章就针对提升线栓法大脑中动脉闭塞性兔脑缺血模型稳定性进行研究，具体如下。

1 材料与方法

1.1 一般材料

选择2019年12月—2021年12月黑龙江省医院神经外科动物模型研究部门喂养成功的40只新西兰成年雄性家兔（C57BL／6J），作为研究对象，将其随机分为两组，一组实施线栓法大脑中动脉闭塞模型，一组实施假手术大脑中动脉闭塞模型。线栓法大脑中动脉闭塞模型组20只新西兰雄性家兔，清洁级，健康状态良好，月龄4～6个月，平均月龄为（5.02±0.12）个月，体质量2.5～3.5 kg，平均体质量为（2.83±0.23）kg。假手术大脑中动脉闭塞模型组20只新西兰雄性家兔，清洁级，健康状态良好，月龄4～6个月，平均月龄为（5.03±0.14）个月，体质量2.4～3.4 kg，平均体质量为（2.81±0.22）kg。两组一般资料对比差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

家兔在模型制备前禁食禁水6 h，并给与麻醉药物进行麻醉，在麻醉的状态下进行模型的制备。

手术方法：使用PE-50管加热拉长，外径0.35 mm，采用直径0.234 mm尼龙线做导丝，导丝头均匀钝圆，紫外线消毒后置于1%的肝素溶液中备用。

模型制备：使用改良版的Nabavi造模方法进行实验，经耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠进行全身麻醉，在麻醉成功之后，对兔子的颈部进行备皮消毒，在颈部行一个正中的切口，长度在4～5 cm，将其右侧的颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉进行暴露，完后结扎颈外动脉，在进行分离时，注意避免对伴性神经的损伤。在距离颈总动脉分叉处近端约1～2 cm处进行颈总动脉结扎，在结扎线的远端，使用小动脉夹夹闭颈总动脉，并在结扎线的近端靠近动脉夹处，将导丝（头端直径为0.234 mm）送入切口处并缓慢的插入、固定，向上遇到动脉夹后，将动脉夹打开，沿着颈内动脉将导丝向上插到大脑中动脉起始部位，感受到阻力后即可停止。计算导丝插入的长度，并颈总动脉分叉处计算插入深度5 cm，如果血流反流不明显，则说明模型制作成功，可以缝合手术切口，将导丝尾端留在皮外，如果将导丝退出至颈总动脉，则可以恢复兔子的大脑供血，拔出导丝后，在切口处按压数分钟进行止血处理。

假手术组线栓置入的深度为2 cm，其他操作同线栓法组，模型制备的过程室温控制在25℃左右，造模术后，将家兔放入饲养箱中，自由进食、饮水。

1.3 观察指标

针对两组家兔的血压、血气、血糖、脑血流情况、神经功能等指标进行监测对比。

神经功能测定为模型成功后24 h，使用Purdy标准[7]，进行维持7 d的记录，对家兔的意识、行为、转头、转圈、偏盲等进行神经功能评分，分值在2～11分，分值越高神经功能丧失越严重，最低为2分，表示家兔可以正常活动，无神经功能损伤，最高分11分，此时家兔动物意识已经丧失或是死亡。

血压、血气、血糖的监测，家兔仰卧位，将后肢腹股沟处，分离股动脉，接入血压检测仪进行血压、心率、体温等的检测，在大脑中动脉闭塞模型制作前20 min，以及模型成功后2 h进行测定。

脑血流情况在定点医院实验室进行监测，家兔俯卧位，颅骨打孔，固定激光多普勒探头，对脑血流情况进行监测。

1.4 统计学处理

采用统计学软件SPSS 21.0，对本次研究中的数据进行处理，计量资料使用（±s）表示，不同组别的生理指标检测结果使用t检验进行评估，其中P＜0.05，代表差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血压、血糖的比较

在本次研究中，线栓法组与假手术组家兔模型制备前的血压、血糖差异无统计学意义（P＞0.05），模型制备后线栓法组的血压、血糖与假手术组差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型制备前相比，线栓法组变化较小，家兔的血压、血糖稳定性较好。具体见表1。

表1 两组模型制备前后的血压、血糖比较（±s）

表1 两组模型制备前后的血压、血糖比较（±s）

注：与同组模型制备前相比，*P＜0.05。

2.2 血气指标比较

在本次研究中，模型制备前两组的血气指标差异无统计学意义（P＞0.05），两组模型制备后的血气指标比较，差异有统计学意义（P＜0.05），模型制备后线栓法组的血气指标变化较小，假手术组变化较大，线栓法大脑中动脉闭塞模型的稳定性更好。具体见表2。

表2 两组模型制备前后的血气指标比较（±s）

表2 两组模型制备前后的血气指标比较（±s）

注：与同组模型制备前相比，*P＜0.05。

2.3 脑血流情况比较

在本次研究中，模型制备前两组的脑部血流指标差异无统计学意义（P＞0.05），模型制备后，两组的脑部血流指标差异有统计学意义（P＜0.05），与模型制备前相比，假手术组变化较大，线栓法变化较小。具体见表3。

表3 两组模型制备后的脑血流情况比较（±s）

表3 两组模型制备后的脑血流情况比较（±s）

注：与同组模型制备前相比，*P＜0.05。

2.4 神经功能比较

在本次研究中，在模型制备前两组家兔的神经功能评分差异无统计学意义（P＞0.05），但是模型准备后有两组的神经功能缺损评分差异有统计学意义（P＜0.05），与模型制备前相比，线栓法组神经功能缺失评分变化较小。具体见表4。

表4 两组模型制备前后的神经功能缺损评分情况比较比较（分，±s）

表4 两组模型制备前后的神经功能缺损评分情况比较比较（分，±s）

3 讨论

随着社会和经济的发展，人们的生活质量和经济水平得到显著的提升，随着人们生活质量和生活水平的提升，人们的身体状态得到改善，进而大大地延长了人们的寿命。在人们寿命延长的过程中，因为各种因素的影响，会造成人们诱发各种疾病，尤其是随着年龄的增长，身体机能下降，很容易诱发一些老年性疾病，例如心血管疾病、脑血管疾病等，大大地威胁着人们的身健康和生命安全[8]。

缺血性脑血管疾病是当前严重威胁人类身体健康的重大疾病之一，而且发病率呈现逐年升高的趋势，致残率、死亡率较高，还对患者的身心健康有较大的影响，给患者及家庭、社会带来较大的负担[9]。为了提高缺血性脑血管疾病的治疗效果，需要对其发病机制有详细的了解和认识，并制定有效的治疗方法进行治疗。在缺血性脑血管疾病中，大脑中动脉闭塞是较为常见的类型，该类型也是缺血性脑血管疾病中常见的疾病类型，针对大脑中动脉闭塞，制定大脑中动脉闭塞模型，对然后对大脑中动脉闭塞模型采用不同的方法进行干预治疗，研究治疗方法，争取在大脑中动脉闭塞缺血性脑血管疾病治疗中，找到最佳的治疗方法，减少对机体的伤害，提高治疗效果[10-11]。

在大脑中动脉闭塞模型的制备和治疗研究中，一般采用的为大鼠大脑中动脉闭塞模型，但是该模型在制备、治疗等中有较多的影响因素，例如大鼠的体质量、线栓、麻醉剂、插线深度等等，对实验的结果有较大的影响，为了更好地研究大脑中动脉闭塞缺血性脑血管疾病的治疗，在大鼠大脑中动脉闭塞模型的基础上，延伸产生家兔大脑中动脉闭塞模型，以家兔为对象，制备大脑中动脉闭塞模型，并展开研究[12]。在本次研究中，就针对提升线栓法大脑中动脉闭塞性兔脑缺血模型稳定性进行了研究，以家兔大脑中动脉闭塞模型为基础，进行了研究，以线栓法和假手术法进行对照分析，结果显示线栓法治疗组家兔模型制备前后的血压、血糖变化不明显，而假手术组的血压、血糖变化显著，模型制备后的家兔血压、血糖比较中，线栓法与假手术组差异有统计学意义（P＜0.05）；在模型制备前两组家兔的血气指标比较无显著差异，但是制备后差异较大，同时与模型制备前比较，线栓法对家兔的血气指标产生的影响较小，治疗效果相对稳定。从家兔的神经功能及脑血流情况进行分析，线栓法对家兔神经功能及脑部血流情况产生的影响较小，不会加重患者的神经功能缺损以及脑组织的供血情况。从研究的结果可以发现，线栓法大脑中动脉闭塞模型的稳定性更好，不会产生较大的影响。

大脑中动脉闭塞模型是当前缺血性脑血管疾病病理机制及预防措施研究的主要手段，制作简单，可重复性好，家兔是当前用来研究大脑中动脉闭塞模型的首选动物，因为家兔的脑血管结构与人体的脑组织结构较为相似，其次是因为家兔的头部较大，可以进行呢核磁共振扫描，便于观察家兔的脑部组织的血流情况[13-14]。线栓法家兔大脑中动脉闭塞模型的线栓在颈内动脉插入的深度以及线栓头端的直径是模型制备成功的关键，合理地选择线栓的直径，以及控制插入的深入，可以提高大脑中动脉闭塞模型制备成功几率，更好地进行缺血性脑血管疾病预防治疗的研究[15]。

综上所述，在大脑中动脉闭塞模型研究中，采用线栓法进行大脑中动脉闭塞模型的制备无需开颅，对机体产生的损伤小，可重复性较强，稳定性较好，对家兔的神经功能产生的影响较小等，可以在之后的大脑中动脉闭塞模型研究中，进行使用。