烧伤整形患者血清Toll样受体4和髓样细胞触发受体1表达水平及影响因素分析

华 振，赵卓伟，段策中，霍君艺

(空军军医大学唐都医院烧伤整形科，陕西 西安 710038)

人体烧伤组织会出现缺损、增生，严重影响外观，并造成不同程度的功能障碍，患者生理和心理负担沉重。烧伤后整形能够改善甚至完全恢复外观和功能，随着医学技术的发展和实践经验的积累，烧伤整形手术日渐成熟[1]。但由于烧伤通常创面较大，手术切口多，损伤组织皮瓣对外界病原菌抵抗能力较差，相对于其他整形手术，其术后发生感染等并发症的风险较高[2-3]。烧伤患者体内存在大量微生物及其代谢产物，能够激活全身性炎症反应，这对整形手术而言也是较大的挑战[4]。炎症反应在烧伤患者伤后、整形手术中具有至关重要的作用，其中Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)[5]、髓样细胞触发受体1(Triggering receptor expressed on myeloid cell 1，TREM1)[6]是目前发现的两种重要的促炎症因子，可引起机体组织和器官损伤。但目前关于烧伤整形患者TLR4和TREM1表达的研究较少。鉴于此，本研究探讨烧伤整形患者血清TLR4和TREM1水平及影响因素，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将2019年2月至2022年2月期间本院烧伤整形科收治的烧伤整形患者58例(烧伤整形组)和健康体检者50例(健康对照组)作为研究对象。烧伤整形组男性37例，女性21例；年龄19～65岁，平均(37.16±5.83)岁；平均烧伤面积(59.29±11.73)cm2；烧伤部位中，头面部19例，四肢24例，背部13例，胸腹部2例；烧伤原因中，热液烧伤21例，火焰烧伤19例，电烧伤14例，其他5例。健康对照组男性32例，女性18例；年龄22～68岁，平均(37.86±6.28)岁。两组性别构成及年龄比较差异无统计学意义(均P>0.05)。纳入标准：烧伤整形组患者在本院接受烧伤治疗整形；临床资料完整；知情同意。排除标准：合并重大器质性疾病；妊娠期、哺乳期女性；急危重症烧伤；中途退出及失访者。本研究已通过医院伦理委员会审批。

1.2 研究方法

1.2.1 资料收集：收集并记录患者年龄、性别、体重、身高、基础疾病(高血压和糖尿病)、创面瘢痕、整形手术时间、抗菌药物种类、术区残留瘢痕、术区残留创面、术后感染等。根据体重和身高计算体重指数(BMI)。感染诊断标准参照《医院感染诊断标准(试行)》[7]中切口感染诊断标准。

1.2.2 实验室检测：采集研究对象晨起空腹静脉血5 ml，室温静置1 h后3000 r/min离心10 min，分离血清。分别采用人TLR4酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒(批号：ab277392，英国Abcam公司)和人TREM-1 ELISA试剂盒(批号：ab270884，英国Abcam公司)检测血清TRL4和TREM1水平。每个样本均重复检测3次，以平均值作为该样本TRL4和TREM1含量。

2 结 果

2.1 烧伤整形组与健康对照组血清TRL4和TREM1表达水平比较 见表1。烧伤整形组血清TRL4和TREM1表达水平显著高于健康对照组(均P<0.05)。

表1 烧伤整形组与健康对照组血清TRL4和TREM1表达水平比较(ng/ml)

2.2 烧伤整形患者血清TRL4和TREM1表达水平的相关性 见图1。Perason分析结果表明，烧伤整形患者血清TRL4和TREM1水平呈正相关(r=0.613，P<0.05)。

图1 烧伤整形患者血清TRL4和TREM1表达水平的相关性

2.3 烧伤整形患者血清TLR4和TREM1表达水平影响因素单因素分析 见表2。单因素分析发现，增生性瘢痕、整形手术时间、抗菌药物种类、术区残留瘢痕、术区残余创面、术后感染是影响烧伤整形患者血清TLR4表达水平的重要因素，而增生性瘢痕、整形手术时间、术区残余创面、术后感染是影响烧伤整形患者血清TREM1表达水平的重要因素(均P<0.05)。

2.4 烧伤整形患者血清TLR4和TREM1表达水平影响因素Logistic回归分析 见表3、4。分别以烧伤整形患者血清TLR4和TREM1表达水平作为因变量，以增生性瘢痕、整形手术时间、抗菌药物种类、术区残留瘢痕、术区残余创面、术后感染作为自变量，进行多元Logistic回归分析，结果表明增生性瘢痕、整形手术时间≥180 min、抗菌药物种类>2种、术区残余创面、术后感染是烧伤整形患者血清TLR4表达水平的独立危险因素，而增生性瘢痕、整形手术时间≥180 min、术区残余创面、术后感染是烧伤整形患者血清TREM1表达水平的独立危险因素(均P<0.05)。

表3 烧伤整形患者血清TLR4表达水平影响因素Logistic回归分析

表4 烧伤整形患者血清TREM1表达水平影响因素Logistic回归分析

3 讨 论

烧伤是临床常见的一种复杂的皮肤损伤性疾病，可造成不同程度的生理紊乱、组织坏死，皮肤损伤后病原微生物极易侵入体内引起感染，严重者甚至发生全身性炎症反应和脓毒症，引起患者死亡[8-9]。烧伤后皮肤外观通常不佳，患者心理压力较大；四肢烧伤和面部烧伤可能造成部分生理功能缺损，给患者正常生活、工作造成严重不良影响，通过整形能够改善患者外观和生理功能，是目前烧伤后治疗的重要组成部分[10]。在烧伤患者治疗和康复过程中炎性因子一直贯穿始终，成为影响预后的关键因素。因此，近年来逐渐有学者关注烧伤整形患者炎性程度及相关的生物标志物[11]。

本研究发现，与健康对照组相比，烧伤整形患者血清TLR4和TREM1表达水平显著增加。TLR4是非特异性免疫细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞表面的一种跨膜蛋白，胞外区富含亮氨酸，能够和CD14分子中的亮氨酸重复序列结合进而介导蛋白间反应，胞内区为高度保守序列，能够与白细胞介素(IL)-1受体结合进而诱导下游信号通路、蛋白激酶发挥免疫活性[12-13]。烧伤患者血液中含有较多的细菌代谢产物，其中以细菌脂多糖激发机体炎症反应的能力最强，脂多糖与TLR4胞外区结合后，跨膜信号能够通过胞内区激活转录因子，进而促进各种炎症因子表达[14]。TREM1是免疫球蛋白超家族的成员，是一种中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞表面表达的髓系细胞表面受体，能够应答内源性和外源性信号因子。TREM1也是炎症反应的上游因子，细菌和脂多糖均能够促进TREM1表达水平增加，在脓毒症中TREM1表达水平增加后可促进肺等组织和全身炎症损伤[15-16]。本研究还发现，烧伤整形患者血清TLR4和TREM1表达水平呈正相关，与刘燕等[17]研究结果一致。已有研究[18]发现，Toll样受体中各种配体亚型都能够明显上调TREM1表达水平，单核细胞TREM1与其抗体结合后在TLR4、TLR3等配体协同作用下放大促炎因子产生。

本研究进一步发现，增生性瘢痕、整形手术时间≥180 min、术区残余创面、术后感染是影响烧伤整形患者血清TLR4和TREM1表达水平的独立危险因素，抗菌药物种类>2种是影响患者血清TLR4表达水平的独立影响因素。增生性瘢痕是一种较为严重的皮肤纤维化疾病，其形成与免疫、遗传、细胞凋亡等密切相关。有研究[19]发现，细菌感染和长时间炎症反应在增生性瘢痕具有关键性作用。邱荣等[20]研究发现，烧伤患者增生性瘢痕组织中TLR4表达水平及IL-6、IL-8等炎性因子水平均显著高于正常皮肤组织，且TLR4表达水平与炎性细胞因子水平间存在显著的正相关性。烧伤创面及整形手术创面愈合过程中发生的炎症反应可引起损伤皮肤组织代谢改变，在较长时间的炎性微环境下炎性因子持续表达，刺激TLR4和TREM1表达，进而引起成纤维细胞代谢异常，胞外基质蛋白过度沉积，最终引起增生性瘢痕[21]。

手术时间过长将造成创面长期暴露，提高了细菌侵入概率，增加了感染风险；术区创面有残余时，容易滋生病原微生物，引起感染；围手术期抗生素使用超过2种可能存在抗生素滥用，患者容易出现耐药性，既无法取得良好的预防感染效果，还可能增加术后感染风险。对于烧伤整形患者，需要从以下几方面减少炎症反应和感染风险，以降低血清TLR4和TREM1表达水平，进而缩短炎症反应持续时间：①术前做好准备，尽量缩短手术时间，避免创面长时间暴露，同时对手术室、器械进行严格消毒；②合理使用抗生素，一方面应通过病原菌鉴定和耐药检测针对性地选择抗菌药物，另一方面应尽量缩短用药时间；③烧伤整形术前应对瘢痕褶皱和残余创面进行彻底清洁，去除污垢和坏死组织，术后应认真检查是否存在残余创面。

综上所述，血清TLR4和TREM1表达水平能够反映烧伤整形患者全身炎症程度，并与多种因素密切相关，应控制整形手术时间，提高创面愈合，预防术后感染，合理使用抗生素。但本研究未对烧伤整形患者TLR4和TREM1相互作用机制进行深入探讨，且由于纳入病例较少，结果可能存在一定偏倚，仍需进行大样本量和基础性研究来确定烧伤整形患者TLR4和TREM1表达水平的临床应用价值及影响因素。