复合微生态制剂对蛋鸡生产性能、蛋品质及免疫功能的影响

何骥远，黄友解，郎芯蕊，商煜波，邵强，林继和，刘文强，董信阳，王友明*

（1.浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310012；2.苍南县农业农村局，浙江温州 325800；3.嘉兴嘉华牧业有限公司，浙江嘉兴 314000；4.泰顺县农业农村局，浙江温州 325500）

在标准化、设施化养殖模式下，动物生活空间狭小，环境条件受限，易受多种应激因素影响，导致生产性能下降，目前抗生素存在诸多副作用，寻找抗生素替代品格外重要。微生态制剂是一类利用有益微生物及其代谢产物制成的生物活菌制剂，可用于畜禽健康养殖。微生态制剂具有促进动物生长、降低耗料增重比、提高机体细胞免疫和体液免疫的能力，以及改善饲养环境、提高畜产品品质等功能。复合微生态制剂是将多种有益菌复合，可协同发挥多菌种的生物学活性。前期研究表明，枯草芽孢杆菌能够改善产蛋后期蛋鸡的肠道健康及生产性能。本试验研制了由芽孢杆菌（3 株）和乳酸菌（1 株）组成的复合微生态制剂，研究其对蛋鸡生产性能、蛋品质及免疫功能的影响，为其今后推广应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 复合微生态制剂由乐清田丰生物科技有限公司生产并提供。该制剂由3 株可耐受酸性环境的枯草芽孢杆菌和1 株乳酸菌及其发酵产物组成，主要成分为枯草芽孢杆菌和乳酸菌，为粉状物。经浙江大学测定，本批次含枯草芽孢杆菌活菌数6.5×10CFU/g（芽孢形成率88.4%），乳酸菌活菌数5.3×10CFU/g，木聚糖酶和中性蛋白酶的酶活分别达1 133.4、118.3 U/g。

1.2 试验设计 选择健康状况良好、体重、产蛋率基本一致的产蛋中后期（49 周龄）京粉蛋鸡336 只，随机分成4 组，每组4 个重复，每个重复21 只。对照组饲喂基础饲粮，试验组在饲粮中分别添加0.5%、1%、1.5%复合微生态制剂（等量基础饲粮中的麸皮、沸石粉）。预试期7 d，正试期56 d。

1.3 试验饲粮组成 参照《鸡饲养标准》（NY/T33-2004）的蛋鸡营养需要并结合生产实践配制基础饲粮，饲粮组成及营养成分见表1。

表1 饲粮组成及营养成分（风干基础）

1.4 饲养管理 饲养试验在泰顺县西旸镇金三角养殖专业合作社进行。采用4 层阶梯式笼养。试验前打扫、清理鸡笼和消毒。试验期间，按标准喂食120 g/（d·只），每只鸡日喂3 次，每次在原来的基础上继续添料，自由饮水，其他管理按常规进行。

1.5 生长性能测定 以重复为单位，每天记录剩料量、产蛋数、合格蛋重和次品蛋数（破壳蛋、软壳蛋等）、死淘、腹泻次数情况。计算产蛋率、次品蛋率、平均蛋重、平均采食量、料蛋比、腹泻率。计算公式：

产蛋率=产蛋数/试验鸡数×100%

次品蛋率=次品蛋数/产蛋数×100%

平均蛋重=合格蛋总重/合格蛋数

平均采食量=（投料量–剩料量）/每组蛋鸡存栏数

料蛋比=平均采食量/平均蛋重

腹泻率=各栏累计腹泻鸡只天数/各栏累计饲养鸡总只天数×100%

1.6 蛋品质测定 试验最后1 d，每组抽取32 枚新鲜鸡蛋（每个重复8 枚，重量基本一致），检测蛋品质。蛋重、蛋白高度、哈氏单位、蛋黄颜色、蛋壳厚度、蛋壳强度指标采用日产DET-6000 蛋品质测定仪测定。

1.7 屠宰及样品采集 试验结束次日，每组随机选取大小基本一致且健康的12 只蛋鸡（每个重复3 只），空腹称重后进行翅下采血，装入促凝管中，待血清析出后离心，3 500 r/min 离心10 min，血清分装于Eppendorf管中，并于-20℃条件下保存待测。血清白细胞介素-4（IL-4）、肿瘤坏死因子-（TNF-）水平采用ELISA试剂盒测定，试剂盒来源于南京建成生物工程研究所；免疫球蛋白IgG 水平在杭州市第二人民医院采用全自动生化分析仪（OLYMPUS AU5421+ISE 型，日本OLYMPUS 公司）测定。

试鸡采血后安乐死并屠宰，取肝脏、脾脏称重。器官指数计算公式：

器官指数（g/kg）=器官重/宰前活重

1.8 统计分析 数据采用Excel 整理后，用SPSS 16.0软件进行统计，采用单因子方差分析进行差异显著性检验，最小显著差数法（LSD）进行多重比较，结果均以平均值±标准差表示，以<0.05 作为差异显著性判断标准。

2 结果

2.1 复合微生态制剂对蛋鸡生产性能的影响 由表2 可知，各组产蛋率、平均蛋重、次品蛋率、料蛋比均差异不显著。1.0% 和1.5% 复合微生态制剂组均低于0.5%复合微生态制剂组和对照组（<0.05）。

表2 复合微生态制剂对蛋鸡生产性能的影响（n=21）

2.2 复合微生态制剂对蛋品质的影响 由表3 可知，蛋壳强度随着微生态制剂添加量增加而增加（>0.05）；0.5%、1.0%复合微生态制剂组蛋黄颜色较对照组分别提高6.99%、11.40%（<0.05）。

表3 复合微生态制剂对蛋品质的影响（n=32）

2.3 复合微生态制剂对蛋鸡体重及器官指数的影响 由表4 可知，各组间宰前活重、脾脏指数差异不显著；1.5%复合微生态制剂组肝脏指数较对照组提高了11.34%（<0.05），0.5%、1.0% 复合微生态制剂组略高于对照组（>0.05）。

表4 复合微生态制剂对体重及器官指数的影响（n=12）

2.4 复合微生态制剂对蛋鸡血清免疫指标的影响 由表5 可知，1.5%复合微生态制剂组IgG、IL-4 水平较对照组分别提高54.75%、51.99%（<0.05），0.5%、1.0%复合微生态制剂组略高于对照组（>0.05）；0.5%、1.0%、1.5%复合微生态制剂组TNF-水平较对照组分别降低42.45%、56.20%、36.41%（<0.05）。

表5 复合微生态制剂对蛋鸡血清免疫指标的影响（n=12）

3 讨 论

3.1 复合微生态制剂对蛋鸡生产性能的影响 由于蛋鸡品种、日龄以及菌种和菌种活性不同，复合微生态制剂对蛋鸡生产性能的影响有较大差异。李晓丽等研究表明，复合微生态制剂组产蛋率、平均蛋重均高于对照组，但影响不显著。本试验中，与对照组相比，复合微生态制剂对蛋鸡全期产蛋率和平均蛋重的提高未达到显著水平，只有腹泻率显著下降。可能是因为微生态制剂进入肠道后可分泌多种酶类，与体内的酶发生协同作用，加快饲料中大分子物质降解，同时能够消耗肠道内的游离氧，使肠道形成了低氧环境，抑制大肠杆菌等需氧病原菌的入侵和定植，促进肠道健康，使腹泻率显著降低。同时益生菌在肠道定植、生长竞争了肠道营养，也可能是其促进生产性能效果不明显的原因。

3.2 复合微生态制剂对蛋品质的影响 哈氏单位、蛋白高度、蛋壳厚度、蛋壳强度和蛋黄颜色是评价蛋品质的重要指标。本研究发现，试验组蛋白高度、蛋壳强度和哈氏单位与对照组差异不显著；0.5%、1.0%复合微生态制剂组蛋黄颜色较对照组分别提高6.99%、11.40%。李俊波等研究也发现，在饲粮中枯草芽孢杆菌制剂能够提高蛋壳强度，但本试验中蛋壳强度仅是有所增加。胡昌艳等在饲粮中添加枯草芽孢杆菌+乳酸菌复合微生态制剂可提高蛋鸡产蛋的蛋壳厚度，改善蛋品质。白子金等与吕远蓉等研究表明，在饲粮中添加复合微生态制剂可有效提高鸡蛋的蛋黄颜色。复合微生态制剂可促进蛋白合成和沉积，提高蛋白高度和哈氏单位；还可以为肠道创造良好的消化环境，促进蛋鸡对钙和磷等矿物质的吸收，提高血清钙、磷水平，为蛋壳生成提供充足的钙磷供应，提高蛋壳强度。另外，复合微生态制剂还可以促进肠道健康，提高脂肪消化，进而促进色素的消化、吸收和转运，并在代谢中合成类胡萝卜素，进而加深蛋黄颜色。

3.3 复合微生态制剂对蛋鸡免疫功能的影响 本试验结果表明，复合微生态制剂可显著提高IgG 含量、IL-4水平，显著降低TNF-水平。冯敏山等研究表明，以乳酸菌为主要成分的微生态制剂对鸡血清中IgG 含量有提高趋势；祝天龙等研究显示，枯草芽孢杆菌能有效提高血清中IgG 含量、补体C3 和C4。本研究中肝脏指数略有增加，可能某种因素刺激作用引起，其增大可能对促进代谢、提高免疫有一定帮助，有待于进一步的研究。微生态制剂能够刺激蛋鸡肠道，促进肠道T淋巴细胞和B 淋巴细胞成熟，从而增强体液免疫；微生态制剂中的有益菌株还可以作为免疫激活剂，增强动物机体免疫器官能力，从而提高机体的免疫力。

4 结 论

本试验结果表明，在基础饲粮中添加1%复合微生态制剂可显著提高蛋黄颜色，改善蛋品质，添加1.5%复合微生态制剂可显著提高IgG 含量、IL-4 水平及肝脏指数，显著降低TNF-水平，可提高蛋鸡免疫力，推荐使用剂量为1%。