9817例女性人乳头瘤病毒感染现状分析

徐彩炎 任俊逸 刘会强 祁 君 滕秀香

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，研究表明，宫颈癌是女性癌症死亡的第3大病因[1]。人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是一种无包膜的双链环状DNA病毒，主要通过性传播，是宫颈癌致病的主要因素之一[2]。HPV按照致癌潜能分为高危型、中危型和低危型，高危型包括16、18、33、35、39、45、51、52、56型等，其中16和18型最为常见，可导致70%的鳞状细胞癌和80%以上的宫颈腺癌[3]。然而在不同地区、年龄、人种之间，HPV基因型的分布与不同的种族、地区和习俗相关[4～6]。北京地区近3年未见大规模HPV感染流行病学报道，不能有效地反映当前本地区HPV的感染情况[7]。本研究通过分析2019～2022年于首都医科大学附属北京中医医院健康体检中心及妇科门诊的9817例女性HPV及薄层液基细胞学技术(TCT)检测结果，分析出其分布、构成及相关性，为北京地区HPV疫苗研发、宫颈疾病的筛查和防治提供数据支持。

材料与方法

1.资料来源：9817例女性患者来源于2019年1月～2022年4月于首都医科大学附属北京中医医院就诊的健康体检人群、妇科门诊患者。纳入患者年龄为18～89岁，患者平均年龄为39.34±8.76岁。按照年龄段共分为6组：<25岁、25～34岁、35～44岁、45～54岁、55～64岁及≥65岁。所有患者均为初次就诊，且有性生活史。所有患者均知情，自愿参与检查。本研究通过笔者医院医学伦理学委员会审批。

2.标本采集:使用窥阴器充分暴露宫颈，用棉拭子将宫颈口过多的分泌物轻轻擦拭干净，将一次性采样器插入宫颈，紧贴宫颈口，顺时针稍用力转动5～10圈，以取得足够的脱落细胞；将采样器放入装有标本保存液的瓶内轻摇洗涤数次，尽量将细胞洗脱下来，拧紧瓶盖，立即送检。

3.标本检测:采用荧光PCR法对HPV分型进行检测，试剂盒为HPV核酸分型测试剂盒，其中包括30种HPV亚型，包括13种高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)，5种中危型(HPV26、53、66、73、82)和12种低危型(HPV6、11、40、42、43、44、54、61、70、72、81、89)。由专业检测人员记录核实检测结果。TCT检测：TCT结果按照组织病理学TBS分类法分为8种类型：①未见上皮内病变(no intraepithelial lesions or malignant lesions，NILM)；②无明确诊断意义的不典型鳞状细胞(atypical squamous cell of undetermined significance，ASC-US)；③不能排除高级别鳞状上皮内病变不典型鳞状细胞(atypical squamous cells-cannot exclude HIS，ASC-H)；④低级别鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion，LSIL)；⑤高级别鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesions，HSIL)；⑥鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma，SC)；⑦不典型腺上皮细胞(atypical glandular epithelial cells，AGC)；⑧腺原位癌(adenocarcinoma in situ，AIS)。

4.统计学方法:应用SPSS 26.0 统计学软件对数据进行统计分析，计数资料以百分数(%)表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

1.HPV感染基本特征: 9817例患者中，HPV感染人数为2024例，阳性率为20.6%，其中单一亚型感染1510例(74.6%)，多重感染514例(25.4%)，高危型感染1158例(57.2%)，中危型感染142例(7.0%)，低危型感染81例(4.0%)。在测序的30种基因亚型中，HPV26、40、54、61、70、72、89亚型未在样本中检出。高危型感染前5位分别是HPV52(5.22%)、HPV58(2.98%)、HPV16(2.91%)、HPV51(2.51%)和HPV56(1.61%)。具体HPV基因亚型分布情况如图1所示。

图1 HPV各亚型感染率分布

2.HPV各亚型在不同年龄段构成比: 高危型HPV 阳性率最高是25～34岁(39.5%)及45～54岁(15.9%)人群，其中HPV16亚型在<25岁HPV感染女性中占11.16%，在25～34岁感染女性中占10.87%，在35～44岁感染女性中占9.35%，感染率占比随着年龄增长逐渐下降，但≥65岁女性感染率所占比例又稍上升。HPV52亚型感染女性在各个年龄段的感染率所占比例都位居首位，而且分布较稳定(16.26%～19.54%)，只在≥65岁女性感染率所占比例稍下降(11.76%)。HPV33、HPV6亚型在不同年龄段构成比中比较，差异有统计学意义(P<0.05)，其他HPV亚型在不同年龄段构成比中比较，差异无统计学意义。不同年龄段各个亚型的构成比详见表1。

表1 HPV各亚型在不同年龄段构成比(%)

3.单一或多重感染:2024例感染病例中，感染类型以单一感染为主，单一感染率13.81%，在阳性病例中占67.33%，多重感染以双重感染多见，在阳性病例中占21.85%，详见表2。

表2 HPV感染亚型数目及所占比例

4.各型HPV感染中不同TCT病理结果的构成比:对2024例HPV阳性病例的TCT结果进行分析，可见HPV16、HPV82在细胞学改变中差异有统计学意义(P<0.05)。HPV16在LSIL及HSIL中均占据构成比首位，HPV52在NILM构成比中所占比例最大，HPV58在ASC-US及ASC-H构成比中所占比例最大,详见表3。

表3 各型HPV感染中不同TCT病理结果的构成比(%)

讨 论

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤相关性死亡疾病之一，也是世界上唯一病因明确的妇科恶性肿瘤。宫颈癌发生于子宫颈的鳞状上皮和柱状上皮移行交界处，这是一个极易发生化生过程的部位，宫颈上皮持续感染1种或多种致癌类型的HPV会导致癌前病变，如不及时诊断和治疗，在10～20年内将逐渐发展为浸润性宫颈癌[8]。研究表明，在99.7%的宫颈癌患者中可发现HPV[9]。宫颈癌的主要组织学类型为鳞状细胞癌，占宫颈癌的95%，其余为腺癌和其他类型的上皮肿瘤[10]。

HPV感染是危害人类健康最常见的病毒之一，迄今为止共发现了100余种亚型。80%的女性在其一生中都可能感染过HPV，然而90%的HPV感染是暂时的，可以在感染后的8～10个月内通过自身免疫系统清除。目前普遍认为HPV16和HPV18是世界上最主要的高危亚型，然而在亚洲，HPV52和HPV58则更为常见[11]。

HPV疫苗是目前避免HPV感染最主要的方法之一[12]。然而现有的HPV疫苗是根据西方国家HPV感染特征制备的，我国HPV疫苗的研发和应用仍然处于起步阶段，我国各地区人口特征不同，HPV感染情况和特征也不同[13]。

本研究通过分析9817例北京地区女性宫颈上皮细胞样本HPV基因检测结果，评估了HPV在人群中的感染情况及相关基因分型的分布特征以及与TCT病理结果的相关性。结果显示，北京地区女性HPV感染率为20.5%，高于世界范围女性HPV总体感染率(10.4%)，考虑与来笔者医院妇科门诊就诊时患者已有症状相关[4]。感染率前3位的亚型分别是HPV52、HPV58和HPV16，该数据与2022年茅书为等[14]对南京市女性HPV感染的调查结果相符，也与2014年冯金鸽等[15]对北京地区女性HPV感染的调查结果基本相符。根据2020年Zhang等[16]对中国女性HPV感染的调查结果，感染率最高的HPV亚型依次为HPV16、HPV52和HPV58，也与本研究结果基本相符。

本研究显示，不同年龄段HPV感染率呈现“双峰”分布，感染高峰在25～34岁及45～54岁，这与国外流行病学调查所发现的HPV感染率随年龄分布呈现“中间低，两头高”的V形规律相符[17]。然而国外研究的两个高峰值分别在20～24岁以及40～49岁，本研究的感染高峰年龄段均较国外资料延迟5年左右，考虑原因可能为：①选择人群偏差问题，来就诊的部分女性可能已经有相关症状或已经发生病变，而年龄较小的女性就诊多是为了健康筛查；②30岁左右女性性生活较为活跃，较易感染HPV；③55岁左右的女性，多数属于围绝经期状态，雌激素水平降低，生殖系统免疫功能降低，清除病毒的能力减弱，故容易造成HPV感染。目前我国HPV九价疫苗限定16～26岁，四价疫苗限定9～45岁接种，而我国不同地区HPV感染特征具有地区差异性[18～20]。根据本研究北京地区高危型HPV感染高峰在25～34岁及45～54岁，针对此年龄段女性应加强HPV及TCT筛查，及时接种HPV疫苗。本研究还发现，HPV33、HPV6这2种亚型在不同年龄段中阳性构成比例有显著差异，提示此2种亚型HPV易感染的年龄段不同，HPV33型应在≥65岁人群中加大筛查力度，而HPV6亚型应在<25岁人群中进行重点筛查。

本研究发现，HPV阳性病例中，感染单种HPV的女性最多，在多重感染中，二重感染者最多，且随着感染亚型数目的增加，感染人数逐渐减少。多重感染的峰值集中在34岁以下，可能与年轻女性性生活活跃相关，故应加强年轻女性预防HPV感染及宫颈癌相关知识宣传教育，扩大HPV疫苗接种范围及宫颈癌筛查力度[21]。

本研究显示，HPV16在LSIL及HSIL中均占据构成比首位，HPV52在NILM的构成比中所占比例最高，HPV58在ASC-US的构成比中所占比例最高，这与HPV16、52、58为最常见的高危亚型相符，也提示HPV16和58亚型更容易导致宫颈上皮的病变，需要更加积极地进行细胞学检测。

综上所述，本研究通过北京地区妇女HPV感染的不同基因亚型感染率分布、不同年龄段基因亚型特征、以及不同TCT表现与HPV亚型的特征，为该地区的HPV疫苗研发、宫颈疾病的筛查和防治提供数据支持。