朱闫陈,陈奕业,田汉晨,吴龙飞,黄依琳,孙宝丽
(华南农业大学 动物科学学院,广东 广州 510642)
随着集约化养殖业的迅速发展,优质蛋白质饲料的缺乏已经成为限制我国养殖业快速发展的因素之一。构树()属于桑科构树属落叶乔木,具有蛋白质含量高,营养丰富,适应力强、生长快和年产量高等诸多优点,近年来得到了学术界与媒体的广泛关注。构树中粗蛋白含量高达20%~30%,必需氨基酸含量优于常见木本植物,各氨基酸组分与含量分配较合理。屠焰等测定了杂交构树叶的常规营养成分、微量元素、氨基酸等,研究表明杂交构树中钙元素、铁元素、锰元素以及锌元素均高于苜蓿草粉和豆粕等常规日粮,而日粮中的矿物质元素具有影响动物的生产性能,调节机体代谢和参与体内的酶促反应等重要生理功能。构树中含有丰富的具有抗氧化功能的物质,如黄酮类物质、木脂素化合物和酚类物质等。此外构树中所含有的黄酮类物质和生物碱对肿瘤细胞具有抑制作用。构树中含有的多种抑菌成分可以有效抑制细菌与真菌的活性,且对人体毒性小,可用于抗菌药的开发利用。研究发现,构树叶中含有木质素、单宁等多种抗营养因子,会影响畜禽对营养物质的吸收。但是通过青贮处理后能大幅降低其中单宁含量,改善饲料的适口性,提高饲料的营养价值。
实际生产中,已经有在日粮中添加经过不同工艺处理的构树饲料的行为。但是现阶段关于构树饲料的安全性和适宜的添加比例等方面的研究仍比较欠缺。本试验以昆明(KM)小鼠为试验动物,研究日粮中添加不同比例构树叶粉对小鼠生长性能、脏器指数以及血清生化指标的影响,旨在为构树作为新型饲料原料用于畜禽生产实践中的安全性提供理论和实践依据。
试验所用构树新鲜树叶采摘自华南农业大学构树种植基地,去除主杆和发黄叶片,保留叶片前段20~30 cm处嫩枝和树叶,于40 ℃烘箱内烘干并粉碎。于华南农业大学动物实验中心购买24只体重(18~20 g)一致的健康4周龄KM公鼠作为试验动物。
将24只遗传背景相同的健康KM公鼠随机分为4个组,每组6只。在小鼠的基础日粮中分别添加0%(对照组:T0)、15%(T15)、25%(T25)、35%(T35)的构树叶粉日粮营养成分见表1。试验预饲期7 d,正式试验期28 d,提供自由采食与饮水。
表1 试验日粮组成及营养水平(干物质基础)Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (DM basis) %
1.3.1 生长性能指标 预饲期结束后,分别在正式试验期的第1,7,14,21,28天的09: 00对小鼠进行称重,记录数据并计算平均日增重。
1.3.2 脏器指数 试验结束后,采用颈椎脱臼法处死小鼠,取下心脏、肝脏、肾脏、脾脏,肺脏并用PBS缓冲液将各器官冲洗干净并用吸水纸擦干,称量各脏器重量,按照下列公式计算脏器指数:
1.3.3 血清生化指标 正式试验结束后,将KM小鼠禁食12 h,采集小鼠一侧眼球的血液。分离血清样品于微量离心管(EP管)后,于-20 ℃冷冻保存。采用全自动生化分析仪测定KM小鼠血清中的谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素(Urea)、总胆固醇(TC)、球蛋白(GLB)、总三碘甲状腺原氨酸(T3)、总甲状腺激素(T4)、白球比(A/G)。
试验数据用Excel软件进行初步整理,使用SAS 9.4软件对数据进行统计分析,用Tukey方法进行多重比较,<0.05 表示差异显著,<0.01 表示差异极显著。
由表2可知,T15组和T25组小鼠平均日增重与T0组差异不显著(>0.05),T35组的KM小鼠平均日增重显著低于T0组(<0.05)。
表2 日粮中添加不同比例构树叶粉对KM小鼠生长性能的影响Table 2 Effects of different proportion of BPL powder on growth performance of KM mice
由表3可知,T15组小鼠的肝脏、脾脏指数显著高于T0组(<0.05);T25组小鼠的肺脏指数显著低于对照组T0(<0.05);T35组小鼠的肝脏指数极显著低于其余三组(<0.01),心脏指数显著低于T0组与T25 组(<0.05)。
表3 日粮中添加不同比例构树叶粉对KM小鼠脏器指数的影响Table 3 Effects of different proportion of BPL powder on organ index of KM mice
由表4可知,与对照组T0相比,试验组小鼠LDH含量均有提高,T15组以及T35组KM小鼠的LDH含量达到极显著水平(<0.01),T25组达到显著水平(<0.05);试验组TC含量均低于T0组,其中T25组和T35组达到显著水平(<0.05);T25组的KM小鼠ALT显著低于T0组(<0.05);相比与T0组,T35组小鼠TP、ALB和Urea含量均显著提高(<0.05)。
表4 日粮中添加不同比例构树叶粉对KM小鼠血清生化指标的影响Table 4 Effects of different proportion of BPL powder on serum biochemical indexes of KM mice
本试验中T35组小鼠的平均日增重显著低于T0组(<0.05),T15组与T25组与T0组差异不显著。可能是由于构树的粗纤维含量较高,在日粮中添加较多构树叶粉会影响日粮的适口性,同时导致日粮能量水平较低,无法满足小鼠的能量需求,造成小鼠增重减慢,这与吴健平等和何国英研究结果一致。同时未经过处理的构树叶粉中含有较多的抗营养因子,会阻碍小鼠对日粮中其他营养物质的吸收,不利于小鼠生长。综上所述,建议在小鼠日粮中构树的添加量不超过25%。
脏器指数指的是器官的重量占体重的百分比,可以在一定程度上反映器官的发育和健康情况。脏器指数在正常范围内的提高表示体内器官功能增强,对机体有益。本试验结果显示构树叶粉对KM小鼠的脏器有不同程度的影响。脾脏是机体重要的免疫器官,对小鼠的免疫系统具有重要影响,肝脏功能众多,是机体代谢的重要场所。T15组KM小鼠的脾脏、肝脏指数显著高于T0组(<0.05),说明日粮中添加15%的构树叶粉可以促进小鼠的脾脏和肝脏的发育,增强小鼠的免疫功能,促进机体代谢活动。与T0组相比,T25组的肺脏指数与T35组小鼠心脏指数显著降低(<0.05),T35组小鼠肝脏指数极显著降低(<0.01),可能是由于添加过量的构树叶粉导致日粮的适口性降低,小鼠采食量减少,同时营养水平下降,小鼠摄取营养不足影响各脏器的发育,也有可能是与构树叶中的抗营养因子有关。综上所述,在日粮中添加 15%左右的构树叶粉可以促进小鼠肝脏、脾脏的发育,且对小鼠其他脏器无不良影响,有利于小鼠的机体健康。
血液生化检查是临床诊断中的重要手段,其指标可以反映机体组织器官的机能是否正常。LDH存在于机体所有组织细胞内,其中肝脏含量最高,可作为评价肝功能受损的主要指标之一。本试验中,T15组和T35组的LDH含量极显著高于T0组(<0.01), T25 组显著高于T0组(<0.05)。可能是由于添加构树叶粉含量过高,影响小鼠对养分的吸收利用,影响肝脏的功能,也可能是构树中某种物质导致小鼠肝功能受损。血清TP含量反应肝脏合成蛋白质的能力,血清TP和ALB含量的升高时,机体蛋白质代谢旺盛。Urea是体内蛋白质代谢产物,血清中Urea含量可用来评价肾小球过滤功能。T35组TP、ALB和Urea含量均显著高于T0组(<0.05),说明日粮中添加构树叶粉可以增强机体蛋白质代谢活动,但是过量会使肾脏功能受损。试验组小鼠TC含量极显著低于对照组T0组(<0.01),说明日粮中添加构树叶粉有利于降低胆固醇含量,降低患心血管疾病的风险。T3和T4都是动物体生长所必需的激素,能够促进机体的生长与代谢活动,本试验中,T15组T4含量显著大于T25组和T35组(<0.05),对机体健康更有利。机体特异性免疫应答水平提升会使A/G值下降。本试验中,T15组A/G值显著低于T35组(<0.05),说明构树叶粉含量过高会损害机体免疫功能。综上所述,建议在小鼠日粮中添加的构树叶粉含量不超过25%,可以降低血清胆固醇含量,且对机体脏器以及其它功能影响较小。
日粮中添加构树叶粉含量不超过25%时能促进小鼠脾脏、肝脏的发育,降低小鼠总胆固醇含量,且对小鼠的生长性能及其他脏器和功能影响较小,大于35%时会导致小鼠生长受阻,部分脏器功能受损。在本试验条件下建议KM小鼠日粮中构树叶粉添加量不高于25%。