酒泉市肃州区生猪屠宰场沙门氏菌污染情况调查与分析

夏冰芝，王志龙

（1.酒泉职业技术学院，甘肃 酒泉 735000；2.酒泉市畜牧兽医总站，甘肃 酒泉 735000）

沙门氏菌属革兰氏阴性菌，在自然界广泛分布且种类众多，目前已知的2 600多种血清型中有部分血清型沙门氏菌（如肠炎沙门氏菌）可感染人，严重时可危及患者生命[1]。人类接触被沙门氏菌污染的水源、食物和粪便等可感染该病，主要临床症状包括急性胃肠炎（如呕吐、腹泻等）、败血症及副伤寒等[2]。诚然，沙门氏菌病是重要的食源性细菌病，对消费者健康造成巨大的威胁。

消费者接触该病原主要是与食用或接触被该病原污染的肉类相关[3-4]。猪肉产品进入市场的第一步是屠宰与加工，而生猪在屠宰和加工过程中容易受食源性病原菌污染。邱燕等调查结果发现，贵州地区屠宰场新鲜猪肉样品沙门氏菌污染率达14.0%（7/50）[5]；韩依辛等调查结果发现，广东10个屠宰场来源猪肉样品沙门氏菌检出率为14.06%（70/498）[6]；周政对湘潭市部分屠宰场来源猪肉和环境样品的检测结果表明，90份猪肉或环境样品沙门氏菌检出率为10.0%，其中环境样品的检出率（15.6%）较猪肉样品的检出率（6.9%）更高[7]。以上文献数据表明当前部分地区屠宰场来源猪肉样品沙门氏菌污染情况较为严重，同时环境样品中细菌污染也不能被忽视。为了解酒泉肃州区部分屠宰场沙门氏菌污染情况，从肃州区2个屠宰场采集屠宰猪肉组织、屠宰器具和环境样品共210份进行检测，并对分离菌血清型和耐药情况进行试验与分析。

1 材料与方法

1.1 样品来源与采集方法

2021年4—9月从酒泉市肃州区2个生猪屠宰场采集猪肉组织样品（105份）、器具样品（42份）和环境样品（63份）共210份。其中猪肉样品包括肺脏、淋巴结和扁桃体等，分别切取少量以上组织样品共约50 g，标记后保存于无菌封口袋；器具主要包括杀猪刀、刮毛刀、运输猪肉或生猪移动车等；环境样品主要包括生猪剖杀台和猪肉分割台。用蘸取少量PBS或生理盐水溶液的棉球在环境或器具样品表面反复涂抹，标记后置于封口袋内。所有样品低温送至酒泉职业技术学院，保存于4 ℃，待检。

1.2 沙门氏菌分离与鉴定

取少量组织样品（肺脏、淋巴结和扁桃体混合物）匀浆；将环境或器具样品所用棉签与少量PBS混匀。使用灭菌接种环蘸取少量匀浆液或混合液后在鲜血琼脂培养基进行平板划线，在适宜环境（37 ℃恒温箱）下培养。其后挑选疑似沙门氏菌菌落在麦康凯培养基表面进行划线，37 ℃恒温箱培养24 h，挑取疑似沙门氏菌进行革兰氏染色和16S rRNA基因序列扩增、测序与分子鉴定[7]。

1.3 沙门氏菌分离株血清型鉴定

将获得的沙门氏菌分离株接种于LB固体和半固体培养基，参照相关国家标准（GB 4789.4—2016）和White-Kauffmann抗原表使用玻板凝集试验对分离株血清型进行鉴定。

1.4 药敏试验

选择15种临床常用抗生素药物（阿莫西林、氨苄西林、氨曲南、头孢他啶、头孢唑林、头孢噻肟、庆大霉素、链霉素、大观霉素、四环素、磺胺甲氧嘧啶、环丙沙星、氯霉素、呋喃唑酮和呋喃妥因），使用药敏纸片琼脂扩散法对本试验获得沙门氏菌分离株进行药物敏感试验[4]。

2 结果

2.1 肃州区屠宰场来源样品沙门氏菌污染情况调查结果

由表1可知，小型屠宰场来源样品沙门氏菌检出率超过大型屠宰场检出率近1倍，分别为12.05%（10/83）和6.30%（8/127）；不同来源样品检出率差异较大，其中环境样品检出率最高，为14.28%（9/63），器具样品和猪肉样品检出率稍低，分别为4.76%（2/42）和6.67%（7/105）。

表1 肃州区屠宰场来源样品沙门氏菌污染情况调查结果

2.2 沙门氏菌分离株血清型鉴定结果

对获得的18个沙门氏菌分离株进行血清型鉴定，结果发现，18个分离株中共鉴定到5种血清型，其中鼠伤寒沙门氏菌最常见，其所占比例为33.33%（6/18）；其次为罗森沙门氏菌和伦敦型沙门氏菌，所占比例均为22.22%（4/18），而肠炎沙门氏菌和德比型沙门氏菌分离菌数量分别为3株和1株，所占比例分别为16.67%（3/18）和5.55%（1/18）。

2.3 沙门氏菌药敏试验统计结果

对分离的18个菌株进行耐药性试验，发现不同菌株耐药谱存在差异。如表2所示，超过50%菌株对阿莫西林、氨苄西林、大观霉素、氯霉素、磺胺甲氧嘧啶和四环素具有耐药性；大部分菌株对氨曲南（94.45%）、头孢他啶（94.45%）、呋喃妥因（94.45%）、头孢唑林（83.33%）、呋喃唑酮（83.33%）和头孢噻肟（77.78%）敏感。

表2 沙门氏菌分离株耐药性检测结果

3 讨论

生猪在饲养、屠宰和运输等过程中容易受到病原菌污染，部分病原菌甚至可感染人，如沙门氏菌和大肠杆菌等，这对消费者和生猪养殖、屠宰和销售等相关人员健康造成巨大的威胁。沙门氏菌属于重要食源性致病菌，该病原在猪场环境中广泛分布。肥育猪感染沙门氏菌可处于隐性感染阶段（不发病但可带毒），在此类肥猪屠宰和售卖过程中，消费者和相关工作人员食用或接触被沙门氏菌污染的肉类可能感染该病。

已有文献表明，屠宰场来源猪肉沙门氏菌污染较为严重，甚至屠宰场环境样品中也分布着沙门氏菌，这对食品卫生威胁较大[5-7]。为初步调查酒泉市肃州区屠宰场沙门氏菌污染情况，笔者从该地区2个屠宰场采集猪肉组织、环境样品和器具样品共210份进行沙门氏菌的分离与鉴定，并分析其血清型和耐药性。结果发现该地区屠宰场来源样品沙门氏菌检出率为8.57%（18/210），其中小型屠宰场来源样品检出率（12.05%）较大型屠宰场检出率（6.30%）高，这可能与小型屠宰场卫生环境较差、生猪收购来源不稳定和屠宰场工作人员疏于对食源性细菌疾病的防控等有关；进一步分析发现，屠宰场环境、器具和猪肉组织样品沙门氏菌检出率分别为14.28%（9/63）、4.76%（2/42）和6.67%（7/105），可见屠宰场应提高卫生管理水平，如定期对环境进行消杀，将屠宰器具反复清洗和消毒等。

在分离的18个沙门氏菌分离株中共检测到5种血清型，其中鼠伤寒沙门氏菌（6株）、罗森沙门氏菌（4株）和伦敦型沙门氏菌（4株）较为常见，而鼠伤寒沙门氏菌属于重要的人畜共患性病原，这也说明该地区屠宰场分布的部分沙门氏菌的确会对公共卫生造成威胁。耐药性试验结果发现，大部分菌株对阿莫西林、氨苄西林、大观霉素和磺胺甲氧嘧啶等具有耐药性，但对头孢类药物相对敏感，如头孢他啶和头孢唑林等，提示猪场对于该病的防治应提前对分离株进行耐药性抗生素筛选，避免药物滥用。