IGRAs在结核性胸膜炎诊断中的应用价值

陈 军，张欢欢，任国英，王慧敏，任雪琴，赵佳辉

（北京东方博大医院检验科，北京 100021）

结核病是临床上常见的一种慢性疾病。此病主要是由感染结核分枝杆菌（MTB）所致，其具有传染性，病变部位包括肺部、脑膜、皮肤等（其中肺部为多发部位）[1-2]。结核性胸膜炎（TBP）主要是因MTB 与其代谢产物深入胸腔内，引起炎症反应后产生大量胸腔积液所致[3-4]。尽早诊断、尽早治疗对控制此病患者的病情具有重要的意义。近年来，随着相关技术的不断发展，γ 干扰素释放试验（IGRAs）逐渐被应用于结核病的临床诊断中。IGRAs 主要是以体外酶联反应斑点试验为基础，通过检测早期分泌性抗原靶-6、培养滤液蛋白-10 抗原刺激后释放的INF-γT 细胞数来判断患者是否感染MTB[5-6]。本文对2018 年5 月至2019 年12 月我院接诊的80 例疑似TBP 患者进行研究，旨在探讨胸腔积液IGRAs 与血液IGRAs 在诊断TBP 中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018 年5 月至2019 年12 月我院接诊的80 例疑似TBP 患者为研究对象。其中有男性49 例（占61.25%），女性31 例（占38.75%）；其年龄为28 ～58 岁，平均年龄（42.36±3.25）岁；其体重指数为18.50 ～26.30，平均体重指数（22.30±1.25）。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 研究对象的纳入及排除标准

纳入标准：1）存在典型的TBP 临床症状（包括发热、畏寒及乏力等）；2）胸腔内有大量的积液；3）无结核病史；4）对临床检查的配合度理想；5）自愿参与本研究，且已签署知情同意书。排除标准：1）处于妊娠期或哺乳期；2）存在凝血功能异常；3）过敏体质；4）存在恶性肿瘤；5）近期内使用过免疫抑制剂；6）近期内使用过抗结核药物；7）有结核病史或结核病接触史。

1.3 方法

为所有入选者均采集胸腔积液与血液进行IGRAs， 方 法 是：采 集 其3 ～5mL 的 外 周 血 与30 ～50mL 的胸腔积液，使用安徽中科中佳科学仪器有限公司生产的离心机（以3000r/min 的转速）进行离心处理，离心时间为10min。完成离心处理后，取上层清液。分别将血液标本与胸腔积液标本置于阳性对照管（P）、阴性对照管（N）、结核刺激管（T）内。分别加入刺激剂，P 加入植物血凝素，N加入磷酸盐缓冲液，T 加入培养滤液蛋白-10（CFP-10）与早期分泌性抗原靶-6（ESTA-6）混合物，摇匀后放入APC-30D 培养箱（注册证号：国械注进20152223362，生产厂家：ASTEC CO.，LTD.）中进行培养，培养温度为37℃，培养时间为20 ～24h。完成培养后，再次以3000r/min 的转速进行离心处理，然后取上层清液。使用北京万泰生物药业股份有限公司生产的试剂盒进行检测，所有操作方法均依据试剂盒说明书进行，使用酶标仪（生产厂家：上海科华实验系统有限公司，型号：HKBST-360）测定450nm波长下的光密度（OD）值，再将标准曲线带入获取N、P、T 各管的干扰素浓度值。结果判断标准是：1）阳性：T-N 值≥14，且≥N/4，N 值≤400 ；2）阴性：T-N值＜14，N 值＜400，P-N 值≥20；3）不确定：（1）P-N 值＜20，T-N 值＜14 ；（2）P-N 值＜20，T-N值≥14 但＜N/4 ；（3）N 值＞400。

1.4 统计学方法

采用SPSS24.0 软件进行数据处理，计量资料用均数± 标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ² 检验。采用Kappa一致性检验法评价IGRAs 与金标准的一致性，Kappa值≥0.74 提示一致性好，≥0.4 但＜0.74 提示一致性一般，＜0.4 提示一致性差。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MTB 培养结果

入选本研究的80 例疑似T BP 患者中有72 例（90.00%）患者的MTB 培养结果为阳性，有8 例（10.00%）患者的MTB 培养结果为阴性。

2.2 用IGRAs 诊断这些患者病情的效果

经MTB 培养结果证实，用血液IGRAs 诊断这些患者病情的准确率为85.00%（68/80），敏感度为86.11%（62/72），特异度为75.00%（6/8），阳性预测值为96.88%（62/64），阴性预测值为37.50%（6/16）；用胸腔积液IGRAs 诊断这些患者病情的准确率为96.25%（77/80），敏感度为97.22%（70/72），特异度为87.50%（7/8），阳性预测值为98.59%（70/71），阴性预测值为77.78%（7/9）。与采用血液IGRAs 相比，用胸腔积液IGRAs 诊断这些患者病情的准确率、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1、表2。

表1 血液IGRAs 结果、胸腔积液IGRAs 结果与MTB 培养结果的对比（例）

表2 用血液IGRAs、胸腔积液IGRAs 诊断这些患者病情效果的比较[%( 例)]

2.3 血液IGRAs、胸腔积液IGRAs 与金标准的一致性

进行Kappa 一致性分析的结果显示，血液IGRAs诊断TBP 与金标准的一致性一般，Kappa 值为0.423；胸腔积液IGRAs 诊断TBP 与金标准的一致性较好，Kappa 值为0.803。胸腔积液IGRAs 诊断TBP 的效果显著优于血液IGRAs。

3 讨论

TBP 是引起胸腔积液的重要因素。此病患者的主要临床表现为出汗、发热、食欲不振、胸痛、呼吸困难等[7-8]。用IGRAs 诊断TBP 的主要原理是TBP患者的体内存在大量的结核特异效应T 细胞，这种T细胞在受到抗原特异性细胞刺激后会生成大量的γ干扰素（γ-IFN），故检测γ-IFN 水平可准确诊断TBP。近年来，随着相关研究的不断深入，IGRAs 在临床诊断TBP 中得到了广泛的应用[9-11]。本研究的结果显示，用血液IGRAs 诊断这些患者病情的准确率为85.00%（68/80），敏感度为86.11%（62/72），特异度为75.00%（6/8），阳性预测值为96.88%（62/64），阴性预测值为37.50%（6/16）；用胸腔积液IGRAs 诊断这些患者病情的准确率为96.25%（77/80），敏感度为97.22%（70/72），特异度为87.50%（7/8），阳性预测值为98.59%（70/71），阴性预测值为77.78%（7/9）。与采用血液IGRAs 相比，用胸腔积液IGRAs诊断这些患者病情的准确率、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。进行Kappa 一致性分析的结果显示，血液IGRAs 诊断TBP 与金标准的一致性一般，Kappa值为0.423 ；胸腔积液IGRAs 诊断TBP 与金标准的一致性较好，Kappa 值为0.803。胸腔积液IGRAs 诊断TBP 的效果显著优于血液IGRAs。分析其原因在于，在TBP 患者感染MTB 后，趋化作用会使细胞因子更容易聚集在其胸腔内部，这导致其胸腔积液中抗原特异性细胞的数量比血液中多，故用胸腔积液IGRAs 诊断TBP 的效果更好[12-15]。

综上所述，与采用血液IGRAs 相比，用胸腔积液IGRAs 诊断TBP 的效果较好。此法值得在临床上推广应用。