高迁移率族蛋白B1 PCT TGF-β1在新生儿肺炎中的表达水平及意义

王 芳， 彭湘莲， 王玲华， 杨玉香， 郭映林， 刘银燕

(湖南省妇幼保健院新生儿一科， 湖南 长沙 410008)

肺炎作为新生儿中常见疾病，可发生与宫内、分娩过程中以及分娩成功后，在临床上成为产前、产时、产后感染性肺炎，可由多种病原体感染导致，包括病毒、细菌、真菌以及支原体等，是新生儿致死的重要因素之一[1]。临床研究发现[2]，新生儿肺炎发生后临床症状并不明显，且目前对于新生儿肺炎的致病机制尚不完全明确，缺乏特异性诊断指标。且目前临床上多采用广谱抗生素对新生儿肺炎患儿进行治疗，较易出现抗菌药物使用不规范等现象，因而引发菌株耐药，因此导致患儿预后恢复不良[3]。因此早期诊断尤为重要，寻找有效诊断新生儿肺炎的敏感指标对肺炎患者预后具有重要的意义。

1 材料与方法

1.1材料:研究对象：选取2020年1月至2021年1月我院收治的新生儿肺炎患儿80例作为新生儿肺炎组，男45例，女35例，平均日龄(9.53±1.52)d，平均体重(4.56±0.68)kg，根据细菌学培养、血清学检测分为非细菌性感染组46例、细菌性感染组34例；重症组21例患儿：腋温≥38.5℃，除哭闹、发热等因素外，呼吸频率≥70次/分[4]；中症组25例患儿：腋温≥38℃，除哭闹、发热等因素外，呼吸频率≥60次/分；轻症组34例患儿：腋温≥37.5℃，除哭闹、发热等因素外，呼吸频率≥50次/分[5]；三组患儿均存在不同程度的拒食、呼吸呻吟、间歇性呼吸暂停、发绀、鼻扇、胸壁吸气性凹陷等症状。根据患儿疾病恢复情况分为恢复期组30例、急性期组50例。另外同期选取我院新生儿科足月新生儿80例作为健康对照组，男42例，女38例，平均日龄(9.56±1.60)d，平均体重(5.12±0.72)kg。所有患儿一般资料比较，无统计学差异(P>0.05)，具有可比性。纳入标准：新生儿肺炎患儿符合《实用新生儿学》[4]中新生儿肺炎诊断标准。健康对照组新生儿无肺部疾病，身体健康。排除标准：合并其他肺部疾病者；合并呼吸道疾病者；合并先天肺功能障碍者；合并消化系统、泌尿系统疾病者；糖皮质激素类药物滥用史者；心、肝、肾功能不全者。

1.2方 法

1.2.1HMGB1、TGF-β1表达水平检测:采集所有患儿空腹外周静脉血5mL，常温静置，高速离心(转速：3000r/min，半径：12cm)10min，分离上清，采用双抗体夹心ELISA法测定HMGB1、TGF-β1水平，设置酶标板为空白孔、标准孔、待测样品孔，每孔内均加入50μL稀释液，空白孔、标准孔、待测样品孔内依次加入样品稀释液、标准品、待测样片各50μL，轻晃均匀，酶标板覆膜，室温孵育2h。弃孔内液体，甩干，清洗反应板。加入HMGB1、TGF-β1检测液100μL/孔，覆膜，常温孵育60min，弃液体，甩干、洗涤反应板，加入100μL/孔底物溶液，遮光显色0.5h，加入终止液，轻弹酶标板终止反应。根据酶标仪(型号iMark，Bio-RAD公司)450nm处标准品和样品于吸光值，计算样品含量，严格按照仪器说明进行操作。

1.2.2PCT测定:采用飞测免疫荧光检测仪(广州万孚生物技术股份有限公司)及配套试剂盒测定PCT水平，严格按照仪器说明进行操作。

2 结 果

2.1健康对照组、新生儿肺炎组血清HMGB1、PCT、TGF-β1的表达水平比较:新生儿肺炎组血清HMGB1、PCT、TGF-β1表达水平均高于健康对照组，具有统计学差异(P<0.05)，见表1。

表1 健康对照组新生儿肺炎组血清HMGB1 PCT TGF-β1的表达水平比较

2.2非细菌性感染组、细菌性感染组患儿血清HMGB1、PCT、TGF-β1表达水平比较:细菌性感染组患儿血清HMGB1、PCT、TGF-β1表达水平均高于非细菌性感染组，具有统计学差异(P<0.05)，见表2。

表2 非细菌性感染组细菌性感染组患儿血清HMGB1 PCT TGF-β1表达水平比较

2.3轻症组、重症组患儿血清HMGB1、PCT、TGF-β1表达水平比较:重症组患儿血清HMGB1、PCT、TGF-β1表达水平均高于轻症组，具有统计学差异(P<0.05)，见表3。

表3 轻症组重症组患儿血清HMGB1 PCT TGF-β1表达水平比较

2.4急性期组、恢复期组患儿血清HMGB1、PCT、TGF-β1表达水平比较:急性期组患儿血清HMGB1、PCT、TGF-β1表达水平均高于恢复期组，具有统计学差异(P<0.05)，见表4。

表4 急性期组恢复期组患儿血清HMGB1 PCT TGF-β1表达水平比较

2.5HMGB1、PCT、TGF-β1之间相关性分析:HMGB1、PCT、TGF-β1之间Pearson相关性分析，结果显示，HMGB1与PCT正相关(r=0.261，P=0.019)；HMGB1与TGF-β1正相关(r=0.245，P=0.027)；PCT与TGF-β1正相关(r=0.479，P=0.001)，见图1。

图1 HMGB1、PCT、TGF-β1之间相关性分析

3 讨 论

新生儿肺炎在新生儿呼吸道系统疾病中较为常见，以吐沫、呼吸困难、咳嗽、发热等为临床表现。临床中新生儿肺炎被分为感染性肺炎、吸入性肺炎，此病的发生与患儿呼吸道功能发育不完善、机体免疫功能障碍相关，若不对新生儿肺炎患儿进行及时有效的治疗，严重者可导致新生儿死亡，因此早期诊断对新生儿肺炎患儿预后恢复具有重要的意义[5]。

HMGB1作为晚期炎性介质之一，当细胞发生坏死后被释放入血呈异常高表达，在炎症反应进展、机体组织损伤中具有重要的意义[6]。临床有研究发现[7]，HMGB1可有活化的巨噬细胞、单核细胞所分泌并释放，在细胞外炎性疾病过程中发挥促炎症反应作用，为肺炎晚期的炎性反应介质，与致死性炎性反应相关。李佳等[8]在其研究中发现，重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中HMGB1呈异常高表达。本文研究结果显示，新生儿肺炎患儿血清HMGB1水平高于健康新生儿，在细菌性感染、重症、急性期患儿血清中表达水平升高，此结果说明，HMGB1在新生儿肺炎中高表达，且与新生儿肺炎患儿是否为细菌性感染、疾病严重程度、疾病转归情况相关。

PCT作为无激素活性降钙素前肽物质，其稳定性较好，在机体处于正常生理状态下，甲状腺素细胞会产生PCT，可在细胞中经特异性蛋白水解过程中生成降钙素[9]。临床研究发现[10]，在机体处于感染性病理状态下，PCT会由肝脏巨噬细胞、单核细胞、内分泌细胞、肺、肠道组织的淋巴细胞等除甲状腺器官、组织所分泌，表现为异常高表达。在细菌感染时血浆PCT含量显著上升，在局部炎症反应、病毒感染等疾病发生时，保持于低水平状态，PCT含量变化稳定且迅速，可用于细菌感染、病毒感染类疾病[11]。本文研究结果显示，与健康新生儿相比，新生儿肺炎患儿血清PCT水平显著升高，在细菌性感染、重症、急性期患儿血清中表达水平升高，此结果说明，PCT在新生儿肺炎中高表达，且与新生儿肺炎患儿是否为细菌性感染、疾病严重程度、疾病转归情况相关。

TGF-β1功能较多，属于一种细胞因子，具有较强的免疫调节功能和复杂的生物学功能，目前有研究显示[12]，局部TGF-β1可激活炎症反应，具有激活和招募白细胞，促进炎症反应的发生发展，而初始T细胞可分化全身系统TGF-β1为Th1/Th2，抑制其作用过程，维持机体免疫功能。另外有研究发现[13]，TGF-β1作为促纤维化细胞因子，可经自身或者自身外所分泌的方式对成纤维细胞进行刺激，促进纤维细胞生成细胞基质蛋白，作用于胶原翻译、转录过程，最终促进肺纤维化。彭敏等[14]在其研究中发现，肺炎支原体肺炎患儿血清TGF-β1表现为异常高表达，另外Muhammet Furkan Korkmaz等[15]同样证实，肺炎的发生与TGF-β1高表达相关。本文研究结果显示，TGF-β1在新生儿肺炎患儿外周血中呈异常高表达，在细菌性感染、重症、急性期患儿血清中表达水平升高，此结果说明，TGF-β1在新生儿肺炎中高表达，且与新生儿肺炎患儿是否为细菌性感染、疾病严重程度、疾病转归情况相关。

另外在本文研究中分析HMGB1、PCT、TGF-β1三者之间相关性，结果发现，三者之间呈现为正相关，此结果说明三者可能共同参与新生儿肺炎的发生发展。

综上所述，HMGB1、PCT、TGF-β1在新生儿肺炎中高表达，与患儿细菌性感染、严重程度、疾病转归相关，且三者呈现为正相关，共同参与此病的发生发展。