紫杉醇联合顺铂对晚期食管癌患者癌细胞增殖及侵袭活性的影响

贺军领

洛阳市第六人民医院肿瘤科，河南 洛阳 471003

食管癌（EC）为临床发病率较高的一种消化道肿瘤，严重影响患者生命健康。由于EC早期诊断率较低，故大部分患者病情在确诊时已发展至晚期阶段，已错过手术治疗的最佳时机，具有较高的病死率［1］。化疗为晚期食管癌（AEC）的主要治疗手段之一，其主要目的在于延长患者生存期，5氟尿嘧啶联合顺铂为AEC患者常用化疗方案，可有效控制局部肿瘤进展，但毒副反应相对较多。紫杉醇是一种新型抗微管药物，在乳腺癌、肺癌等多种恶性肿瘤中应用广泛，具有良好抗肿瘤效果，同时毒副反应相对较少，有助于改善患者生存质量［2-3］。本研究旨在分析紫杉醇联合顺铂治疗AEC患者对癌细胞增殖及侵袭活性的影响，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

按照依据住院病历号将洛阳市第六人民医院肿瘤科2018年7月—2020年5月接收的80例AEC患者分为对照组与观察组，每组各40例。对照组男性23例，女性17例；年龄42～70岁，平均年龄（58.62±3.25）岁；病程11个月～35个月，平均病程（21.23±3.02）个月；肿瘤直径1～8 cm，平均肿瘤直径（4.06±1.16）cm；体重指数18～25 kg/m2，平均体重指数（21.63±1.27）kg/m2；癌胚抗原（CEA）水平4～51 mg/mL，平均CEA水平（26.73±5.82）ng/mL；病理类型：鳞癌17例，腺癌21例，其他2例。观察组男性24例，女性16例；年龄43～71岁，平均年龄（58.69±3.32）岁；病程12个月～35个月，平均病程（21.36±3.08）个月；肿瘤直径1～9 cm，平均肿瘤直径（4.13±1.22）cm；体重指数18～26 kg/m2，平均体重指数（21.58±1.32）kg/m2；CEA水平3～53 mg/mL，平均CEA水平（27.18±5.96）ng/mL；病理类型：鳞癌16例，腺癌22例，其他2例。两组患者一般资料具有可比性（P＞0.05）。本研究经样本医院医学伦理委员会批准。

1.2 入选标准

（1）纳入标准：①经病理检查确诊为AEC。②首次接受治疗。③预计生存时间＞6个月。④配合度理想。⑤自愿签署知情同意书。（2）排除标准：①对本研究药物过敏。②伴有其他系统恶性肿瘤。③严重肝肾功能不全。④合并高血压、糖尿病。⑤合并全身急慢性感染疾病。⑥精神异常、认知功能障碍。

1.3 方法

对照组患者给予5氟尿嘧啶联合顺铂治疗，第1～3 d，将30 mg/m2顺铂（齐鲁制药有限公司，生产批号：20180211、20190105，规格为10 mg）加入100 mL生理盐水稀释后静脉滴注，滴注时间为2 h；第1～5 d，将500 mg/m25氟尿嘧啶（上海旭东海普药业有限公司，生产批号：20180215、20190412，规格为10mL：0.25 g×5支）与500 mL葡萄糖溶液混合静脉滴注治疗，滴注时间为6～8 h，21 d为1个周期，连续治疗2个周期。观察组患者给予紫杉醇联合顺铂治疗，第1 d：将140 mg/m2的紫杉醇（哈药集团生物工程有限公司，生产批号： 20180210、20190303，规格为5 mL：30 mg）加入500 mL生理盐水稀释后静脉滴注，滴注时间为3 h，第1～3 d，将30 mg/m2顺铂加入100 mL生理盐水稀释后静脉滴注，滴注时间为2 h，21 d为1个周期，连续治疗2个周期。

1.4 评价指标

治疗前与治疗2个周期后，分别使用胃镜取食管肿瘤组织标本，使用荧光定量PCR法检测两组患者增殖基因与侵袭基因表达量。增殖基因包括MACC1、Nucleostemin、DEC1、PTPN14、TRAF4；侵袭基因包括EphA2、Snail、PTEN、RACK1、PFN2。

1.5 统计学方法

采用SPSS 24.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前、治疗2个周期后增殖基因表达量情况

治疗2个周期后，两组MACC1、Nucleostemin、TRAF4较治疗前低，DEC1、PTPN14较治疗前高，且观察组MACC1、 Nucleostemin、 TRAF4低 于 对 照 组， DEC1、PTPN14高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者治疗2个周期后增殖基因表达量情况（±s）

表1 两组患者治疗2个周期后增殖基因表达量情况（±s）

a表示与同组治疗前相比，P＜0.05。

组别治疗前观察组（n=40）对照组（n=40）MACC1 Nucleostemin 1-Dec PTPN14 TRAF4 t值P值123.69±14.26 123.45±14.31 0.075 0.94 119.68±10.35 120.01±10.44 0.142 0.888 81.46±9.54 81.96±9.06 0.24 0.811 79.56±7.68 80.12±7.34 0.333 0.74 102.35±9.82 101.47±10.28 0.392 0.697治疗2个周期后观察组（n=40）对照组（n=40）t值P值70.23±6.24a 92.66±8.94a 13.012＜0.001 68.12±5.13a 90.45±9.86a 12.706＜0.001 124.36±11.24a 102.24±10.45a 9.116＜0.001 127.85±14.21a 93.21±9.43a 12.846＜0.001 73.86±8.54a 82.14±8.49a 4.349＜0.001

2.2 两组患者治疗前、治疗2个周期后侵袭基因表达量情况

治疗2个周期后，两组EphA2、Snail、PFN2较治疗前低，PTEN、RACK1较治疗前高，且观察组EphA2、Snail、PFN2低于对照组，PTEN、RACK1高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组患者治疗2个周期后侵袭基因表达量情况（±s）

表2 两组患者治疗2个周期后侵袭基因表达量情况（±s）

b表示与同组治疗前相比，P＜0.05。

组别治疗前观察组（n=40）对照组（n=40）EphA2 Snail PTEN RACK1 PFN2 t值P值112.36±9.46 112.71±9.34 0.167 0.868 115.69±8.68 116.23±8.47 0.282 0.779 52.36±5.24 52.78±5.16 0.361 0.719 78.58±4.25 78.33±4.20 0.265 0.792 99.86±11.48 100.56±12.39 0.262 0.794治疗2个周期后观察组（n=40）对照组（n=40）t值P值51.03±6.75b 80.26±7.49b 18.335＜0.001 53.96±5.84b 90.64±8.79b 21.982＜0.001 103.25±12.15b 75.49±8.62b 11.785＜0.001 114.56±11.74b 90.36±8.64b 10.500＜0.001 73.64±8.49b 81.24±9.02b 3.880＜0.001

3 讨论

EC的主要发病机制为食管鳞状上皮、腺上皮发生病理性增生，导致恶性病变，且具有较高的恶性程度。AEC患者很难治愈，故如何延长生存时间，提高生存率为临床研究的热点。以往临床多采用5氟尿嘧啶联合顺铂治疗该疾病，能够有效阻止肿瘤继续扩散或抑制肿瘤发生转移，该方案在治疗后会引起严重的毒副反应，影响治疗效果［4］。近年来，紫杉醇联合顺铂已逐渐成为AEC患者首选化疗方案。紫杉醇具有显著的抗肿瘤作用，主要作用机制为通过与微管蛋白结合，促进其聚合，形成不具有活性，且结构稳定的微管聚合物，并且能够阻止微管网重组，干扰癌细胞的有丝分裂M期，使癌细胞快速凋亡［5-6］。顺铂为常见的一种化疗药物，其化学结构能够有效破坏癌细胞增殖过程，进而起到抑制肿瘤作用，促进癌细胞衰亡［7-8］。紫杉醇与顺铂联合使用，可有效增强化疗疗效。

癌细胞的增殖与侵袭活性均能够反映肿瘤的恶性程度。MACC1、Nucleostemin、DEC1、PTPN14、TRAF4均为增殖基因，且MACC1、Nucleostemin、TRAF4属于促增殖基因，其中MACC1是原癌基因，其在结肠癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤组织中呈异常升高表达，可对PI3K/AKT信号通路产生激活作用，刺激肿瘤细胞增长；Nucleostemin在正常分化成熟的组织中不表达，主要存在于多种恶性肿瘤组织及干细胞中，其表达量与肿瘤细胞增殖活性呈正相关；TRAF4是重要胞质衔接蛋白，在肿瘤坏死因子受体家族的信号传导中发挥重要作用，此外TRAF4可直接或间接与TRAF胞质相结合，调节多种信号通路，参与肿瘤细胞的存活、分化、增殖及凋亡。有研究指出，抑制TRAF4表达可控制肿瘤细胞增殖转移。DEC1、PTPN14属于抗增殖基因，前者为生长发育基因，高表达DEC1对抑制癌细胞增殖具有积极作用，后者表达量与癌细胞增殖成反比。本研究结果显示紫杉醇联合顺铂可改善AEC患者增殖基因表达，抑制肿瘤进展。究其原因在于，紫杉醇可破坏微管蛋白及微管蛋白二聚体动态平衡，诱导微管蛋白聚合，稳定微管并抑制癌细胞又是分裂，触发细胞凋亡；此外，紫杉醇与顺铂均可对酪氨酸激酶活性产生抑制作用，使细胞周期停滞于DNA合成前期，阻断细胞分裂，抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡。

除肿瘤细胞增殖外，肿瘤细胞侵袭与转移也是增加EC恶性程度的重要因素之一，不利于患者预后。抗侵袭基因与促侵袭基因表达失衡是改变肿瘤细胞侵袭活性的直接原因，可有效反应AEC患者临床治疗效果。EphA2、Snail、PTEN、RACK1均属于侵袭基因，且EphA2、Snail属于促侵袭基因，前者高表达量可促进癌细胞脱落，增强癌细胞侵袭性，后者在上皮－间质转型中具有重要作用，能够加强癌细胞侵袭活性，PTEN、RACK1属于抗侵袭基因，前者是一种典型的抑癌基因，后者属于胞质内锚定蛋白，均可有效降低癌细胞侵袭活性［9-10］。本研究结果显示，紫杉醇联合顺铂可以有效抑制AEC患者癌细胞侵袭的活性。分析其原因，紫杉醇与顺铂还可干扰转化生长因子、血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶表达，抑制肿瘤新生血管生成，阻碍肿瘤细胞向周围组织侵袭及转移。

综上所述，AEC患者采用紫杉醇联合顺铂治疗具有显著的临床效果，对降低癌细胞增殖与侵袭活性均具有重要作用，在临床中值得广泛推广应用。