广东台山地区淋球菌耐药结果调查

黄碧红

（台山市人民医院，广东台山 529200）

淋病是最常见的性传播疾病，也是我国的乙类传染病，主要症状表现为泌尿生殖系统脓性感染，若得不到及时有效的治疗会引发诸如盆腔炎、前列腺炎等并发症[1]。淋病病原体即淋球菌，由于长期以来的抗生素滥用及错用，淋球菌的耐药率逐渐提高，其耐药性可由染色体介导或质粒介导或二者共同介导[2]。当淋球菌耐药菌株产生后会在该地区迅速扩散传播，对该地区淋病防治构成巨大威胁。为了解广东台山地区淋球菌耐药性，了解现行淋病治疗方案的有效性，控制耐药菌株的传播，本研究选取了我院皮肤病性病诊疗中心确诊为淋病的70例患者尿道或宫颈分泌物样本作为研究对象，分析其淋球菌耐药特性。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取2017年1月至2018年12月我院皮肤病性病诊疗中心确诊为淋病的70例患者尿道或宫颈分泌物样本作为研究对象，纳入标准：①经临床诊断和实验室检查均符合《2015年美国疾病控制中心性传播疾病诊断和治疗指南》[3]中淋病相关诊断标准；②未合并其他传染病病原体。70例患者中男性44例，女性26例，年龄分布23～64岁，平均（45.89±3.23）岁。男性尿道样本提取：采用无菌拭子探入尿道2～3cm处，轻柔转动粘取尿道分泌物后取出；女性宫颈样本提取：子宫颈经阴道窥器充分暴露后，先用无菌拭子清理宫颈口分泌物后，另取一根探入宫颈1～2cm处充分浸润后取出。样本菌经革兰染色镜检、糖发酵实验、氧化酶实验等确认为淋球菌后悬浮保存至-70℃冰箱内待用。

1.2 抗生素及培养基：青霉素、环丙沙星、四环素、阿奇霉素、头孢克肟、头孢哌酮、头孢曲松。培养基选用淋球菌基础培养基并加入10%脱纤维新鲜羊血。

1.3 检测方法：最小抑菌浓度（MIC）测定：采用琼脂稀释法，将7种抗生素纯品采用无菌蒸馏水稀释，加入至培养基中，配成含梯状浓度抗生素的琼脂平皿，将分纯后的淋球菌悬液（浓度约为107cfu/mL）用多头移液枪将菌悬液接种于各培养皿，置于37℃，5%CO2培养箱中培养36h，记录无菌落生长的MIC。以WHO标准淋球菌菌株D、G、J、L、P作为质控。药物敏感性：参照WHO西太区淋球菌耐药监测推荐标准，青霉素、环丙沙星敏感：≤0.03mg/L，中敏：0.06～0.50mg/L，耐药：≥1mg/L；四环素敏感：≤0.5mg/L，耐药：≥1mg/L；大观霉素敏感：≤64mg/L，中敏：64～128mg/L，耐药：≥128mg/L；头孢克肟敏感：≤0.125mg/L，中敏：0.25～0.50mg/L，耐药：≥1mg/L；头孢曲松敏感：≤0.06mg/L，0.125～0.500mg/L，耐药：≥1mg/L；头孢西丁敏感：≤1mg/L，中敏：1～16mg/L，耐药：≥16mg/L；β-内酰胺酶测定：采用纸片碘法测定，β-内酰胺酶阳性：混合试剂由蓝色变为无色，阴性：混合试剂无颜色变化。β-内酰胺酶阳性则判定为该菌株为产青霉素酶淋球菌（PPNG）。高度耐四环素株（TRNG）：采用琼脂稀释法，若四环素MIC≥16mg/L则为TRNG株。

2 结果

2.1 70株淋球菌对7种抗生素的MIC分布：70株淋球菌中有33（47.14%）株青霉素耐药，58（82.86%）株环丙沙星耐药，37（52.86%）株四环素耐药，1（1.43%）株头孢克肟耐药，详见表1，表2。

表1 70株淋球菌对7种抗生素的MIC分布（n）

表2 70株淋球菌对7种抗生素的敏感性结果 [n（%）]

2.2 PPNG及TRNG检测结果：从70株菌株中共检测出21株PPNG，占比为30.00%，共检测出26株TRNG，占比为37.14%。

3 讨论

作为一种古老而广泛传播的疾病，淋病的致病菌-淋球菌仅在人类机体内发现，该病菌通常造成黏膜感染，引发男性尿道炎、妇女宫颈炎；同行或双性恋者则能够引发咽部、肛门直肠感染；若感染者为孕产妇，则新生儿经引导分娩时还可造成淋菌性眼炎[4]。由于最初感染时的状态缺乏特异性，往往造成贻误治疗，甚至进一步扩大传播范围。根据2000至2014年我国淋病流行调查报告已知，淋病报告病例数为7.25/10万，男性高于女性[2]。

自20世纪30年代磺胺类抗生素首次用于淋病治疗以来，淋球菌耐药性一直是人们关注的焦点。由于抗生素的滥用和误用，致病菌在大范围选择性压力下能够保留其中耐药性最强的菌株，并加以在菌群间传播，进而使得耐药菌株在全国范围内散播[5]。本研究选取了7种抗生素对广东台山地区70株淋球菌耐药进行调查，PPNG的检出率为30.00%，TRNG检出率为37.14%。目前，已有研究显示，青霉素及四环素不再是淋病治疗的首选药物，曹文苓等[6]对广州地区2013年淋球菌耐药监测结果进行分析显示，青霉素和四环素的耐药率为48.40%和48.80%，PPNG和TRNG的检出率分别为34.5%和38.6%，本研究与其结果较为接近，说明淋球菌对青霉素和四环素的耐药率均处于高水平。根据美国疾病控制和预防中心（CDC）对抗菌药物的使用建议，若某一抗菌药的耐药率超过5%，则该项药物不再适用于治疗一线药物[7]。环丙沙星在20世纪90年代曾被用作淋病治疗的首选药物，由于其价格低廉，品种多样，其使用量大大超过其他药物，从而导致了高度耐药[8]。本研究中环丙沙星的耐药率达到82.86%。大观霉素对淋球菌敏感度基本稳定，本研究显示广东台山地区淋球菌的大观霉素、头孢西丁敏感度达到100.00%，尤其大观霉素对PPNG、TRNG和淋球菌都具有较好的敏感性[9]，因此可以考虑选择头孢克肟作为该地区今后淋病治疗的首选药物。另外，本研究250株淋球菌中只有1株对头孢克肟耐药菌株，且敏感度较高达到81.43%，而同为头孢药物的头孢曲松，其敏感度高达71.43%，也可作为临床治疗的一线药物。

综上所述，由于21世纪以来各地淋球菌对抗生素耐药性呈现不断提高态势，因此还需不断加强对本地区淋球菌耐药性的持续监控，规范抗菌药物的使用，合理制定治疗方案，避免耐药菌株的不断产生及传播。