免疫组化指标及肿瘤标志物与胃癌临床病理特征的相关性

赵世杰， 张庆富

（安阳市肿瘤医院，河南 安阳 455000）

胃癌是临床上常见的消化系统疾病，具有发病率高、致死率高的特点，严重影响患者的生命健康。胃癌由于早期症状不明显，易被忽视，患者确诊时多数为中晚期。目前，胃癌的临床诊断仍缺乏有效的肿瘤标志物，凃威伟等[3]研究指出肿瘤标志物单独检测胃癌具有一定的局限性。聂卫兵等[4]应用免疫组化指标检测胃癌，结果显示Her-2与胃癌发生及发展存在一定的联系。目前，有关免疫组化指标及肿瘤标志物与胃癌临床病理特征的相关性有待进一步探讨，本研究选取我院收治的胃癌患者60例，探讨免疫组化指标及肿瘤标志物与胃癌临床病理特征的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年6月—2020年6月在我院确诊的胃癌患者60例作为研究组，选取同期我院体检健康者60例作为对照组。对照组男32例，女28例；年龄30～75岁，平均年龄（65.2±7.8）岁。研究组男34例，女26例；年龄31～76岁，平均年龄为（65.4±7.6）岁。研究组组织分化：中高分化20例，低分化40例；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期32例，Ⅲ～Ⅳ期28例。本研究经医院伦理委员会批准。

纳入标准：临床资料完整；符合《胃癌规范化诊疗指南》[5]中关于胃癌的诊断标准；具有自主行为能力，可正常沟通交流者；所有患者均签署知情同意书。排除标准：抑郁、精神分裂症等其他精神疾病者；伴严重心、肺、肝、肾等器官功能不全者；合并有内分泌系统疾病、血液系统疾病等可能影响肿瘤标志物检测者。

1.2 方法

1.2.1 免疫组化指标检测 采集研究组所有患者的标本，采用10%中性甲醛溶液固定，乙醇梯度脱水，石蜡包埋，连续切片，厚度为4 μm，二甲苯拖蜡，柠檬酸盐缓冲液抗原修复处理，磷酸缓冲液（PBS）漂洗，内源性过氧化物酶灭活，山羊血清封闭。用免疫组化法对胃癌组织中Her-2表达进行检测，试剂盒购自北京中杉生物技术有限公司。通过Max Vision两步法染色[6]，加入DAB溶液（北京中杉生物技术有限公司）显色，持续5 min。用苏木精复染、透明、脱水、采用中性树胶封片剂进行封固，观察Her-2表达。依据细胞膜是否存在棕黄色颗粒样沉淀判断[7]，细胞膜无染色或细胞膜着色＜10%，记为0；以细胞膜着色≥10%，存在轻微膜着色，记为+；以细胞膜着色≥10%，且细胞膜着色较弱，记为++；以细胞膜着色≥10%，且细胞中存在中到强度膜着色，记为+++。以（0）、（+）记为细胞低表达，表示Her-2阴性；以（++）、（+++）记为细胞过度表达，表示Her-2阳性。

1.2.2 肿瘤标志物检测 采集空腹静脉血3 mL，以转速3500 r/min进行离心处理，持续时间为5 min，分离血清，将其放置在-20℃条件下保存，以便准备检测标本，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定胃癌患者体内的肿瘤标志物，如CA125、CA72-4、CEA、CA19-9，检测所需的试剂盒（北京中杉生物技术有限公司），以 CEA＞5 ng/mL、CA72-4＞6.9 U/mL、CA125和CA19-9均大于35 U/mL表示肿瘤标志物的检测结果为阳性。

1.3 观测指标 （1）观察两组血清肿瘤标志物表达水平。（2）观察肿瘤标志物表达水平与胃癌临床病理特征的关系。（3）观察研究组患者中Her-2的阳性表达情况，比较Her-2阳性表达与Her-2阴性表达的临床病理特征。

1.4 统计学处理 应用SPSS 20.0进行数据分析，计量资料采用表示，采用t检验；计数资料用n（%）表示，采用χ2检验；绘制受试者工作特征曲线（ROC），分析血清CEA、CA72-4、CA125、CA19-9水平及Her-2阳性表达对胃癌的诊断价值；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Her-2阳性表达与Her-2阴性表达的临床病理特征比较 60例胃癌患者中，Her-2阳性表达8例，阳性表达率为13.33%。Her-2阳性表达患者的淋巴结转移、肿瘤中高分化比Her-2阴性表达多（P＜0.05）。见表1。

表1 Her-2阳性表达与Her-2阴性表达的临床病理特征比较 [ n（%）]

2.2 两组血清肿瘤标志物对比分析 研究组CEA、CA72-4、CA125、CA19-9水平均高于对照组（P＜0.05）。见表2。

表2 两组血清肿瘤标志物对比分析（,g/mL）

表2 两组血清肿瘤标志物对比分析（,g/mL）

组别 n CEA CA125 CA72-4 CA19-9对照组 60 1.8±0.7 1.9±0.8 1.7±0.5 8.3±1.0研究组 60 9.9±1.3 12.9±3.2 13.3±3.5 39.8±5.4

2.3 研究组血清肿瘤标志物与临床病理特征的相关性 研究组中，不同临床分期、不同淋巴结转移、不同肿瘤分化程度的患者CEA、CA125、CA72-4、CA19-9表达阳性率差异有统计学意义（P＜0.05），而与性别、年龄无关（P＞0.05）。见表3。

表3 研究组患者血清肿瘤标志物与临床病理特征关系比较（n）

2.4 血清CEA、CA72-4、CA125、CA19-9水平及Her-2阳性表达对胃癌的诊断价值 血清CEA、CA72-4、CA125、CA19-9水平及 Her-2阳性表达对胃癌诊断的AUC值分别为0.806、0.762、0.767、0.777、0.930（P＜0.05）， 且 Her-2阳性表达诊断胃癌的灵敏度、特异度最高，分别为86.67%、83.33%。见表4。

表4 血清CEA、CA72-4、CA125、CA19-9水平及Her-2阳性表达对胃癌的诊断价值

3 讨论

根据调查显示，胃癌的发病率呈逐年上升的趋势。临床上，普遍采用MRI、CT等影像学手段诊断胃癌，虽然可以提高胃癌分期诊断的准确率，但在胃癌早期筛查、诊断仍存在一定的局限性。陈菊华等[8]研究发现，肿瘤发展过程中肿瘤标志物发挥着重要作用，且可用于鉴别、诊断胃癌，常见的有CA125、CA19-9、CEA、CA72-4等。

贺志军等[9]研究发现，由于CEA中含有较多的糖类蛋白质，在早期诊断胃癌中单纯的CEA检测具有一定的局限性，检测的灵敏度较低，仅为22%。在本次研究中发现有淋巴结转移患者、处于临床Ⅲ～Ⅳ，肿瘤程度低分化患者CEA表达的阳性率较高，表明CEA表达与胃癌患者淋巴结转移、肿瘤分化程度及临床分期具有一定的相关性，这也表明了CEA表达可使细胞排列不规则，引起细胞位置发生变化，而一旦癌细胞发生脱落，可能造成浸润转移。研究表明[10]，CA19-9可以作为胰腺癌的诊断指标，但对消化系统恶性疾病的诊断效果并不十分理想，同时，通过对胃癌患者肿瘤标志物进行分析，发现胃癌患者CEA和CA19-9水平升高。刘兵等[11]采用免疫组化方法，检测胃癌患者中Her-2的表达，发现在配体缺失的情况下，Her-2蛋白可以激活下游通路，进而影响肿瘤细胞血管的形成。研究结果发现不同淋巴转移个数、不同肿瘤位置、不同组织分化程度的胃癌患者CEA、CA72-4、CA125、CA19-9表达阳性率差异明显，Her-2阳性表达淋巴结转移、肿瘤分化程度为中高分化例数比Her-2阴性表达高，血清CEA、CA72-4、CA125、CA19-9水平及Her-2阳性表达对胃癌诊断的AUC值分别为0.806、0.762、0.767、0.777、0.930，提示胃癌患者CEA、CA72-4、CA125、CA19-9水平、Her-2阳性表达可在早期胃癌辅助诊断中发挥重要作用。

综上所述，血清肿瘤标志物CEA、CA72-4、CA125、CA19-9表达水平与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、临床分期相关，而Her-2表达水平与淋巴结转移、肿瘤分化程度相关，血清CEA、CA72-4、CA125、CA19-9水平及Her-2阳性表达在胃癌诊断中具有一定价值。