周鹏飞,杨永兴,汪海,王惠明
(陇南市经济林研究院核桃研究所,甘肃 武都 746000)
近年来,随着人们生活水平的提高,心血管疾病已经严重威胁到人类健康[1]。目前国内外治疗方案首选为生活方式的干预,即通过控制饮食与运动进行改善,随后再进行药物治疗,但是在药物治疗过程中可能会产生药物相互作用,甚至毒副作用,影响其最终治疗效果[2-3]。因此,饮食对心血管疾病的预防及治疗极其重要。如杨敏等[4]人发现长链多不饱和脂肪酸可调节人体脂质代谢、防止血栓形成,预防心脑血管疾病。
核桃油是核桃仁第一主要成分[5],不饱和脂肪酸在90以上,由亚油酸,油酸,亚麻酸和棕榈酸等成分组成,且亚油酸与α-亚麻酸比值接近于4∶1;此外核桃油还富含维生素E、磷脂、角鲨烯、黄酮类等化合物,使其在抗炎、抗癌、健脑等方面功效显著[6-7],但是品种不同,其脂肪酸组成及含量存在一定程度差异[8]。因此研究对‘清香’核桃油脂肪酸组成进行分析,并对其心血管结构改善作用进行性研究,研究结果为核桃油保健作用及产品开发奠定基础。
‘清香’核桃油来源于陇南市武都区城关镇吉石坝黄家坝核桃园冷榨所得;昆明小鼠购买于河北医科大学动物中心。基础饲料为23.07 %蛋白质+11.85 %脂肪+65.08 %碳水化合物;高脂饲料为基础饲料+15 %猪油+20 %蔗糖+1.2 %胆固醇+0.2%胆酸钠。
高脂饲料,购自北京华阜康生物科技股份有限公司;总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)检测试剂盒购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司;AL/AS1310与TRACE1300 ISQ自动进样-气相色谱-质谱联用仪(美国Thermo scientific)。
1.3.1 脂肪酸组成分析。参考GB 5009.168-2016《食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》[9]。
1.3.2 高血脂改善作用研究。分组及饲养 选取60只昆明小鼠(雌雄各30只)适应性饲养一周,然后从中选取体重约30 g的雌雄小鼠30只(雌雄各15只),分为阴性对照组、阳性对照组和实验组,且每组10只(雌雄各5只):阳性对照组、实验组使用高脂饲料喂养,阴性对照组使用基础饲料喂养(三组除了喂养饲料不同外,其余饲养条件相同),喂养时间为30 d。随后,阳性对照组、阴性对照组、实验组均使用基础饲料喂养,且实验组每只小鼠每天灌胃0.3 mL核桃油,灌胃20 d,进行取样。
采样 小鼠采用后颈椎脱臼法处死,然后收集血液样品以及肝位血管组织。
血清处理及血脂指标检测 各组血样在室温条件下放置于40 min,然后3000 r/min离心15 min,收集上层血清,按照试剂盒说明书TC、TG、LDL-C、HDL-C的方法进行检测。
HE染色 使用4%多聚甲醛固定液对肝部血管组织组织进行固定,然后固经HE染色分析其病理。
实验数据均以(X±S)形式表示,利用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析,组间差异使用LSD法比较,其中P<0.05差异显著。
如表1所示,‘清香’核桃油脂肪酸主要成分由亚油酸、油酸、棕榈酸、亚麻酸组成,且亚油酸含量最高,油酸次之,说明清香’核桃油货架期较长[10],且对血液中的胆固醇具有较好降解功效[11]。
表1 ‘清香’核桃油脂肪酸组成及相对含量
2.2.1 血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C分析。如表2所示,与阴性对照组相比较,阳性对照组TC、TG、HDL-C、LDL-C含量增加显著(P<0.05),说明本实验所建立的高血脂模型符合要求;与阳性对照组相比较,实验组TC、TG、HDL-C、LDL-C含量降低显著著(P<0.05),且与阴性对照组相比较,实验组TC、TG、HDL-C、LDL-C含量不显著著(P>0.05),说明‘清香’核桃油能够血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,此研究结果与李小迪等人研究结果一致。
表2 不同组血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C含量
2.2.2 血管结构改善作用。由图1、表3可知,‘清香’核桃油对血管壁厚度及血管腔面积具有改善作用.这是由于亚油酸能够减少高脂饮食大鼠体重和体脂含量[12],降低血脂及脂肪组织中脂蛋白、脂肪酶等活性,增强肝脂酶活性,进一步改善小鼠血管粥样硬化的血清中脂肪酸的含量和组成[13],使血管壁厚度降低、血管腔面积增加,从而达到对血管结构改善作用。
A为阳性对照组;B为阴性对照组;C为阴性对照组。
表3 血管结构变化
‘清香’核桃油脂肪酸主要成分依次为亚油酸、油酸、棕榈酸、亚麻酸组成,且对高血脂症血管具有改善作用。