子宫内膜异位症不孕患者体外受精-胚胎移植后受精、妊娠与卵泡输出率的关系研究

董虹 张洪福

（1.天津美津宜和妇儿医院生殖中心，天津 300000；2.天津市河西医院妇科，天津 300000）

子宫内膜异位症可造成盆腔内炎性因子增高，影响微环境，存在排卵障碍，与不孕症密切相关[1]。体外受精-胚胎移植（In vitro fertilization embryo transfer，IVF-ET）是不孕症辅助生殖的一种技术，通过从人体中将卵子和精子取出，在体外进行受精，培育成胚胎后选择合适的时机移植至子宫腔内，进一步成长发育。而各类患者情况具有差异，卵巢反应性均无统一性，因此准确评估卵巢反应性和IVFET结局对制定合理的超促排卵计划及获取优质胚胎获取有重要意义。近年来，有研究提出卵泡输出率（Follicle output rate，FORT）的概念，认为FORT在评估卵巢反应性方面优于其他指标[2]。基于此，本文旨在研究子宫内膜异位症不孕患者IVF-ET后受精、妊娠与FORT的关系。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年3月至2022年1月本院收治的306例接受IVF-ET治疗的子宫内膜异位症不孕患者作为研究对象，依据FORT界值是否小于等于65分为对照组（n=96）和观察组（n=210）[3]。其中对照组年龄22～40岁，平均年龄33.64±2.63岁，不孕年限3～11年，平均不孕年限7.83±1.55年；观察组年龄23～40岁，平均年龄34.09±2.69岁，不孕年限3～12年，平均不孕年限8.5±1.61年。两组患者一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准。纳入标准：首次进行IVF-ET治疗，近3月未使用其他雌激素类药物进行治疗；临床确诊为子宫内膜异位症不孕患者；临床资料完整；排除标准：心肌病、冠心病、高血压等或其它器官并发症；存在精神障碍和心理疾病；患者配偶取精异常者等。

1.2 方法

两组患者均于黄体中期开始口服避孕药毓婷（规格：0.1 mg，辉凌制药，国药准字：HJ20160237）15天，第16天停服避孕药，并开始肌肉注射外源性促性腺激素释放激素激动剂（规格：75 IU（5.5 μ g），意大利MERCK，注册证号：S20181008）0.1 mg·d-1，在月经周期第3～5天完成达标，其达标标准为血黄体生成素≤5 IU·L-1、雌二醇（Estradiol，E2）≤50 pg·mL-1；完成达标后肌肉注射基因重组卵泡刺激素（规格：250 μg:0.5 mL，意大利MERCK，注册证号：S20130091）225 IU，使用阴道B超检测子宫内膜厚度、卵泡数量、大小。若3个主导卵泡直径 ＞17 mm，则在当晚皮下注射人绒毛膜促性腺激素（Human chorionic gonadotropin，HCG）（规格：1 mL:20 mg，浙江仙琚制药，国药准字：H33020228）10000 IU，35～36 h后进行取卵操作，并在取卵后肌肉注射孕激素（规格：1 mL:5 mg，湖北葛店人福药业有限责任公司，国药准字：H20066109）10 mg·d-1。通过手淫方式获取患者配偶精液，以密度梯度离心法调整精子浓度，待取卵4～6小时后，将经处理患者配偶的精子与卵子（精子：卵子=2×104：1）混合并放置5% 二氧化碳、37℃孵箱内进行共培养。于取卵16～20 h开始在显微镜下观察精卵受精情况，统计并分析优质胚胎率。将受精卵移至P1培养液（Irvine，美国）培养54～56 h，体外受精的第3天取1～2枚8细胞胚胎移植回患者子宫。分别于患者月经第2天、HCG注射日抽取静脉血3 mL，3500 rpm离心10 min，采取上清液，应用荧光免疫法检测促卵泡激素（Follicle-stimulating Hormone，FSH）、E2水平变化。于胚胎移植13 d开始再一次HCG测定，28 d后进行超声检查，确认患者妊娠现象。

1.3 观察指标

1.3.1 IVF-ET结局

取卵完成后，需进行卵母细胞孵育，在4～6 h进行IVF受精，依据IVF-ET法观察患者的IVF-ET结局，主要包括注射日E2水平、获卵数、人促性腺激素（Gonadotropin，Gn）用量、移植胚胎数。

1.3.2 受精、妊娠情况

取卵16～20 h查看受精状态，统计优质胚胎数，即2个原核来源、碎片＜20%、最少于第三天时有7个细胞以上。优质胚胎率=优质胚胎数/正常受精卵子数×100%。于胚胎移植28 d进行阴道超声检查观察妊娠情况，见妊娠囊、胎心搏动判定为临床妊娠。受精率=受精数（正常受精+异常受精+延长受精），卵裂率=移植当天有卵裂的胚胎数/正常受精卵子数，种植率：孕囊数目/移植的胚胎数目×100%，临床妊娠率=怀孕数/移植周期数。

1.3.3 受精、妊娠与FORT的相关性

采用Pearson相关分析IVF-ET后受精、妊娠与FORT的相关性。Pearson相关系数取值范围在-1～1，负数代表负相关，正数代表正相关，0则代表不存在相关关系。相关系数越接近0，相关关系越弱；越接近-1或1，相关关系越强。

1.4 统计学方法

本研究数据均采用SPSS18.0软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差（）表示，两两间采用t检验；计数资料以例数n（%）表示，采用χ2检验；IVF-ET后受精、妊娠与FORT的相关性采用Pearson相关分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 IVF-ET结局

两组Gn用量、移植胚胎数无明显差异（P＞0.05），观察组注射E2水平、获卵数明显高于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 两组注射日E2水平、获卵数、Gn用量、移植胚胎数比较（)

表1 两组注射日E2水平、获卵数、Gn用量、移植胚胎数比较（)

注：与对照组比较，aP＜0.05。

2.2 受精、妊娠情况

两组卵裂率、种植率无明显差异（P＞0.05），观察组受精率、优质胚胎率、移植周期临床妊娠率均明显高于对照组（P＜0.05）。见表2。

表2 两组受精、妊娠情况比较

2.3 IVF-ET后受精、妊娠与FORT的相关性

据Pearson相关分析得知，FORT与Gn用量无显著相关性（r=0.267，P＞0.05），而注射E2水平、获卵数、受精率、移植周期临床妊娠率与FORT呈正相关（r=0.889、0.246、0.631、0.371，P＜0.05）。

3 讨论

近年来有研究认为即使女性年龄增长，其窦卵泡对外源性FSH反应性也未发生改变，如高龄女性卵巢成低分应，是原有卵泡个数减少所造成，而非是卵巢反应性低的原因，FORT对IVF-ET可能有一定预测价值[6]。另外还有研究指出FORT越高，其胚胎移植率和临床妊娠率也随之升高[7]。

本次研究依据FORT界值进行分组，FORT≤65为对照组，FORT＞65为观察组，发现观察组注射E2水平、获卵数、受精率、优质胚胎率、移植周期临床妊娠率高于对照组，与以往研究一致，FORT可直接评估卵巢对外源性Gn的反应性，通过对接受控制性超排卵的女性进行降调节，根据E2水平和卵泡生长情况进行检测，无需依靠原有的卵泡个数[5]。说明FORT确实可有效预测卵泡反应性或卵巢功能，FORT水平越高，其IVF-ET结局越优越，推测原因可能是FORT不受年龄、基础E2和FSH水平等外界因素干扰。另一方面，既往临床常依据血清基础卵泡刺激素（Serum basal follicle stimulating hormone，bFSH）、基础窦卵泡数（Number of basal sinus follicles，AFC）、抗苗勒管激素（Anti-Mullerian hormone，AMH）、年龄等指标来预测患者卵巢反映情况，但上述指标在预测过程中对外源性Gn反应具有局限性；如AFC测量环境受检查者水平和B超仪器分辨率影响较大，会出现严重的测量误差[4]。

本次研究据Pearson相关分析得知，FORT与Gn用量无相关性，与以往研究结果有一定出入[8]，可能是标本量选取较少，且本次分组粗略参考文献进行分组，未根据患者情况；而本次研究也发现注射E2水平、获卵数、受精率、移植周期临床妊娠率与FORT有一定关系，说明FORT较以往指标其敏感性更佳，可避免进入周期治疗前卵巢的窦卵泡数的影响。

综上，FORT值对预测卵巢反应性和IVF-ET具有重要价值，水平越高则提示子宫内膜异位症不孕患者IVF-ET结局相对越好。