超声造影定量分析与血清SIRT1、HMGB1水平对卵巢癌淋巴结转移的预后价值

郑瑞莲 金 晶 魏 云 陈媛媛 胡文江*

1.新疆军区总医院北京路医疗区(乌鲁木齐，830013)；2.中国人民解放军61150部队

卵巢癌是妇科肿瘤，患者早期发病症状不明显易被忽视，导致60%～70%患者初诊时已进展为III-IV期[1]。研究表明[2]卵巢癌晚期术后治疗5年内生存率不足30%，而卵巢癌I期患者5年内生存率可高于50%。淋巴结转移是卵巢癌的重要转移途径，与卵巢癌预后差有一定关系。因此，诊断卵巢癌淋巴结转移有重要意义。超声造影能够反映组织血流灌注情况，从而对心、肝、肾及妇科疾病进行诊断[3]。沉默信息调控子1(STRT1)是一种依赖型组蛋白去乙酰化酶，与细胞的增殖、凋亡、衰老、炎症等有关，参与多种肿瘤的发生发展[4]。高迁移率蛋白1(HMGB1)是一种非组蛋白染色体结合蛋白，与肿瘤的发生、发展、转移有关。研究表明STRT1、HMGB1可作为胃癌、非小细胞肺癌等潜在生物标志物[5-6]。本研究通过对卵巢癌患者进行超声造影分析，结合其血清SIRT1、HMGB1水平，为诊断卵巢癌淋巴结转移提供新的可能方法。

1 对象与方法

1.1 一般资料

选取2016年6月-2019年12月在本院确诊的卵巢癌患者96例(卵巢癌组)，年龄(53.2±8.8)岁(37～74岁)，世界卫生组织2014组织病理学分类为浆液性腺癌58例，粘液性腺癌27例，子宫内膜样腺癌7例，其他类型肿瘤4例；根据国际妇产科联盟(FIGO)病理分期为Ⅰ～Ⅱ期37例，Ⅲ～Ⅳ期59例；根据是否发生淋巴结转移分为淋巴结转移42例，非淋巴结转移54例。选取同期在本院健康体检的卵巢正常女性96例为对照组，年龄与卵巢癌组匹配(54.2±9.4)岁(35～75岁)。纳入标准：①卵巢癌经病理组织学确诊；②在本院行超声造影分析；③未进行化疗或使用免疫抑制药物；④签署知情同意书。排除标准：①有严重系统性疾病；②心肝肾功能不全；③合并其他恶性肿瘤。本研究经本院伦理委员会审批。

1.2 主要试剂及仪器

SIRT1、HMGB1酶联免疫吸附试剂盒(SEE912Hu、SEA399Hu)均购自于武汉云克隆科技股份有限公司，GE E9彩色超声诊断仪购自于通用电气(中国)有限公司，声诺维(Sono Vue)超声造影剂购自于意大利Bracco公司。

1.3 研究方法

1.3.1血液样品采集卵巢癌患者入院24h内、健康体检者于体检时，采集两组外周静脉血离心取上清液，-80℃保存。

1.3.2超声诊断GE E9彩色超声诊断仪，探头频率3.5MHz。首先行常规超声检查，确定卵巢癌变位置、形态、体积；行腹超声造影检查，造影剂+5ml生理盐水，振荡溶解形成造影剂混悬液，肘静脉推注2～2.4ml，同时启动计数器并存储动态图像，Qontrast超声造影软件定量分析获取到达时间、达峰时间、灌注时间、增强强度、基础强度等参数。

1.3.3血清SIRT1、HMGB1检测酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测血清SIRT1、HMGB1水平。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 超声造影定量参数比较

与对照组比较，淋巴结转移组、非淋巴结转移组造影剂到达时间、灌注时间无差异(P>0.05)，达峰时间、基础强度降低，淋巴结转移组增强强度升高(均P<0.05)；与非淋巴结转移组比较，淋巴结转移组达峰时间、基础强度降低(P<0.05)。见表1。

表1 各组超声造影定量参数比较

2.2 血清SIRT1、HMGB1水平比较

对照组、非淋巴结转移组、淋巴结转移组血清SIRT1水平逐渐降低，血清HMGB1水平逐渐升高(P<0.05)。见表2。

表2 各组血清SIRT1、HMGB1水平比较

2.3 超声造影定量参数与血清SIRT1、HMGB1诊断卵巢癌淋巴结转移价值

ROC曲线结果显示，超声造影参数达峰时间、基础强度，以及血清SIRT1、HMGB1水平诊断卵巢癌淋巴结转移均有一定价值，各指标联合诊断的曲线下面积(AUC)最大，诊断效能最佳。见表3。

表3 各指标诊断卵巢癌淋巴结转移效能

2.4 卵巢癌淋巴结转移危险因素分析

将是否发生卵巢癌淋巴结转移作为因变量，以超声造影参数、血清SIRT1、HMGB1水平作为自变量行多因素logistic回归分析。结果表明，达峰时间、基础强度、HMGB1高是卵巢癌淋巴结转移的危险因素，血清SIRT1高是卵巢癌淋巴结转移的保护因素。见表4。

表4 影响卵巢癌淋巴结转移的多因素分析

3 讨论

卵巢癌是常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一，发病率高且预后较差，晚期卵巢癌患者生存率远低于早期患者。超声造影技术能够对组织血流灌注情况进行观察，从而对疾病进行诊断。毛枫等[7]研究表明相对于常规超声，超声造影对隐匿性肝癌有较高检出率；梁丽萍等[8]研究表明超声造影定量参数中峰值强度可以作为甲状腺良恶性小结节的重要参考指标。利用超声造影等对卵巢癌筛查，还可动态监测疾病发展。本研究结果表明，与对照组比较，卵巢癌组超声造影参数达峰时间、基础强度均降低；与非淋巴结转移组比较，淋巴结转移组达峰时间、基础强度更低。ROC曲线结果显示，超声造影参数达峰时间、基础强度对诊断卵巢癌淋巴结转移有一定价值，提示可通过超声造影对卵巢癌淋巴结转移进行初步筛查，可能会避免卵巢癌因延误治疗而进一步恶化。

SIRT1能够通过乙酰化调节基因转录以及靶蛋白活性，是各种代谢和病理生理过程的关键因子。研究表明SIRT1能够参与脂肪酸氧化、胰岛素分泌和葡萄糖代谢等生理活动，与2型糖尿病、心血管疾病及代谢综合征有关[9-11]；还可参与细胞的自噬、衰老、凋亡和增殖等过程，与肿瘤的发生、发展和转移有关[12-13]。Chung等[14]研究表明SIRT1表达与三阴性乳腺癌淋巴结转移显著相关。本研究发现，卵巢癌组血清SIRT1水平降低，且卵巢癌淋巴结转移组水平低于非淋巴结转移组，提示SIRT1可能参与了卵巢癌的发病，并与淋巴结转移有一定关系；ROC曲线分析表明，血清SIRT1对卵巢癌淋巴结转移具有一定诊断价值，且是卵巢癌淋巴结转移的保护因素，提示血清SIRT1可能参与了卵巢癌的发生及淋巴结转移，是诊断卵巢癌淋巴结转移的潜在生物标志物。

HMGB1是一种非组蛋白染色质相关的核蛋白，不仅与DNA的转录、复制、重组有关，与免疫活性细胞的激活有一定关系[15]。研究表明HMGB1与肿瘤的发生发展有关，可抑制肿瘤发生，也可通过促进肿瘤血管生成、抑制肿瘤凋亡等引起肿瘤的发生发展，与胃癌、前列腺癌、非小细胞肺癌等有关[16-18]。柯慧慧等[19]研究表明，HMGB1在卵巢癌组织中表达显著高于卵巢囊肿组织。本研究结果表明，卵巢癌患者血清HMGB1水平高于对照组，且卵巢癌淋巴结转移组水平高于非淋巴结转移组，提示HMGB1可能参与了卵巢癌的发病，与淋巴结转移也有一定关系；ROC曲线分析表明，血清HMGB1对卵巢癌淋巴结转移有一定诊断价值，并且是卵巢癌淋巴结转移的危险因素，提示血清HMGB1可能参与了卵巢癌的发生及淋巴结转移，是诊断卵巢癌淋巴结转移可能潜在生物标志物。

目前，超声造影在疾病诊断中的应用越来越广，本研究结果表明超声造影、血清SIRT1、HMGB1水平对卵巢癌淋巴结转移均有一定诊断价值，而联合诊断价值最高，提示临床加以关注与研究。

综上所述，超声造影参数与血清SIRT1、HMGB1均对卵巢癌淋巴结转移有一定诊断价值，联合诊断效能最佳；患者血清SIRT1、HMGB1可能参与了卵巢癌的发生发展，具体机制有待进一步研究。