25-羟基维生素D3、腺苷脱氨酶水平在1型自身免疫性肝炎中的临床价值

李珂，张丹丹，徐峰

（郑州大学第一附属医院 消化内科，河南 郑州 450052）

自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH）是一种由免疫因素参与的病因不明确的慢性肝脏炎症性病变，主要以门脉周围肝炎、高γ球蛋白血症和血清特异性抗体阳性为主要特征［1］。根据特异性自身抗体的性质，可将自身免疫性肝炎分为2种不同的类型：1型AIH主要以血清抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）和（或）抗平滑肌抗体（anti-smooth muscle antibody，SMA）/抗肌动蛋白抗体阳性为特征，2型AIH主要以抗肝肾微粒体1型抗体阳性为特征［2］。AIH可以在任何年龄和种族发病，包括儿童和青春期。在欧洲与亚洲人群中，女性患者多见［3］。25-羟基维生素D3是一种类固醇激素，具有调节免疫的功能，可通过直接刺激T细胞或间接影响抗原呈递细胞的表型，促进T细胞成熟分化，抑制炎症细胞因子的分泌，从而减轻机体的炎症损伤，影响疾病的发生、发展［4］。目前已有研究表明25-羟基维生素D3与多发性硬化症、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等多种自身免疫性疾病的活动相关［5］。腺苷脱氨酶（adenosine deaminase，ADA）是与嘌呤代谢相关的酶，也可参与机体的免疫调节过程。多项研究表明自身免疫性疾病患者中可见血清ADA水平升高［6］。本研究主要探讨25-羟基维生素D3和ADA血清学指标变化与1型AIH患者病情变化之间的关系，探寻简单、便捷、无创的指标评估1型AIH患者病情，了解疾病情况及治疗效果。

1 资料和方法

1.1 一般资料回顾性选取2018年1月至2021年5月于郑州大学第一附属医院确诊且有病理诊断的57例1型AIH患者作为研究对象，同时选取同时期的57例健康人群作为对照组。根据肝脏组织界面性肝炎程度将患者分为轻、中、重度界面性肝炎。1型AIH患者中轻度界面性肝炎组36例，男3例，女33例，中位年龄54.50（47.25，63.50）岁。中度界面性肝炎组16例，男3例，女13例，中位年龄57.00（53.00，64.75）岁。重度界面性肝炎组5例，男1例，女4例，中位年龄57.00（29.00，70.00）岁。

1.2 选取标准（1）纳入标准：1型AIH患者符合《自身免疫性肝炎诊断及治疗共识（2015）》［7］中的诊断标准，主要包括血清转氨酶水平升高、血清免疫球蛋白G水平升高和（或）1种或多种血清特异性自身抗体阳性以及肝脏组织活检特征性病理特征（肝汇管区淋巴细胞-浆细胞浸润、界面性肝炎等）。（2）排除标准：①合并其他病毒性肝炎、酒精性肝病、药物性肝病、非酒精性脂肪性肝病及其他自身免疫性肝病；②合并系统性红斑狼疮、多发性硬化症等其他自身免疫性疾病；③合并心、肺、脑、肾器官功能异常及精神行为异常。

1.3 资料收集收集所有纳入对象入院时的一般资料，包括年龄、性别。研究对象均在晨起空腹状态下抽取外周静脉血，离心（3 000 r·min-1）分离血清后，使用武汉伊莱瑞特生物科技试剂盒检测血清25-羟基维生素D3；采用罗氏702全自动生化免疫分析仪检测血清ADA、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、谷氨酰转移酶（glutamyltransferase，GGT）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、白蛋白、球蛋白、前白蛋白、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素水平，所使用的试剂来自上海华生有限公司。所有研究对象根据肝脏组织界面性肝炎程度分组：轻度界面性肝炎指肝脏组织局部或少数的门管区破坏，中度界面性肝炎指肝脏＜50%的门管区或纤维间隔破坏，重度界面性肝炎是指肝脏＞50%的门管区或纤维间隔破坏。

1.4 统计学方法应用SPSS 25.0统计软件处理数据。不符合正态分布的计量资料用中位数及四分位数［M（P25，P75）］表示，两组间比较采用Wilcoxon秩和检验，多样本比较采用Kruskal-Wallis H检验；计数资料以频数和构成比（%）表示，采用χ2检验；采用Spearman进行相关性分析，探寻25-羟基维生素D3、ADA水平与ALT、AST、GGT、ALP、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、界面性肝炎程度之间的相关性。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 1型AIH患者与健康人群血清25-羟基维生素D3、ADA水平1型AIH患者血清25-羟基维生素D3水平低于健康人群，ADA水平高于健康人群，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 1型AIH患者与健康人群血清25-羟基维生素D3、ADA水平比较［M（P25，P75）］

2.2 不同组别1型AIH患者血清学指标水平3组1型AIH患者在性别、年龄上差异无统计学意义（P＞0.05），但肝功能（ALT、AST、GGT、ALP、白蛋白、球蛋白、前白蛋白、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素）、ADA、25-羟基维生素D3水平之间差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 3组1型AIH患者血清学指标水平比较

2.3 不同组别1型AIH患者25-羟基维生素D3、ADA水平轻度界面性肝炎组1型AIH患者25-羟基维生素D3水平高于中度界面性肝炎患者和重度界面性肝炎患者，ADA水平低于中度界面性肝炎患者和重度界面性肝炎患者（P＜0.05），但血清25-羟基维生素D3、ADA在中度界面性肝炎组患者与重度界面性肝炎患者之间差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 不同组别1型自身免疫性肝炎患者25-羟维生素D3、ADA水平比较

2.4 相关性分析经Spearman相关性分析可知：25-羟基维生素D3与ALT、AST、GGT、球蛋白、直接胆红素、间接胆红素、界面性肝炎程度呈负相关（r＜0，P＜0.05），与白蛋白、前白蛋白呈正相关（r＞0，P＜0.05），与ALP、总胆红素之间无明显相关性（P＞0.05）；ADA与ALT、AST、GGT、ALP、球蛋白、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、界面性肝炎程度呈正相关（r＞0，P＜0.05），与白蛋白、前白蛋白呈负相关（r＜0，P＜0.05）。见表4。

表4 25-羟基维生素D3、ADA与1型AIH病情的相关性

3 讨论

AIH是由机体自身免疫功能失调，肝脏慢性长期炎症浸润引起的病变。AIH的病因目前尚不清楚，但遗传和环境因素可能发挥重要作用，来自人类白细胞抗原的基因显示与AIH的发生发展有很强的相关性［8］。T、B淋巴细胞分泌的针对自身组织的抗体，可攻击肝脏自身组织细胞，导致肝细胞发生病理学改变［9］。AIH病程长，病情具有波动性，治疗后容易复发，长期炎症刺激可引起肝脏组织逐渐纤维化，进而发展为肝硬化、肝衰竭甚至死亡［10］。AIH治疗的总体目标是诱导并保持对炎症因子的完全抑制，同时预防疾病发展为肝硬化、肝衰竭［11］。研究表明，多数AIH患者在免疫抑制治疗过程中肝纤维化程度能够得到改善甚至逆转。在有效、系统的个体化治疗方案制定后需要密切监测AIH患者病情，将有助于降低肝脏相关事件的发生，改善预后［12］。肝脏穿刺活检是判断AIH组织学变化的金标准，但其创伤大，难以作为常规检查手段应用于临床。因此，探寻评估AIH患者病情变化的无创便捷指标成为目前研究的新目标，本研究分析了非侵入性的简单便捷的血清学指标25-羟基维生素D3、ADA水平与1型AIH患者肝功能指标、界面性肝炎程度之间的关系，探讨25-羟基维生素D3、ADA水平在1型AIH中的临床价值。

25-羟基维生素D3是维生素D3在肝脏25-羟化酶作用下形成的具有生物效应的活化维生素D3，可参与机体细胞的增殖、分化以及调节免疫功能［12］。25-羟基维生素D3不仅参与机体钙磷水平调节，而且可以抑制免疫细胞活性，抑制炎症细胞因子的分泌，减轻炎症刺激损伤。同时可以诱导机体活化的B淋巴细胞凋亡，抑制自身抗体的生成［13］。目前多项研究已经证实25-羟基维生素D3与系统性红斑狼疮、多发性硬化症等多种自身免疫性疾病相关，但其与1型AIH 的 关 系 尚 不 明 确。Miroliaee等［14］研 究 表 明64%～92%慢性肝病患者血清维生素D水平下降。本研究结果显示轻度界面性肝炎组患者25-羟基维生素D3水平高于中度界面性肝炎组和重度界面性肝炎组患者，而且25-羟基维生素D3水平与1型AIH患者肝功能、界面性肝炎程度之间具有相关性。这表明血清中25-羟基维生素D3水平可早期预测1型AIH患者病情变化，提示其可作为评估1型AIH患者病情变化的血清学指标。由于样本量较小，血清25-羟基维生素D3水平在中度界面性肝炎组患者与重度界面性肝炎患者之间无明显差异。

ADA在人体嘌呤核苷酸的代谢过程中发挥重要作用，主要分布于机体的胸腺、脾脏、淋巴组织等。腺苷是人体重要的免疫抑制因子，ADA可以催化人体腺苷转变为次黄嘌呤核苷，从而调节机体的免疫稳态［15］。ADA在T淋巴细胞中的活性高于B淋巴细胞，其参与人体前T淋巴细胞转化成淋巴细胞的过程。1型AIH患者体内存在T、B淋巴细胞的异常增殖、分化等。本研究结果显示轻度界面性肝炎患者体内ADA水平低于中度界面性肝炎和重度界面性肝炎患者，ADA随着肝功能、界面性肝炎程度变化而变化，与病情变化具有一致性，表明ADA可作为监测1型AIH病情变化的潜在指标，预测疾病变化。

综上，25-羟基维生素D3、ADA水平在1型AIH不同界面性肝炎组差异有统计学意义，而且其水平变化与肝功能、界面性肝炎程度之间具有相关性。因此25-羟基维生素D3、ADA可作为1型AIH患者血清生化学、组织学病情评估和预测的新血清学指标。但由于本研究总体样本量小，尤其是重度界面性肝炎组研究对象较少，中度界面性肝炎患者和重度界面性肝炎患者之间的差异无统计学意义。日后需要更多大样本的研究来证实结果并进一步明确中度和重度界面性肝炎组之间的关系，进一步明确25-羟基维生素D3、ADA在1型AIH患者中表达的意义。