安乃近残留溶剂甲醛的气相色谱检测法

王晓凤，王莉莉，焦银蕾，康 倩，李焕君，张晓灿，张 云，王 丽，何晓晨，刘晓莲，马宁宁

（河北冀衡药业股份有限公司，河北 衡水 053400）

0 引言

安乃近是重要的老牌解热镇痛药，由于其疗效确切，使用方便，价格低廉，在医学上发挥了重大作用，在世界上被广泛用于发热、急性关节炎、头痛等症的治疗，其在解热镇痛类药中是为数不多的既能口服又可注射的品种。

安乃近还可以用于滴鼻，尤其小儿鼻腔内毛细血管丰富，药液接触面大，易于吸收，使用时药效快，作用强。

安乃近极易溶于水，作用较为迅速，解热镇痛作用强而快。

安乃近合成工艺一般以吡唑酮为基础原料，经甲基化反应制得安替比林；再经亚硝化、还原成4- 氨基安替比林，然后经甲酰化、甲基化得4- 甲氨基安替比林；再经缩合反应得到安乃近。

安乃近最后工序缩合反应用到的原料为甲醛、焦亚硫酸钠，因要保证主原料4- 甲氨基安替比林完全反应，所以操作中甲醛、焦亚硫酸钠一般过量，而后期纯化工序焦亚硫酸钠随母液离心与产品分离，过量甲醛不易去除，可能残留到安乃近产品中。但是中国药典、欧盟药典、美国药典等均没有相于残留溶剂甲醛检测方法的报道，按照国际制药指南ICHQ3C，甲醛属于对人体有害的有机溶剂，所以非常有必要对该残留溶剂给予控制，本实验开发了安乃近残留溶剂甲醛的定量检测方法，为安乃近生产提供重要的理论依据，同时也达到提高安乃近质量的目的。

1 实验仪器与试剂

1.1 实验仪器

CIarus 580 气相色谱仪，珀金埃尔默企业管理（上海） 有限公司。

PURELAB flex 型超纯水仪，威立雅水处理技术（上海） 有限公司。

BSA224S 型电子分析天平，赛多利斯科学仪器（北京） 有限公司。

KQ-250DB 型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。

SPN-300 高纯度氮气发生器，北京中惠普分析技术研究所。

SPH-300 高纯度氢气发生器，北京中惠普分析技术研究所。

SPB-3 全自动空气源（北京中惠普分析技术研究所）。

1.2 试 剂

甲醛，烟台远东精细化工有限公司。

N,N- 二甲基甲酰胺，天津市大茂化学试剂厂。均为色谱纯试剂。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

柱子：DB-WAX 柱（30 m×0.32 mm×0.50 μm）。

柱温：80 ℃。

进样器温度：200 ℃。

检测器温度：350 ℃。

载气：高纯氮气。

载气流速：2 mL/min。

氢气流速：35 mL/min。

空气流速：300 mL/min。

进样体积：1.0 uL。

量程：1。

衰减：-3。

检测器：FID。

计算方法：外标法。

2.2 溶液配制

供试品溶液：精密称取0.5 g 样品于10 mL 容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺溶解，超声处理。用离心机处理不溶性部分，取上清液作为供试品溶液。

甲醛储备溶液：精密称取0.1 g 甲醛于100 mL容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺溶解，并稀至刻度作为储备液。

甲醛对照液：取10 mL 甲醛储备液于50 mL 容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺至刻度，摇匀，既得200 μg/mL 甲醛对照液。

2.3 操作步骤

分别吸取1.0 μL 甲醛对照液和供试品溶液注入气相色谱仪，对照溶液进5 针，供试液（1）、（2） 进平行样各进一针，按外标法计算甲醛的含量：

按外标法计算甲醛的含量：

计算公式如下：

式中，As 为样品溶液中甲醛的峰面积；Ar 为标准溶液中甲醛的峰面积；Wr 为配制标准溶液称取甲醛的质量；Ws 为称取样品的质量。

2.4 气相色谱方法学考察

2.4.1 专属性考察

取空白溶剂1 μL，按照“2.1”项下的色谱条件，注入气相色谱仪，检测结果表明，无其它色谱杂峰，对安乃近残留溶剂甲醛的含量测定无明显干扰，证明该方法专属性良好。

2.4.2 线性关系考察

精密称取58.8948-58.5948=0.3000 g 甲醛（含量为33.10%） 于100 mL 容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺溶解，并稀至刻度作为甲醛储备液。取10 mL 甲醛储备液于50 mL 容量瓶中，加N,N- 二甲基甲酰胺至刻度，摇匀，既得甲醛对照液。

自甲醛的定量限至限度的150%，稀释成浓度为50、100、150、200、250 和300 μg/mL 6 个不同甲醛标准品溶液，并依次编号。取上述各浓度的溶液1μL，按照“2.1”项下的色谱条件，注入气相色谱仪，记录色谱图并计算峰面积。得出的数据以峰面积为纵坐标，以甲醛溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。在50 ～300 μg/mL 的线性范围内，具有良好的线性关系，相关系数R2=0.9998，线性方程为：y=49.426 x-1900.9。甲醛标准品溶液不同浓度峰面积表见表1。

表1 甲醛标准品溶液不同浓度峰面积表Table 1 Table of peak areas of different concentrations of formaldehyde standard solution

甲醛溶液线性关系如图1 所示。

图1 甲醛溶液线性关系Fig.1 Linear relationship of the formaldehyde solution

2.4.2 重复性考察

精密称定甲醛标准品适量，配制成甲醛标准品0.2 mg/mL 的溶液，取上述溶液1 μL，按照“2.1”项下的色谱条件，注入气相色谱仪，连续进样6针。结果表明，检测气相检测重复性良好，各峰面积RSD＜5.0%，符合分析方法学要求。甲醛标准品溶液峰面积表见表2。

表2 甲醛标准品溶液峰面积表Table 2 Peak area of formaldehyde standard solution

2.4.3 稳定性考察

精密称定甲醛标准品适量，加N,N 二甲基甲酰胺稀释剂稀释成适当浓度的甲醛对照品溶液，分别于0、2、4、8、12、18、24 h 各1μL，按照“2.1”项下的色谱条件，注入气相色谱仪，记录色谱图。结果表明，与0 h 相比，24 h 溶液稳定，峰面积RSD＜5%，符合方法学要求。且系统适用性实验表明，溶剂峰和甲醛峰分离度较好，分离度符合要求。

2.4.4 样品的检测

按“2.2”项下溶液的配制标准，取六批样品进行有关残留溶剂甲醛的检测，杂质的量分别为10-4、8.9×10-5、5×10-5、7×10-5、6×10-5和8×10-5，均符合控制标准甲醛不得超过5×10-4要求。

3 结语

本文以DB-WAX 柱（30 m×0.32 mm×0.50 um），FID 检测器，在程序升温条件下进行检测安乃近残留溶剂甲醛的含量，具有操作简单、耗时小和误差小等优点，使用N,N 二甲基甲酰胺作溶剂，溶剂峰与甲醛峰能很好分离，该气相色谱法检测甲醛溶液线性关系良好，线性方程：y=49.426 x-1900.9，相对系数R2=0.9998，相对误差RSD＜5%。该方法能准确可靠的测定安乃近残留溶剂甲醛的含量，为提高安乃近产品的质量提供了保障。